Культуры клеток первичные и вторичные

На первом этапе получения первичной культуры происходит стерильное удаление фрагмента ткани животного и его механическая или ферментативная дезагрегация. Ткань может быть просто измельчена до кусочков объемом около 1 мм , которые прикрепляются к поверхности чашки благодаря собственной адгезивности, или наличию насечек на чашке или с помощью сгустка плазмы [1]. В этих случаях будет происходить рост клеток из фрагментов и клетки, мигрирующие из эксплантатов, могут использоваться для пассирования. Фрагменты ткани (эксплантаты) могут переноситься на новые чашки мигрирующие клетки могут удаляться трипсинизацией, а остающийся эксплантат будет образовывать новые выросты. Трипсинизированные клетки пересеваются в новые сосуды и становятся вторичной культурой. По формальным признакам такая культура носит название линии клеток. [c.22]

Если кусочки нормальной ткани диссоциировать и поместить в соответствующие для культур ткани условия, то клетки растут как первичные и при пассаже могут давать начало вторичным клот-кайЕ. Такие клетки в зависимости от вида и возраста животного пассируются ограниченное число раз до тех пор, пока становятся не способными к дальнейшей пролиферации. В некоторых случаях небольшая часть потомства вторичных клеток приобретает способность к пролиферации. Такие клетки образуют клеточную линию. Когда кусочки опухоли культивируются в таких же условиях, как и нормальные клетки, опухолевые клетки безгранично растут. Таким образом, нормальные и опухолевые клетки имеют различные свойства при росте in vitro. [c.6]

Растительные клетки способны синтезировать несравненно большее количество метаболитов по сравнению с микробными клетками. Продукты вторичного обмена клеточных культур растений в ряде случаев не имеют аналогов и не могут быть получены методом органического синтеза. Таким образом, клеточный синтез растительных клеток играет уникальную роль при получении ряда вешеств для нужд промышленности и медицины. Первичные культуры клеток во многих случаях содержат небольшие количества вторичных метаболитов, имеющих прикладное значение. Поэтому необходимо оптимизировать условия культивирования, целенаправленно интенсифицировать синтез целевого продукта. Это осуществляется [c.498]

Культуры, приготовленные непосредственно из тканей организма, с использованием первичного этапа фракционирования клеток и без оного, называют первичными культурами. В большинстве случаев клетки первичной культуры можно перенести из культуральной чашки и использовать для получения большого количества вторичных культур, которые можно последовательно перевивать в течение недель или месяцев. Часто эти клетки сохраняют признаки дифференцировки тех тканей, из которых они были получены. Так, фибробласты продолжают синтезировать коллаген, клетки скелетных мышц эмбриона сливаются, образуя гигантские мышечные волокна, которые спонтанно сокращаются в чашках для культуры тканей у нервных клеток возникают аксоны, характеризующиеся электровозбудимостью и способностью формировать синапсы с другими нервными клетками клетки эпителия формируют обширные слои, сохраняющие многие свойства интактного эпителия. Поскольку все эти события можно наблюдать при росте клеток в культуре, для их изучения используют многие методы, недоступные при работе с интактными тканями. [c.204]

Презентируюшие антиген (АГ) макрофаги (МФ), относящиеся к определенному гаплотипу по генам II класса главного комплекса гистосовместимости (например, 1-А или I-A "), помещали в культуру in vitro вместе с Т-лимфоцитами. После определенного времени совместного культивирования Т-лимфоциты, прошедшие примирование в первичной культуре, переносили во вторичную культуру, куда добавляли интактные клетки селезенки и гомологичный антиген. В тех слу чаях, когда Т-лимфоциты получали от первичной культуры, в которой взаимодействующие клетки (макрофаги и Т-клетки) были идентичны по генам II класса, констатировали выраженное развитие антителопродукции во вторичной культуре. В то же время Т-лимфоциты от первичной культуры, содержавшей не идентичные по генам II класса клетки, оказывались неспособными обеспечить хелперный эффект во вторичной культуре. Иначе, созревание Т-хелперов из предшественников происходит то.тько в условиях идентичности по генам II класса между взаимодействующими клетками [c.168]

СОСТОИТ из полисахаридов, в том числе ГМЦ, а также липидов и белков. Лигнин и лигниноподобные вещества в ней в больщинст-ве случаев либо не обнаружены, либо присутствуют в небольших количествах. Например, в первичной оболочке тканевой культуры тополя содержится 4,8% лигниноподобных веществ [9]. Первичные оболочки различных высших растений мало различаются по морфологии и химическому составу, в то время как вторичные клеточные стенки у разных видов растений и даже у одного растения, но в клетках, выполняющих разные функции, имеют существенные отличия. [c.29]

Важно также сохранить присущие клеткам метаболические пути при их выращивании в суспензионных культурах. Более того, регулируя обмен, можно добиваться заметного повышения выхода целевых продуктов. При этом всегда необходимо учитывать тип дифференцировки, или состояния специализации исходных клеток, так как от него зависит видоспецифичность первичного и вторичного метаболизма. [c.509]

В культуру поглотивщих антиген макрофагов вносились предшественники Т-хелперов, которые были либо генетически идентичными, либо отличались от макрофагов по генам МНС. После определенного времени совместного культивирования Т-клетки переносили во вторичную культуру, содержащую сингенные клетки селезенки (источник антителопродуцентов) и гомологичный антиген. В тех случаях, когда Т-лимфоциты получали от первичной культуры, в которой взаимодействующие клетки были идентичны по генам, контролирующим молекулы II класса, констатировалось сильное развитие иммунного ответа. В то же время Т-клетки от культуры, содержащей не идентичные по генам II класса клетки, оказались неспособными обеспечить хелперный эффект во вторичной культуре. [c.167]

Эта реакция пролиферации развивается in virto при взаимодействии генетически отличающихся (аллогенных) лимфоцитов. Результат реакции состоит в накоплении цитотоксических Т-лимфоцитов ( D8 Т-клеток), специфичных к антигенам гистосовместимости клеггок-стико ляторов. В первичной культуре предшественники ЦТЛ (пр. D8), представленные в суммарной популяции анализируемых лимфоцитов, после распознавания аллоантигенов клеток-стимуляторов вступают в процесс пролиферации и дифференцировки до зрелых ЦТЛ ( D8). Интенсивность пролиферативной реакции оценивают по включению Н-тимидина в размножающиеся клетки. Для созревания пр. D8. необходима помощь со стороны макрофагов и хелперных D4 Т-клеток (Тн2), образующихся из антигенраспознающих предшественников (ТнО). Оценку активности накопившихся в первичной культуре D8 Т-клеток проводят во вторичной культуре (см. рис. 9.1). В качестве мишеней используют те аллогенные клетки, которые в первичной культуре выступали стимуляторами [c.204]

Первичный иммунологический ответ типа транспланта ционного иммунитета удается вызвать in vitro на живы клетки, несущие трансплантационные антигены. Реакцн проявляющаяся в виде бласттрансформации в смешанны культурах, в отдельных случаях может быть доведена д резорбции клеток-мишеней. На неживые антигены, на пример туберкулин, удалось воспроизвести лить вторичны иммунологический ответ. [c.143]

Клетки крысиной гепа-томы Новикова N131-67 Вторичная культура клеток мышиного эмбриона Первичная культура клеток печени обезьян мар-мозеток РКМК-6 [c.47]

Не все аденовирусы человека хорошо размножаются в клетках HeLa или КВ и в отдельных случаях (например, для аденовируса типа 12) дают более высокие титры в первичных или вторичных культурах клеток почки эмбриона человека. Некоторые аденовирусы кишечника человека не удается размножить ни в одной из перечисленных выше культур. В этом случае используют клетки человека 293, трансформированные аденовирусом типа 5 [7]. Методы приготовления культуры почки эмб-/ риона человека и клеток 293 описаны ниже. [c.261]

Наиболее чувствительны к аденовирусам обезьян первичные или вторичные культуры клеток почки зеленой мартышки Сег-сориНесиз аеШюрз. Кроме того, имеются сообщения об успешном размножении этих вирусов в клетках нeкotopыx линий человека, например Нер-2. [c.262]

Блэк и Мельник (1955) описали образование микробляшек вируса В в культуре почечного эпителия обезьян. Эти бляшки представляли характерные очаги поражения, которые были видны лишь при малом увеличении микроскопа. Появление бляшек отмечали через 12 часов после заражения в последующие 24—48 часов они постепенно увеличивались в диаметре, сливаясь друг с другом. По мнению указанных авторов, образование микроскопических бляшек вирусом В связано с особенностями его распространения в зараженной культуре ткани (Блэк, Мельник, 1955). При небольшой заражающей дозе в течение первых 24 часов вирус не выходит за пределы первичных фокусов пора жения, так как новообразованные вирусные частицы не освобождаются из пораженных клеток в жидкую культуральную фазу, а проникают в соседние нормальные клетки. Поэтому в течение этого времени подсчет фокусов поражения позволяет с большой точностью вычислить титр вируса в инфекционном материале. Лишь при далеко зашедшей дегенерации наступает деструкция клеток, вследствие чего вирус освобождается в культуральную среду. На этой стадии подсчет бляшек уже не может дать правильного представления о титре вируса в инфекционном материале вследствие образования многочисленных вторичных фокусов поражения. [c.175]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология