Клетки сингенные

Рис. 163. Схема получения моноклональных антител с помощью габридом-ной техники АС — агент слияния клеток, 1 —В-клетки из селезенки иммунной мыши, 2 — культура миеломных клеток мыши, 3 — гибридизация, 4 — гибридомы, 5 — селекция и клонирование гибридом, 6 — гибридомы, образующие моноклональные антитела, 7 —- введение гибридом, образующих моноклональные антитела, в организм сингенной мыши, 8 — клетки гибридомы, образующие моноклональные антитела, культивируемые в виде культуры ткани, 9 — выращивание гибридомных клеток, образующих моноклональные антитела, в ферментаторе, 1дкж — иммуноглобулины в культуральной жидкости, 1дас — иммуноглобулины в асцитической жидкости, 10 — высаливание 1д-ов аммония сульфатом, 11 — стандартизация 1д-ов, 12 — лиофили-зация 1д-ов.

Сингенные клетки (клетки-убийцы) и сингенные макрофаги получаются при пересадке опухоли животным того же вида. [c.244]

В адаптивном переносе (25—40) 10 клеток вводят внутривенно сингенным реципиентам, предварительно облученным (за 24 ч) дозой 5,5 Гр. Реципиентам затем вводят внутрибрюшинно антиген (на физиологическом растворе). Через 4 сут мышей забивают и выделенные клетки селезенки употребляют для гибридизации. [c.102]

Эксперименты с трансплантацией клеток гомозиготных родительских доноров в организм гетерозиготного реципиента были направлены на создание сингенного микроокружения в генетически отличающемся хозяине. При этом трансплантируемые клетки костного мозга оставались интактными. Пытаясь преодолеть генетические различия между донором костномозговых клеток и реципиентом, автор учебника и сотрудники пошли по другому пути проводилось фенотипическое воздействие не на реципиента, где создавалось соответствующее микроокружение, а на донорские клетки костного мозга. [c.298]

Во всех случаях независимо от конкретных задач исследования проводили инкубацию анализируемых клеток с одним из классов РНК в течение 30 мин при 37 °С. Проинкубированные клетки вводили сингенным или аллогенным реципиентам. [c.299]

Из периаортальных и паховых лимфатических узлов одной иммунизированной мыши получают 10—40-10 клеток. Этого количества достаточно на весь опыт. Кроме того, клетки сингенных мышей можно объединять, так как различия в средних показателях между индивидуальными суспензиями и общей смесью клеток от разных мышей незначительны. [c.325]

Первые опыты в этом направлении были проведены с ин-бредными морскими свинками линий 2 и 13, которые отличаются друг от друга только по генам, контролирующим антигены II класса МНС (рис. 7.4). Т-клетки морских свинок, предварительно сенсибилизированных одним из антигенов (овальбумином, туберкулином и др.), вносили в культуру макрофагов, которые презентиру-ют антиген, использованный для иммунизации. Во всех случаях, когда макрофаги и Т-клетки были генетически идентичными (снн-генными), регистрировался сильный пролиферативный ответ Т-клеток, распознавших антиген на поверхности сингенных макрофагов. В то же время Т-клетки, отличающиеся от макрофагов по антигенам II класса, не в состоянии развить пролиферативный ответ в несингенной системе клеточного взаимодействия. Эти первые опыты позволили предположить, что примированные Т-клетки распознают не только антиген, использованный для иммунизи-ции, но и собственные антигены гистосовместимости. Однако уз- [c.164]

Инбредные морские свинки линий 2 и 13 отличаются друг от друга только по генам II класса МНС. Макрофаги (МФ), проинкубированные с антигеном (АГ) (овальбумином, туберкулином и др.), обеспечивают интенсивную пролиферацию in vitro сингенных, идентичных по генам II класса Т-клеток, примированных к соответствующему антигену (А). В то же время Т-клетки морских свинок, отличающиеся от донора макрофагов по генам II класса, не в состоянии развить пролиферативный ответ (Б). Нет ответа и при ксеногенном сочетании морская свинка — крыса (В) [c.165]

В культуру поглотивщих антиген макрофагов вносились предшественники Т-хелперов, которые были либо генетически идентичными, либо отличались от макрофагов по генам МНС. После определенного времени совместного культивирования Т-клетки переносили во вторичную культуру, содержащую сингенные клетки селезенки (источник антителопродуцентов) и гомологичный антиген. В тех случаях, когда Т-лимфоциты получали от первичной культуры, в которой взаимодействующие клетки были идентичны по генам, контролирующим молекулы II класса, констатировалось сильное развитие иммунного ответа. В то же время Т-клетки от культуры, содержащей не идентичные по генам II класса клетки, оказались неспособными обеспечить хелперный эффект во вторичной культуре. [c.167]

Мышей-гибркдов (Н-2 / Н-2 )р1 облучали летальной дозой, чтобы выбить собственные лимфоидные клетки, и тимэкгомиро-вали. В контрольных опытах обработанным подобным образом животным трансплантировали костный мозг и строму тимуса от гибридных же (сингенных) доноров. Через 3 месяца (щ)емя, достаточное для полного восстановления утраченной при облучении лимфоидной ткани) животных заражали вирусом оспы и еще через 6 дней по завершению латентного периода из селезенки иммунизированных животных выделяли лим циты. Цитотоксическую активность этих клеток проверяли на клетках-мишенях одного из родителей (гаплотип родителей Н-2 или Н-2 ). В обоих случаях эф-фекторные Т-клетки гибридов развивали цитотоксическую реакцию. [c.173]

А. Мышей-гибридов (N-2 , Н-2 )Р облучали летальной дозой и эктомиро-вали тимус. Таким лишенным клеток собственной лимфоидной ткани мышам компенсаторно трансплантировали эпителиальную строму сингенного тимуса и син-генный костный мозг. Через 3 мес (время, достаточное для восстановления лимфоидной ткани облученных реципиентов) животных заражали вирусом оспы. Через 6 дней из селезенки иммунизированных мышей выделяли клетки, цитоггокси-ческую активность которых проверяли на клетках-мишенях одного из родительских гаплотипов (Н-г или Н-2 ). В обоих случаях эффекторные клетки гибридов развивали цитотоксическую реакцию. [c.174]

В последнем случае в качестве стимуляторов для примирования используют клетки лимфоидной ткани, генетически отличающиеся от распознающих предшественников D8 Т-лимфоцитов, модифицированные вирусом или иным антигеном (например, гаптеном) сингенные клетки, а также сингенные раковые клетки. Клет- [c.203]

Мышей иммунизировали конъюгатом N1P-OA (N1P — гаптен 4-гидрокси-З-йод-5-нитрофенилуксусная кислота, ОА — овальбумин кур, использованный как носитель для гаптена). При переносе клеток селезенки примированных мышей в организм сингенного облученного хозяина развивается анти-КЧР-ответ только при использовании гомологичного антигена (NIP-овальбумина). Прсдукиия антител к NIP отсутствует, если в качестве носителя использован гетерологичный белок (бычий сывороточный альбумин — BSA, сывороточный альбумин человека — HSA). При введении интактным мышам клеток селезенки от мышей, примированных к NIP-OA и BSA, ответ развивается как к NIP-OA, так и к NiP-BSA. Р.сли из клеток селезенки мышей, иммунизированных BSA, удалить Т-клетки, то оставшаяся популяция В-клеток не способна отвечать на NIP-BSA, хотя реактивность к NIP-OA сохраняется. Сделан вывод о том, что Т-клетки реагируют на носитель, в то же время В-клетки отвечают на гаптен [c.245]

Наиболее интересная информация для понимания механизма рассматриваемого феномена пришла из тех экспериментов, в которых удалось показать отмену аллогенного подавления. В этих опытах проводился анализ главным образом колониеобразуюшей способности клеток костного мозга родителей в Р[-реципиенте. Основной прием — введение генетически чужеродному реципиенту различных типов клеток, генетически соответствующих донору клеток костного мозга. Иначе, создавались условия сингенного микроокружения по отношению к донорским клеткам. [c.297]

Клеточный тип, образующий сингенную подслойку для формирования колоний, неизвестен. Во всех перечисленных случаях работа проводилась с недифференцированными клеточными смесями, хотя и полученными из разных лимфоидных органов (тимуса, лимфатических узлов, эмбриональной печени, перитонеального экссудата). Данные о том, что отмена аллогенной ингибиции воспроизводится при использовании радиорезистентных клеток, позволяют предположить наличие в трансплантируемой клеточной смеси не только лимфоцитов, но и макрофагов. В то же время хорошо известно, что тканевые макрофаги входят в состав стромы и совместно с другими стромальными клетками формируют микроокружение лимфо-миелоидных органов. Один из возможных механизмов отмены аллогенной ингибиции колониеобразования в несингенном организме связан с заселением стромы макрофагами или другими стромальными клетками донорского происхождения. В результате прекурсорные элементы костного мозга [c.297]

Возможный механизм снижения колониеобразующей способности клеток костного мозга в генетически отличающемся организме и фенотипическая коррекция возникающего подавления представлены на рис 11.11. Прекурсорные кроветворные клетки, введенные в сингенный организм, образуют определенное число колоний. Начало роста колоний зависит от эффективности взаимодействия прекурсора со стромальными элементами селезенки, на которой и формируются КОЕ. Среди компонентов мембранных клеточных структур, обеспечивающих полноценное взаимодей- [c.306]

Показано, что опухоли, индуцируемые канцерогенными химическимми соединениями (например, метилхолантреном), отличаются от нормальных тканей появлением новой антигенной специфичности. Причем у разных животных индуцируемые опухоли, как правило, отличаются друг от друга по антигенным характеристикам. Более того, даже в пределах одной опухоли могут при-сутстювать клетки с разными антигенными специфичностями. Следствием появления новых индуцируемых антигенов является формирование специфического иммунного ответа. На рис. 15.1. представлена схема опыта, иллюстрирующего роль специфических отношений в сингенной системе переноса. При трансплантации индуцированных метилхолантреном опухолей от двух разных особей Б организм интактного сингенного реципиента и одновременное введение Т-клеток от одного из доноров приводит к регрессии опухоли того донора, от которого получены Т-клетки. Опухоль второго донора успешно развивается. Опыты демонстрируют как разную антигенную характеристику опухолей, так и роль специфического иммунитета в регрессии опухоли. [c.348]

Относительный уровень этого гликопротеида в клетках коррелирует со способностью к аллотрансплантации 6 гибридных клеточных линий (ТАЗ-На -f нормальные мышиные эмбриональные фибробласты), Пассирование клеток ТАЗ-St в организм больных пневмонией сингенных мышей в течение первой недели приводит к исчезновению с поверхности клеток эпигликанина и появлению клеток ТАЗ ММ [c.90]

Переработка антигена в макрофагах (процессинг антигена) служит необходимым условием для реализации тимусзависимого иммунного ответа — как гуморального, так и клеточно-опосредованного. Роль макрофагов в антигенспецифической активации Т-лимфоцитов убедительно демонстрируют опыты in vitro. Для этого используют взвесь клеток селезенки или лимфатического узла, из которой удалены А-клетки, что легко осуществить благодаря способности этих клеток прикрепляться к поверхности стекла пли пластика при 37° С, Лимфоидные клетки остаются при этом во взвеси. Если к лимфоидным клеткам, свободным от А-клеток, добавить антиген и культивировать нх в полноценной питательной среде, ни цитологическими методами, ни по включению Н-тимидина в ДНК не удается зарегистрировать пролиферации Т-лимфоцитов. Она наступает только после добавления сингенных А-клеток. Прп этом А-клетки (или макрофаги) не удается заменить интенсивно фагоцитирующими сегментоядерными лейкоцитами (нейтрофилами) и, например, xopoino прикрепляющимися к стеклу или пластику фибробластами. [c.212]

В отличие от гибридом грызунов клетки человека, образующие антитела, разумеется, невозможно выращивать в брюшной полости сингенного хозяина. Однако исследуется возможность размножения клеток человека в брюшинной полости крыс и мышей nude. Большинство же препаратов МКА человека в настоящее время получают непосредственно в виде культуральной среды. Если антитела предполагается использовать для диагностических целей, достаточно просто профильтровать среду через мембрану с диаметром пор 0,2 мкм, чтобы удалить небольшую примесь вируса, который может латентно инфицировать лимфобластоидные клеточные линии. [c.162]

Культуры, обладающие высокой специфической цитолитической активностью, клонируют в S-среде. В каждую лунку панелей для микротитрования вносят в среднем одну гибридную клетку и 2-10 облученных рентгеном (2000 Р) перитонеальных клеток в 200 мкл S-среды. -Перитонеальные клетки получают промыванием СР брюшной полости сингенных или аллогенных мышей. По достижении конфлюентности клоны переносят в лунку ostar 3524, наращивают клетки в S-среде и проверяют их на цитолитическую активность. Клоны, обладающие высокой цитолитической активностью, культивируют в S-среде и обычно повторно клонируют несколько раз, для того чтобы отобрать клоны со стабильной экспрессией цитолитической активности. Повторное клонирование обычно проводят в S-среде без каких-либо фидерных (питающих) клеток. [c.289]

В качестве источника хелперного фактора использовали также облученные сплеиоциты, сингенные отвечающим клеткам (Pilarski, 1977). Однако добавление большого числа клеток к микрокультурам может ухудшить условия культивирования, что помешает оптимальному образованию ЦТЛ. Числа ЦТЛ-П, определяемые при использовании этой методики, обычно меньше, чем при добавлении растворимых хелпериых факторов Т-клеток. Кроме того, неясно, какие именно клеточные взаимодействия происходят при таких условиях культивирования. [c.253]

ПОК или клонированные аллореактивиые Т-клетки культивируют вместе с сингенными и аллогенными селезеночными клетками-стимуляторами. Эффект стимуляции измеряют по включению Н-тимидина в различные сроки (2, 3 и 4 дня) после добавления спленоцитов. [c.308]

Каждый опыт проводят с двумя или тремя параллельными пробами н результаты выражают в виде средней величины (имп/мин) для параллельных проб. Аллореактивность можно выразить как разность или как отношение между средними величинами, полученными в опытах с аллогенными и сингенными клетками-стимуляторами в СКЛ. [c.309]

Очень важен выбор СПК- Ее митогеииын эффект иа клетки селезенки должен быть минимальным (о чем судят по низкому фону в СКЛ с сингенными сплеиоцитами), и оиа должна обеспечить высокий уровень стимуляции в смешанной культуре >л-логенных лимфоцитов. [c.312]

Химические воздействия во время гаптенизации не вызывают повреждения лимфоцитов. Из рис. 3 видно, что клетки, гаптенизированные ацетил-ГСК-эфиром, не вызывают бласт-трансформации и не лизируются ни одной из сингенных популяций отвечающих клеток. [c.204]

Смотреть страницы где упоминается термин Клетки сингенные: [c.398] [c.398] [c.244] [c.416] [c.209] [c.217] [c.105] [c.168] [c.204] [c.244] [c.295] [c.296] [c.313] [c.369] [c.7] [c.84] [c.89] [c.194] [c.290] [c.128] [c.224] [c.233] [c.423] [c.244]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология