Методы, используемые при изучении метаболизма

Механизм биосинтеза микроорганизмами биологически активных соединений, в том числе антибиотиков, изучается разными методами. В последние годы нередко используют метод сравнительного анализа путей метаболизма продуцентов антибиотических веществ и соответствующих им мутантов. В качестве мутантов применяют штаммы, у которых биосинтез антибиотика нарушен в разных звеньях цепи реакций, связанных с образованием изучаемого соединения (такие мутанты часто синтезируют не полностью завершенные молекулы этих веществ), или мутанты, не способные вырабатывать соответствующие биологически активные вещества. Методом сравнительного анализа получены интересные результаты при изучении биосинтеза таких антибиотиков, как тетрациклин, новобиоцин, хлортетрациклин, нистатин, пенициллин, окситетрациклин, стрептомицин и др. [c.90]

Другим важным преимуществом МС является возможность получения количественной информации о неразделенных или совместно элюируемых пиках. С этой целью проводят выделение ионного тока фрагмента с требуемой массой и рассматривают этот фрагмент как следовое соединение. Такой подход часто используется, чтобы уменьшить продолжительность ГХ анализа и быстро получить информацию о целевых соединениях в сложных матрицах. Описываемый подход используется в качестве стандартного метода при изучении метаболизма лекарств. Меченные изотопами молекулы элюируются совместно с определяемыми лекарственными соединениями. Затем получают профиль тока выбранного иона и используют полученные данные в качестве внутреннего стандарта для определенных биологических систем [10]. [c.82]

Как стабильные , так и радиоактивные изотопы широко используются в химических и биологических исследованиях. Введение изотопных меток произвело целую революцию в изучении метаболизма. В одном из первых биологических экспериментов, основанных на использовании стабильного изотопа (регистрируемого масс-спектрометрически), Шен-геймер с сотрудниками в 1937 г. обнаружили неожиданно высокую скорость обновления белков в живых тканях (гл. 14, разд. Б). Используя СО2, Кэлвин и др. впервые проследили путь углерода в процессе фотосинтеза (дополнение 11-А). Аналогичным образом применение изотопов Р и 5 позволило изучить метаболизм фосфора и серы тритий ( Н) нашел широкое применение для мечения разнообразных органических соединений, например тимина. Использование радиоактивных изотопов лежит в основе чувствительных аналитических методов, к числу которых относится радиоиммуноанализ [c.168]

Хроматография относится к современным методам химического анализа. Значение этого метода очень велико. Хроматография позволяет изучать круговорот веществ в природе, идентифицировать загрязнения в атмосфере и природных водных бассейнах, широко используется в исследовании и производстве лекарственных препаратов, а также в изучении метаболизма веществ в организме человека. Развитие хроматографии связано с разработкой все новых и новых методик, отражающих новые достижения в этой области аналитической химии. [c.9]

В связи с изучением метаболизма азота в зародышах.амфибий (было использовано еще одно видоизменение метода Кьельдаля [6]. Аммиак отгоняют в титрованный раствор бииодата калия и после добавления иодистого калия титруют смесь раствором тиосульфата. В присутствии крахмала наблюдается резкий конец титрования. [c.20]

В данном разделе рассматриваются физические, химические и ферментативные методы, которые используются при исследовании метаболизма бактерий. В последующих главах описаны физические методы и приборы, фракционирование и анализ химических компонентов, выделение и количественное определение ферментов, изучение катализируемых ими реакций, а также исследование проницаемости клеток и транспортных процессов. Все эти вопросы разработаны настолько хорошо, что вполне оправданно опубликование специальных книг, посвященных их методологии и применению. Однако в данном случае авторы ограничились описанием только самых надежных и простых методов, которые могут использовать для достаточно основательного изучения метаболизма бактерий даже начинающие исследователи. [c.166]

С помощью метода локального ЯМР можно регистрировать разрешенные ЯМР-спектры от выделенного органа в живом существе. Локальный резонанс является основой для изучения физиологических процессов с помощью неразрушающих и бесконтактных методов. Особенно полезным оказался метод ЯМР на ядре Р при исследовании метаболизма [10.54 — 10.56]. Он позволяет измерять концентрации и pH в живых тканях. Для экспериментов этого типа требования к пространственному разрешению менее жесткие, чем для способов формирования изображения, и метод фокусировки поля часто является достаточным, хотя к настоящему времени предложено и много других методов. Для достижения пространственной селективности широко используются поверхностные катушки [10.57а] и импульсные последовательности, которые выделяют элементы объема [10.576]. [c.642]

В нашей лаборатории регуляции метаболизма мозга этот подход принят на вооружение уже в течение многих лет. Основным объектом исследования являлись ФЛ головного мозга крыс, как суммарные, так и отдельные их фракции. Использовались различного рода методы воздействия на организм, применяемые в нейрофизиологии, нейрофармакологии, патологической физиологии, эндокринологии и др. Подбирались факторы, повышающие или, наоборот, угнетающие функциональную активность ЦНС. Наиболее интенсивно развивалось традиционное для лаборатории направление — изучение влияния на обмен ФЛ мозга острого кислородного голодания организма. Основным методическим подходом в наших исследованиях являлось применение для изучения интенсивности обмена ФЛ мозга радиоактивных соединений, меченных а в последнее время и С. [c.74]

После второй мировой войны благодаря появлению биохимических и цитологических методов произошло быстрое возрождение генетики человека. Генетика человека, которой в основном занимались ученые, использующие статистические методы, влилась в основной поток медицинских исследований. Полинг показал, что серповидноклеточная анемия-молекулярная болезнь [1260], и его открытие послужило толчком к развитию подобных исследований. Наличие аномальных гемоглобинов предоставило возможность для детального изучения последствий мутаций. Генетический код был выявлен у столь далеко отстоящих друг от друга организмов, как вирусы и человек. Было обнаружено, что мутации могут приводить к аминокислотным заменам, сдвигать рамку считывания или вызывать обрыв аминокислотной цепи в результате делеции. При помощи методов биохимии и молекулярной генетики удалось определить нуклеотидную последовательность глобинового гена. Было показано, что причины многих врожденных нарушений метаболизма-различные дефекты ферментов, возникающие вследствие мутаций, изменяющих их структуру. Мет-гемоглобинемия, возникающая вследствие недостатка диафоразы, и болезни накопления гликогена относятся к числу первых обнаруженных болезней, вызываемых дефектами ферментов (разд. 4.1). [c.31]

Биохимия нуклеиновых кислот лежит в самой основе генетики в.свою очередь использование генетических подходов оказалось плодотворным для многих областей биохимии. Физиология, наука о функционировании организма, очень сильно перекрывается с биохимией. В иммунологии находит применение большое число биохимических методов, и в свою очередь многие иммунологические подходы широко используются биохимиками. Фармакология и фармация базируются на биохимии и физиологии метаболизм большинства лекарств осуществляется в результате соответствующих ферментативных реакций. Яды влияют на биохимические реакции или процессы эти вопросы составляют предмет токсикологии. Как мы уже говорили, в основе разных видов патологии лежит нарушение ряда химических процессов. Это обусловливает все более широкое использование биохимических подходов для изучения различных видов патологии (например, воспалительные процессы, повреждения клеток и рак). Многие из тех, кто занимается зоологией и ботаникой, широко используют в своей работе биохимические подходы. Эти взаимосвязи не удивительны, поскольку, как мы знаем, жизнь во всех своих проявлениях зависит о г разнообразных биохимических реакций и процессов. Барьеры, существовавшие ранее между биологическими науками, фактически разрушены, и биохимия все в большей степени становится их общим языком. [c.11]

Общепризнано, что среди генеральных направлений биологии наиболее мощно набирает сейчас темпы биология физико-химическая, т. е. область изучения живой материи, использующая идеи, методы и подходы химии, физики и математики. На широком фронте физико-химической биологии особенно рельефно вырисовываются достижения молекулярной биологии (и прежде всего ее лидера — молекулярной генетики), различных сфер биофизики и математической биологии, биоорганической химии. Однако у истоков этого движения биологии навстречу точным наукам, несомненно, находится биохимия, проделавшая сложный и увлекательный путь от классической до современной. Определяя биохимию как широкое научное направление, следует включить в нее изучение химических основ и механизмов жизнедеятельности, химию жизни , о каких бы проявлениях жизни ни шла речь с таких позиций биохимия поистине универсальна. Однако в более конкретном, сегодняшнем звучании биохимия представляет собой область физико-химической биологии, связанную с познанием процессов метаболизма и путей их регуляции и энергетического обеспечения. Поэтому вполне естественен вывод о том, что биохимия — это тот фундамент, на котором зиждется наше представление о живой природе, о ее поразительной целесообразности и об единстве управляющих ею законов, это тот материалистический принцип, который помогает нам понять смысл, могущество и красоту явлений, составляющих в совокупности самое великое на земле — жизнь. [c.5]

При изучении потребностей бактерий в питательных веществах разработаны эффективные экспериментальные подходы, оказавшие влияние на все аспекты биохимических исследований. Возможность количественной оценки бактериального роста положена в основу некоторых аналитических методов. То обстоятельство, что определенное соединение может являться незаменимым компонентом пищи, так как организм не способен его синтезировать, но нуждается в нем для нормального метаболизма, использовано как для расшифровки метаболических путей, так и для выяснения генетических механизмов. [c.15]

Однако в тех случаях, когда изучают метаболические процессы, морфологическая и биохимическая целостность ткани должна быть сохранена в максимальной степени. Целью гомогенизации, которая, к сожалению, по-прежнему остается эмпирическим методом, является разрушение тканей, клеточных стенок и (или) мембран и высвобождение клеточного содержимого. Для этого применяются самые разнообразные методы и приборы, хотя лежащие в их основе принципы не всегда ясны. Лишенная прочной теоретической базы и необходимого арсенала стандартных методов, гомогенизация представляет собой скорее искусство, чем науку. В силу того, что различные ткани в значительной степени отличаются одна от другой как по хрупкости определенных клеточных органелл, так и по устойчивости клеток и тканей к разрушению, при гомогенизации любого биологического материала всякий раз неизбежно возникают специфические проблемы, которые можно разрешить только путем проб и ошибок. В основном гомогенизация применяется как стадия, предшествующая разделению клеточных компонентов, которая дает возможность установить внутриклеточную локализацию метаболических процессов. Гомогенаты успешно используются и при изучении поглощения и метаболизма соединений в тех случаях, когда доставка их в интактные клетки затруднена в силу недостаточной проницаемости мембран. [c.36]

Выбор методов при изучении метаболизма у растений определяется в основном степенью организации растения. Одноклеточные и многоклеточные водоросли, например, хорошо растут на простых, чаще всего неорганических питательных средах при соответствующих внешних условиях. Такие водоросли можно рассматривать как интактные организмы они имеют относительно простое строение и являются удобным экспериментальным материалом для изучения фундаментальных биохимических процессов, которые трудно исследовать на высокоорганизованных растениях. В качестве классического примера можно привести такие растительные организмы, как S enedesmus и hlorella, которые используются для изучения фиксации углекислого газа. Эти системы благодаря удобству контроля за их ростом и простоте поставки экзогенных соединений клеткам особенно удобны для изучения действия на обмен веществ таких факторов, как освещение, температура, питание и т. д. [c.33]

Введение изотопной метки [20] используется для изучения биосинтеза и биораспада природных соединений, изучения метаболизма фармацевтических препаратов и других химических соединений в растительных и животных организмах, а также для радиоиммунологического анализа [21] и анализа методом изотопного разведения. Кроме того, меченые изотопами соединения успешно используются для выяснения механизмов реакций [22]. С помощью воды, меченной изотопом 0 (Нз О), можно разрешить вопрос о месте разрыва сложнозфирной связи при [c.444]

Следует отметить, что мы сейчас только начинаем использовать возможности метода меченых атомов для разрешения комплексных вопросов механизма обмена веществ и энергии между растительными организмами и окружающей средой. Например, при помощи пока изучен метаболизм и передвижение немногих органических веществ, в которые углерод входит через несколько минут после того, как он поглощается растением из окружающей атмосферы. В подавляющем большинстве имеюш,ихся работ метаболизм и передвижение поглощенного углерода прослежены во времени не более, чем в течение 1 часа, для чего используются короткие экспозиции растений в присутствии радиоактивной углекислоты. С другой стороны, в многочисленных опытах по биосинтезу органических веществ с меченым углеродом, при которых растения в течение дней и недель выращиваются в атмосфере меченой углекислоты, вопросы метаболизма и передвижения поглощенного углерода обычно не изучаются. Поэтому в настоящее время еще недостаточно известно, что происходит с углеродом через несколько часов или дней после того, как он был поглощен при фотосинтезе. Возникают многочисленные вопросы о том, в каких количественных соотношениях он нерераспределяется во времени между различными органическими веществами, в форме каких соединений и в каких количествах происходит передвижение углерода из листьев в другие органы, однотипны ли эти процессы у разных растений и при помощи каких условий можно изменить их в желательном для человека направлении. В поисках ответа па подобные вопросы необходимо продолжать разработку приемов изучения метаболизма и передвижения углерода в растении не только в течение коротких, но и в течение длительных интервалов времени. Кроме того, нужно систематизировать методы разделения и возможной идентификации органических соединений таким образом, чтобы можно было выяснить распределение поглощенного растением углерода между всеми основными группами веществ растений. [c.43]

При изучении метаболизма пестицидов и лекарственных веществ методы колоночной хроматографии применяются реже, чем другие радиохроматографические методы, в частности ТСРХ. Однако в последние 2—3 года наблюдается повышение интереса к разделению смесей соединений с различными молекулярными весами, а введение ВЭЖХ открывает новые возможности для этого. За исключением ВЭЖРХ, в большинстве лабораторий не применяют систем с проточными кюветами для измерения радиоактивности элюатов. Вероятно, это связано с тем, что остальные методы колоночной радиохроматографии используются нерегулярно и затраты на установку системы непрерывного детектирования не оправдываются. [c.194]

Методы хроматографии иа бумаге были использованы для изучотгия фотолиза рибофлавина (рис. 228), для изучения метаболизма флавиновых коферментов, для идеитификации рибофлавина в смеси с другими флуо- [c.610]

При изучении метаболизма широко используется метод меченых атомов. Сущность его заключается в том, что в организм вводятся в составе органических соединений радиоактивные изотопы ряда элементов, например водород (№), углерод (С ), фосфор (Р32, Дод (1131 рзг и многие другие. Искусственные радиоактивные изотопы, кроме тяжелого водорода, по химическим свойствам и биологическому действию почти не отличаются от природных элементов, но в отличие от них благодаря радиоактивности легко могут быть обнаружены в организме. Для об-нарушения их применяют два метода I) исследованиес помощью электронныхприборови2) авторадиографию. [c.67]

Перфузия органа. Используя метод перфузии изолированного органа in vitro, можно вводить то или иное вещество и выяснить путь его превращения с помощью анализа выходящей из органа жидкости. Орган помещают в замкнутую систему, в которой циркулирует соответствующая обогащенная кислородом жидкость под повышенным давлением. В состав циркулирующей среды может входить дефибринированная или цельная кровь, содержащая соответствующий антикоагулянт (гл. 29) или эритроциты, суспендированные в растворах физиологически изотонических солевых смесей, которые должны имитировать нормальную плазму по pH, ионной силе и ионному составу. Этот подход используют при исследовании печени, сердца, почек и тонкого кишечника такие опыты способствуют пониманию роли этих органов в метаболизме. Результативность перфузии органов в изучении метаболизма сильно возросла после разработки методик, в которых изотопно меченный метаболит перфузируется в течение очень короткого периода, и метаболизм резко останавливают быстрым замораживанием ткаии ( ледяные тиски ) таким образом удается выяснить распределение изотопа среди множества родственных метаболитов в течение нескольких секунд после его введения и через последующие фиксированные интервалы времени. [c.388]

В некотором смысле химики и биохимики всегда использовали схемы (диаграммы со стрелками-указателями для путей метаболизма и т. д.). Но первыми схемами, изученными как математические объекты, явились, по-видимому, схемы, введенные Л.С. Ли и автором данной работы [16], разработавшими графические способы генерации всех возможных механизмов (или (. Алгебраический метод для бимолекулярных-бимолекулярных механизмов был предложен Селлерсом [17]. Другие типы схем были использованы Кларком [18], который графически нашел миноры определителя для линеаризованных областей устойчивости по Ляпунову, и для различных целей — Файнбергом, Хорном, Джексоном, Остером, Перельсоном и др. [19]. [c.86]

Применеиие. Ж х важнейший физ -хим метод исследования в химии, биологии, биохимии, медицине, биотехнологии Ее используют для анализа, разделения, очистки и выделения аминокислот, пептидов белков ферментов, вирусов, нуклеотидов, нуклеиновых к-т, углеводов, липидов, гормонов и т д, изучения процессов метаболизма в живых организмах лек препаратов, диагностики в медицине, анализа продуктов хим и нефтехим синтеза попупродуктов, красителей, топлив, смазок, нефтей, сточных вод, изучения изотерм сорбции из р-ра, кинетики и селективности хим [c.153]

Простота эксперимента и малые количества необходимых веществ и биологического материала делают этот метод идеальным для ирименекня в качестве методики общего скрининга. Так, удовлетворительные ауторадиограммы легко могут быть получены путем встряхивания в течение ночи менее одного грамма ( влажная масса) свежевыросших микробных клеток с 2 мл (или меньшим количеством) буферного раствора, содержащего небольшое количество (например, 10 мкКи) меченного С предшественника типа ацетата, мевалоната или аминокислоты. Такая методика позволяет селективно обнаруживать метаболиты индивидуальных предшественников ее использовали при изучении многих продуктов метаболизма микробов, в том числе пенициллинов [49], тетрациклинов [54], альтернариола [51] и грибных феналенонов [52]. [c.365]

Особой областью флуоресцентного анализа является изучение ферментативной активности в жидких средах, тканях и клетках. Для большинства известных в настоящее время ферментов разработаны чувствительные флуоресцентные методы анализа, основанные на собственной флуоресценции самих ферментов или продуктов их метаболизма. В то же время в последние годы разработаны очень чувствительные методы определения активности ферментов с помощью флуоресцирующих метчиков. Для этого используют флуорогенные соединения, являющиеся комплексом субстрата фермента и химически связанного с ним флуорохрома (обычно флуорохромом является аминофлуоресцеин). В растворе флуорогенные соединения не флуоресцируют, а при наличии в исследуемой среде активного специфического фермента субстрат подвергается разрушению, флуорохром высвобождается и возникает интенсивная флуоресценция. Для анализа активности клеточных эстераз был предложен диацетат флуоресцеина, который легко проникает в живые клетки и, расщепляясь с освобождением флуоресцеина, придает клеткам с активными эсте-разами зеленую флуоресценцию. Аналогичным образом можно определять и лигазную активность клетки — об использовании метчиков энзимологии см. работы Рубина [57] и Мейселя [24]. [c.297]

В последующих работах с ферментами метаболизма фенолов с успехом может быть использована методика, разработанная при изучении допаминги-дроксилазы. Серьезная трудность в первоначальных исследованиях этой ферментативной системы состояла в трудоемком хроматографическом разделении продуктов и реагирующих веществ. Левин и сотр. [76] предложили метод, основанный на относительно легкой окисляемости боковой цепи норэпинефрина, имеющей соседние гидроксильную и аминогруппы. Если а-С -допамин обработать гидроксилазой, а полученный норэпинефрин — перйодатом натрия, то боковая цепь расщепляется и образуется радиоактивный формальдегид. Улавливание и расчет количества формальдегида дают быстрый метод для исследования реакции гидроксилирования. [c.329]

Использование света как средства для изучения физиологических процессов in vivo имеет ряд важных преимуществ, которые, однако, не выяснены и не оценены в достаточной мере. Свет может проникать в интактные клетки с минимальным разрушением биологического объекта. Некоторые стадии большинства биохимических путей метаболизма включают реакции, протекающие на свету. Для подобных реакций необходимо, чтобы фоторецептор смог воспринять излучение. Природу абсорбции фоторецептора можно определить, исследуя зависимость определенной светочувствительной реакции от длины волны света при этом получают спектр действия. Спектр действия может стать важным ключом к разрешению проблемы природы фоторецептора и механизма биохимической реакции. Полезные советы и обобщения по методам получения спектров действия имеются в обзорах (Сетлоу [5], Бутлер [6]). Место действия света можно установить, закрывая отдельные части объекта или используя микролуч (Бок и Хаупт [7]). Поляризованный свет можно использовать для выяснения причин реакции, обусловленной дихроичной организацией фоторецептора (Хаупт [8]). [c.340]

Эти, а также многие другие исследования позволили сделать вывод, что при нормальнол биологическом расщеплении жирных кислот с четным числом атомов углерода происходит последовательно потеря двух атомов углерода, хотя единственным промежуточным соединением, которое удалось обнаружить (и то только в патологических случаях), была ацетоуксусная кислота. Результаты, полученные при изучении участия кофермента А в метаболизме жирных кислот [38, 39, 55—57], находятся в соответствии с развивавшимися ранее представлениями. Используя современные методы энзимоло-гии и спектроскопии, удалось получить количественные результаты, давшие возможность объяснить наблюдавшиеся факты значительно более определенно и подробно (см. ниже). Ферментативному окислению в присутствии кофермента А подвергались многие жирные кислоты с четным числом атомов углерода, но, несмотря на это, в качестве единственного промежуточного продукта была выделена снова только ацетоуксусная кислота (в виде производного кофермента А СН3СОСН2СО—S—КоА). Причина этого будет рассмотрена на стр. 285. [c.276]

В ЭТОЙ же системе спермин характеризуется величиной Кг 0,10 [824, 825]. Хроматографию на бумаге использовали как нрепара тивный метод при очистке меченого спермидина [583, 826] при изучении его метаболизма у бактерий [826—829]. [c.114]

Среди многочисленных статей, посвященных разделению соединений этой группы, автор монографии выбрал три и составил таблицу (табл. 26.1) приведенных в этих статьях величин Rf. Разделение во всех описанных примерах проводилось на силикагеле, но с самыми различными комбинациями растворителей. Кочин и Дейли [43] использовали три растворителя, с которыми можно проводить двумерное хроматографирование, и два обнаруживающих реагента, особенно полезных в тех случаях, когда получаются очень близкие величины Rf. Амобарбитал и пентобарбитал не удается разделить даже методом двумерного хроматографирования. Добиться их разделения можно только с помощью описанной выше методики Петцольда и др. [40]. Величины Rf амобарбитала и пентобарбитала после кислотной обработки соответственно равны 0,74 и 0,40. В ряде работ показаны хроматограммы, полученные при изучении процесса выделения различных лекарственных препаратов из организма. На хроматограммах видны как исходные соединения, так и продукты их метаболизма. Саншайн и др. [44], помимо опрыскивания перманганатом калия, применяли для обнаружения всех перечисленных ими соединений комбинированное опрыскивание сначала раствором сульфата ртути, а затем 0,001 %-ным раствором дифенилкарбазона в хлороформе (масса/ /объем). Перед опрыскиванием перманганатом можно провести дополнительное опрыскивание раствором флуоресцеина натрия, позволяющее обнаруживать соединения при УФ-облучении. Однако хроматографирование на флуоресцирующих слоях гораздо удобнее, чем опрыскивание флуоресцирующим раствором [45]. [c.193]

Для многих исследований можно подобрать такой предшественник, который будет весьма специфичным ддя определенного класса макромолекул (например, лейцин для белка). В таких случаях меченые молекулы можно определить по их радиоактивности в присутствии других немеченых веществ. Однако для изучения различных вопросов метаболизма желательно использовать неспецифический предшественник, который будет включаться в пуклеиновые кислоты, белки и другие клеточные компоненты и метить их. В этом случае необходимо отделять и очищать каждый класс изучаемых молекул. Обзор методов химического фракционирования различных биополимеров приведен в ряде работ [2, 3]. Первая попытка использовать фильтры для улучшения фракционирования была сделана при разделении радиоактивности разных биополимеров после включения в них 1-С -глицина. Однако в этом случае полученные фракции нуклеиновых кислот были загрязнены пептидами, которые требовалось удалять [4]. [c.138]

По сравнению с другими классами химических веществ (например, промышленными химическими продуктами, пестицидами) изучение фармацевтических препаратов представляет собой область, в которой чрезвычайно широко используется и совершенствуется большое число различных хроматографических методов, в первую очередь ВЭЖХ и хроматомасс-спектрометрия. Хроматография (ГХ, хроматомасс-спектрометрия, ВЭЖХ и ТСХ) находит широкое применение для проверки чистоты, однородности и устойчивости промышленной продукции, в анализе биологических жидкостей и тканей, для установления соответствующей дозировки, путей метаболизма и фармакокинетики, а а также в токсикологии и судебно-медицинской практике. [c.88]

Хотя современный этап селекционной работы с микроорганизмами характеризуется преобладанием классических подходов , связанных с использованием индуцированного мутагенеза и ступенчатого отбора, в практической деятельности микробиологов-селекционеров все шире применяются новые методы — слияние протопластов, амплификация и межвидовой перенос генов. Однако арсенал современной генетиг ки недостаточно используется для создания высокоактивных промышленных штаммов. Основная причина этого — слабая генетическая и биохимическая изученность микроорганизмов, градиционно используемых в промышленности, недостаток знаний о регуляции их клеточного метаболизма в целом, а также отдельных путей биосинтеза, связанных с образованием особо ценных биологически активных соединений, например антибиотиков. Именно здесь целесообразно сконцентрировать усилия генетиков, биохимиков и молекулярных биологов, в тесном контакте с которыми должны работать селекционеры. [c.203]

Окончательное выяснение смысла сродства, рассчитанного описанным выше термодинамическим методом, требует дополнительных экспериментов по термодинамическому изучению биохимических процессов. Тем не менее интересно рассмотреть влияние на сродство различных факторов, воздействующих на транспорт и метаболизм в уже изученных случаях. В двух таких работах были использованы соединения, которые подавляли транспорт, но при этом непосредственно не влияли на метаболизм. Одним из этих соединений является гликозид уаба-ин — ингибитор натрий-калиевой АТФазы, которую обычно [c.163]

В большинстве случаев метод суспензионных культу] применяется для количественного изучения процессов кле точного метаболизма и проведения биохимических нсследо ваний, требующих большого количества материала, а так же используется в онкологии для получения стабильных ли ний из лейкемической крови и костного мозга. Б последне время применение этого метода позволило получить важны данные по антителообразованию in vitro (см. стр. 131). [c.93]