Анаэростаты

Рис. 1.7. Выращивание анаэробов в портативном анаэростате

Посевы инкубируют в анаэростате, а столбики со средой — в термостате при 37 ° С. [c.191]

Для проведения реакции смешивают в пробирке 0,05 мл сыворотки крови, 0,3 мл антигена и 0,2 мл комплемента. Опыт сопровождается контролем сыворотки, антигена и комплемента. Пробирки помещают в анаэростат, который после создания вакуума заполняют смесью азота и углекислого газа, и выдерживают при 35 °С. Через 18 ч из содержимого каждой пробирки делают препараты раздавленной капли, насчитывают 25 трепонем и определяют, сколько из них подвижных и иммобилизованных. Процент иммобилизации трепонем вычисляют по формуле [c.229]

Газовая стерилизация. Этот метод применяется для обработки оптики, кардиостимуляторов, сложной техники (аппаратов искусственного кровообращения), изделий из полимеров, стекла, металлов. Используют окись этилена или смесь ОБ (окись этилена с бромистым метилом), озон, а также пары раствора формальдегида в этиловом спирте, которыми наполняют стационарные газовые стерилизаторы или портативные анаэростаты. Для поддержания температуры (35 или 55 °С) анаэростаты помещают в термостат или водяную баню. Для упаковки используют полиэтиленовую пленку (два слоя), пергамент и специальный упаковочный материал. Выбор метода и режима газовой стерилизации зависит от вида стерилизуемого изделия (например, смесью ОБ разные изделия стерилизуют от 4 до 16ч). Стерилизованные газом изделия применяют после их выдержки (в течение 1 — 21 сут) в вентилируемом помещении. Срок сохранения стерильности для изделий в упаковке из полиэтиленовой пленки — 5 лет, пергамента или бумаги — 20 сут. Контроль процесса ведут по показаниям приборов (термометров, мановакуумметров), а контроль эффективности стерилизации — с помощью биотестов. [c.440]

Засеянные жидкие среды помещают в термостат при температуре 37°. Чашки с кровяным агаром ставят в анаэростат или используют другой прием, позволяющий выращивать бактерии в строго анаэробных условиях [c.586]

Особенно хорошо заметны гранулы в период образования спор. Палочки подвижны. При споруляции образуется спорангий 7—14 мк длины (чаще всего 9 мк) и 1,4—2,0 мк ширины (чаще 1,7 мк). Спорангии палочковидные, не вздувшиеся, с закругленными концами. Гранулы в палочке исчезают, и образуется спора, которая не расширяет контур палочки, расположена ближе к одному ее концу и имеет размеры 1 6X3—3,5 мк. Палочки растут в анаэробных условиях при pH=8,5—10,2 и при относительно высокой концентрации ионов калия и натрия. Возбудитель для роста нуждается также в щелочной вытяжке из листьев яблони. В анаэробных средах культура растет под поверхностной окисленной зоной в очень ограниченном слое сильного помутнения, ниже которого в глубь пробирки бактерии проникают лишь в слабой концентрации. На твердой среде в анаэростате образуются небольшие колонии неправильной, хлопьевидной формы, с контуром, напоминающим косу волос, бесцветные, размером 50—150 мк. Большинство клеток инокулюма на твердой среде автолизируется и колоний не образует. Колонии образуются главным образом в местах, где оканчивалось растирание инокулюма и агар остался ненарушенным. Рост заметен в течение 3—4 дней после посева и продолжается 7—10 дней, после чего рост прекращается. Культуры на искусственной питательной среде никогда не образуют спор, однако введением насекомым вегетативных клеток можно вызвать болезнь с характерным укорачиванием тела гусениц. [c.240]

Пробы из почвы, испражнений животных и клинического материала инокулируют в небольшой участок свежеприготовленного кровяного агара (разд. 20.3.7). Чашки инкубируют при 37 °С в анаэростате в течение [c.284]

КОЛЬЦО диаметром 25—30 мм, слегка смазанное вакуумной смазкой. Затем на центральную часть мембранного фильтра наносят несколько капель разведенной пробы и инкубируют чашку в анаэростате при 37 С в течение 1—2 нед. Трепонемы достаточно малы они способны мигрировать через поры фильтра и проникать в расположенный под ним агар, где вызывают помутнение. Кольцо и мембранный фильтр снимают с поверхности агара, с помощью пастеровской пипетки удаляют поверхностный слой агара в области помутнения и микро-скопируют его в темном поле для выявления трепонем и контаминирующих форм. Методы субкультивирования и очистки культуры описаны в разд. 8.1.11. Подавлению роста сопутствующих бактерий часто способствует добавление в агаровую среду полимиксина В (800 ед./мл) и налидиксовой кислоты (800 ед./мл). [c.288]

Существует много методов посева штрихом в чашки с твердыми средами ( штрихованные чашки ), но лишь один из них (рис. 8.1) почти всегда дает хорошо изолированные колонии даже при отсутствии навыков у экспериментатора. Кроме того, можно наливать разведенные растворы смешанной культуры на поверхность твердых сред в чашках (подробности метода приведены в разд. 11.2.1). При работе с анаэробами штрихованные чашки или чашки с внесенной в них жидкой культурой в атмосфере воздуха инкубируют затем в анаэростате. Для анаэробов необходимы свежеприготовленные среды, и посев штрихом следует проводить в течение первых [c.319]

Смешивают и переливают содержимое двух пробирок в чашку Петри, где среда застывает. Среду либо используют немедленно, либо хранят в анаэростате. [c.343]

Выращивание в анаэростатах. Анаэробные микроорганизмы можно выращивать в анаэростатах — вакуумных металлических камерах, снабженных манометром. Анаэростатом может служить обычный вакуумный стеклянный эксикатор. Из анаэростата откачивают воздух, а затем, как правило, заполняют его газовой смесью, состоящей из азота (90—80%) и углекислоты (10—20%), до давления порядка 67-10 Па (500 мм рт. ст.). Избыточное давление исключает возможность диффузии кислорода воздуха. [c.61]

Особые трудности возникают при выделении чистых культур облигатных анаэробов. Если контакт с молекулярным кислородом не вызывает сразу же гибели клеток, то посев проводят на поверхность среды в чашки Петри, но после посева чашки тотчас помещают в анаэростат. Однако чаще пользуются методом разведения. Сущность его заключается в том, что разведения накопительной культуры проводят в расплавленной и охлажденной до 45—50 агаризованной питательной среде. Делают 6—10 последовательных разведений. Затем среду в пробирках быстро охлаждают и заливают поверхность слоем стерильной смеси парафина и вазелинового масла (соотношение 3 1), что препятствует проникновению воздуха в толщу агаризованной среды. [c.77]

Выращивание анаэробов в условиях вакуума. Вакуумные условия для выращивания анаэробов создают в анаэростате или эксикаторе. Исследуемый материал или культуру микробов засевают в пробирки с жидкой средой или в чашки Петри с плотной питательной средой. Посевы помещают в анаэростат, затем присоединяют его к насосу и выкачивают воздух. Степень разреженности воздуха определяют по показаниям вакуумметра. Колонии анаэробов в вакуумных условиях растут на поверхности плотной питательной среды. [c.55]

Второй — пятнадцатый день. 1. Посевы на плотных питательных средах инкубируют 1 сут в анаэростате, просматривая чашки каждые 2 дня посевы в жидких питательных средах выращивают в обычных условиях в термостате в течение 15 сут, просматривая их ежедневно. [c.253]

Пробирки помещают в анаэростат. Воздух из анаэростата медленно откачивают вакуумным насосом при разрежении 0,9-1,0 атм. (10-12 мм рт.ст.). Анаэростат с пробирками помещают в термостат на 24 ч при 37°С. [c.332]

Пробирки ставят в анаэростат, закрывают его крышкой, подсоединяют к вакуумному насосу и медленно в течение 3-5 минут удаляют воздух до разрежения 0,9-1,0 атм (10 - 12 мм рт.ст.). [c.335]

Анаэростат помещают в термостат при 37°С на 48 ч. После окончания инкубации медленно открывают анаэростат, впуская атмосферный воздух. [c.335]

После инкубации анаэростат медленно открывают. Содержимое пробирок переносят дистиллированной водой в мерные колбы на 100 см", перемешивают и фильтруют через беззольный фильтр. [c.336]

Для выращивания анаэробов в бактериологических лабораториях применяют анаэростаты — специальные емкости, в которых воздух заменяется смесью газов, не содержащих кислорода. Воздух можно удалять из питательных сред путем кипячения, с помощью химических адсорбентов кислорода, помещаемых в анаэростаты или другие емкости с посевами. [c.47]

Материал со среды накопления засевают штрихами (или шпателем) на чашки с кровяным анаэробным агаром, которые поме-ш ают в анаэростат или другие приспособления для культивирования анаэробов и инкубируют при 37 °С 24 ч — 72 ч (метод Цейс-слера). [c.37]

Бактериологическое исследование. Гной, отделяемое слизистой оболочки, мочу, мокроту, спинномозговую жидкость сеют в чашку Петри с 5%-м кровяным агаром (лучше использовать дефибрини-рованную баранью кровь) и в пробирку с сахарным бульоном. Для выделения стрептококков из контаминированного материала используют селективные среды (в кровяной агар и среду накопления вводят антибиотики — колистин, налидиксовую кислоту, которые подавляют рост сопутствующих микроорганизмов). Хотя стрептококки дают рост на воздухе, посевы лучше инкубировать в анаэробной атмосфере при 37 °С. Инкубация в атмосфере СО2 стимулирует рост бета-гемолитических стрептококков, не относящихся к группе А. С этими целями применяют анаэростат или эксикатор с горящей свечой. [c.110]

Для посева берут несколько пробирок со скошенным мя-сопептонным агаром, подсохшим в верхней своей части, на границе со стеклом пробирки. В конденсационную воду питательной среды, находящейся в пробирке, вносят несколько капель с развившимися в ней бактериями. Поверхности среды при этом касаться нельзя. Зараженные пробирки ставят в анаэростат и проращивают в строго анаэробных условиях. При отсутствии анаэростата можно использовать другие приспособления, позволяющие выращивать культуры и при полном отсутствии кислорода воздуха. [c.590]

Пробы воды или взвеси почвы нагревают до 80 °С, выдерживают 10 мин и затем наносят штрихом на поверхность твердой среды в чашках. Для штаммов Ba illus обычно используют питательный агар штаммы lostridium рассевают по стенке вращающейся пробирки с восстановленным мясным агаром (разд. 20.3.10) или на поверхности свежеприготовленной агаровой среды и инкубируют в анаэростате. [c.281]

Система API 20А для анаэробов (Analytab Produ ts) похожа на систему API 20Е. Колонии бактерий суспендируют в среде для анаэробов и суспензию используют для разведения сухих сред в микропробирках в аэробных условиях. Затем пластинку с микропробирками помещают в анаэростат или анаэробный бокс и инкубируют от 24 до 48 ч при 35—37 °С [62]. [c.51]

Для культивирования анаэробов предложены специальные камеры и система ГазПак (GasPak), образующая газы (водород и СОг) в замкнутом пространстве и эффективно поглощающая кислород. В качестве поглотителя кислорода в лабораторной практике используют щелочной раствор пирогаллола, дитионита натрия, металлическое железо и некоторые другие реактивы. При этом необходимо учитывать поглощающую способность реактивов и объем замкнутого пространства, в котором выращивают микроорганизм. Например, на каждые 100 мл емкости используют 1 г пирогаллола и 10 мл 2,5 н. раствора гидроксида натрия. Поскольку многие анаэробы нуждаются в углекислоте, пирогаллол часто растворяют не в щелочи, а в насыщенном растворе бикарбоната натрия. Полноту поглощения кислорода контролируют раствором, содержащим окислительно-восстановительный индикатор. Для приготовления раствора смешивают равные объемы 0,024%-ного NaOH, 0,015%-ного водного метиленового синего и 6%-ной глюкозы в качестве антисептика к раствору добавляют тимол. Перед использованием в пробирку наливают 5 мл смеси и нагревают на кипящей водяной бане до обесцвечивания, быстро охлаждают и помещают в анаэростат. В анаэробных условиях раствор остается бесцветным. [c.62]

Для определения количества клеток анаэробных микроорганизмов чашки Петри с плотной средой после посева помещают в анаэростаты. Иногда для определения численности анаэробов плотную среду после засева оставляют в пробирках. Поверхность застывшей среды заливают парафином. Для лучшего рассмотрения колоний микроорганизмов среды в этом случае рекомендуется осветлять. Определение численности экстремальных анаэробов требует применения техники Хангейта (см. гл. 4). [c.124]

Анаэростат для культивирования анаэробов. Анаэростат — прибор для выращивания микробов в анаэробных услови--ях — представляет собой толстостенный металлический. цилиндр с герметически привинчивающейся крышкой, на которой имеются вакуумметр и два крана для присоединения к вакуум-насосу. [c.56]

Определение проводят в анаэробных условиях. Подготовленные пробирки с образцами почвы помещают в анаэростат, закрывают его и соединяют с вакуумным насосом. Затем медленно удаляют воздух из анаэростата в течение 3-5 мин, достигая разрежения 0,9-1 атм. (что соответствует 10 мм ртутного столба). Анаэростат с находящимися в нем пробирками ставят в политермостат при температуре 37 С на 24 ч. После инкубирования медленно ослабляют винт крышки анаэростата для постепенного заполнения прибора атмосферным воздухом. [c.331]

Пробирки ставят в анаэростат, воздух из него медленно откачивают вакуумным насосом до разрежения 0,9-1,0 атм. Анаэростат с пробирками помещают в политермостат на 24 ч при 37 С. После инкубации медленно открывают анаэростат. Содержимое пробирок переносят дистиллированной водой в мерные колбы на 50 см Добавляют 1 см" насыщенного раствора алюмокалиевых квасцов, перемешивают, фильтруют через плотный фильтр. Пипеткой берут 1 см фильтрата в мерную колбу на 50 м цилиндром прибавляют 5 см" дистиллированной воды, добавляют 4 см" реактива Грисса. Колбу доводят водой до метки, перемешивают и колориметрируют через 15 мин с зеленым светофильтром в кюветах шириной 5 мм. [c.334]

На технических весах берут навеску почвы 1 г, помещают ее в пробирку. Прибавляют 20 мг СаСОз, перемешивают. Приливают пипеткой 1 см 0,25 М раствора Na2S04 и 1 см 5%-го раствора глюкозы в качестве донора водорода. Пробирки встряхивают и помещают в анаэростат, закрывают его крышкой, подсоединяют к вакуумному насосу и медленно удаляют воздух в течение 3-5 мин до разрежения 0,9-1,0 атм. и помещают в термостат при 37°С на 7 дней. [c.336]

Опытные и контрольные пробирки помещают в анаэростат, закрывают его крышкой, подсоединяют к вакуумному насосу и медленно, в течение 3-5 минут откачивают воздух до разрежения 0,9-1,0 атм. Анаэростат помещают в политермостат на 48 ч при температуре 37°С. [c.338]

После инкубации медленно открывают анаэростат. В пробирки добавляют 25 см 0,4%-го раствора ЫагЗОз в 1 М растворе Hз OONH4 и взбалтывают 30 мин для экстрагирования восстановленного марганца. [c.338]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология