Вирус репликативная форма

Рис. 57. Схема образования репликативной формы ДНК фага, содержащего с зрелом вирусе однонитевую ДНК

Двухцепочечная репликативная форма, содержащая плюс -и минус -цепи, образуется и в растениях под действием вируса табачной мозаики [193, 201, 210] и вируса ЕМС [216] и является, очевидно, обязательной промежуточной стадией при воспроизведении всех РНК-содержащих вирусов. [c.251]

Двухцепочечный комплекс, построенный из исходной (- -)-цепи вирусной РНК и комплементарной к ней (—)-цепи РНК, синтезирующейся в организме хозяина при вирусной инфекции, является промежуточным продуктом при воспроизведении вируса в клетке ( репликативная форма ). Для такого комплекса характерна устойчивость к действию небольших концентраций РНК-азы, он может быть выделен и отделен от других форм РНК с помощью центрифугирования в градиенте плотности или хроматографии на МАК (см., например,121). [c.37]

Двухцепочечная кольцевая ДНК — ДНК, выделенная из вируса полиомы, бактериофага РМ2, митохондрий и хлоропластов. Как промежуточная репликативная форма, принимающая участие в биосинтезе линейной двухцепочечной ДНК. она обнаружена в составе бактериофага Я,. Некоторые плазмиды также содержат двухцепочечные кольцевые ДНК. [c.47]

Рис. 5-22. Исходная и репликативные формы вируса животных (задача 5-27).

На молекулах репликативной формы ДНК происходит синтез не только (+)цепей ДНК, но и вирус-специфических мРНК- Следует сказать, что синтез мРН К должен предшествовать появлению новых молекул (+)цепей ДНК, так как без вирус-специфических мРНК в зараженной клетке не может появиться белок А. Трансляция фаговых мРНК приводит к накоплению вирус-специфических белков, в том числе и структурных, которые — при достаточной концентрации — начинают превращаться в сложные структуры— предшественники вирусного капсида. Генерируемые на этой стадии (+)кольца в результате специфических взаимодействий с белками фага вовлекаются в процесс сборки вириона. Тем самым предотвращается ставший уже ненужным переход -Ь)цепей в репликативную фор.му. [c.274]

Репликативная форма ДНК вируса 0 Х174 (дополнение 4-В)—небольшая кольцевая молекула из —5000 пар оснований — обрабатывалась профлави-ном [82]. Связывание 0,06 молей профлавина на моль нуклеотидов сводило X к нулю. Отсюда была получена оценка 6 = 0,055 это означает, что при температуре 25°, pH 6,8 и ионной силе 0,2 в молекуле содержится —26 супервитков. На плотность супервитков сильно влияют температура, pH и ионный состав. В общем случае а становится менее отрицательной на — 3,3х ХЮ при повышении температуры на 1° [86с]. Например, для ДНК вируса 0 Х174 при ионной силе 0,2 а получалась равной —0 витков) при 75°С. [c.141]

Для вирусов, вирионы которых содержат однонитевую ДНК, первой стадией репликации является синтез в инфицированной клетке комплементарной цепи, т.е. образование двунитевой репликативной формы ДНК. При этом цепь ДНК, входящая в вирион, называется плюс-цепью, а создаваемая на ней, как на матрице, комплементарная ДНК - минус-д епью. Инициация и элонгация синтеза ми-нус-цепи идут с участием ферментов клеток хозяина. Механизмы инициации достаточно разнообразны. Например, при синтезе минус-цепи ДНК фаг-а tpX 174 в инициации участвует сложный комплекс белков, включающий праймазу. ДНК фага М13 имеет специальную шпильку, стебель которой работает как полноценный двунитевой фрагмент по отношению к РНК- юлймеразе клетки. Поэтому затравка образуется с помощью хозяйской РНК-4Юлимеразы. [c.194]

В некоторых других видах РНК также обнаружено формирование спиральных структур. Сообщалось, например, что комплементарная РНК (стр. 237), получаемая ферментативным путем in vitro на ДНК (как на матрице), выделенной из бактериофага Т2, содержит при определенных условиях высокоупорядоченную двойную спиральную структуру, сходную с таковой ДНК [74]. Однако это, по-видимому, не относится к информационной РНК, присутствующей в полисомах (стр. 281). Форму двойной спирали имеют также РНК различных вирусов, в том числе РНК реовируса раневой опухоли и репликативных форм вируса полиомиелита [36, 74, 75], вируса Сендай [76] и вируса эпцефаломиокардита [77]. Об этом свидетельствуют результаты, полученные при определении относительного содержания комплементарных оснований и при изучении тепловой денатурации о том же говорят и устойчивость к панкреатической рибонуклеазе и отсутствие реакции с формальдегидом, а также данные рентгеноструктурного анализа 178, 95]. [c.59]

Получены четкие доказательства (см. стр. 161 и 250) того, что репликация РНК вирусов сопровождается образованием дв х-ценочечной репликативной формы РНК. В качестве примера можно назвать репликативную форму РНК, образующуюся нри действии РНК-зависимой РНК-полимеразы (РНК-синтетазы) в клетках Е. oli, инфицированных РНК бактериофага MS2 (стр. 250). Эта РНК устойчива к рибонуклеазе, но нри нагревании до высоких температур (от 102 до 104°) наступают резкие изменения. При быстром охлаждении образуется чувствительное к действию рибонуклеазы вещество устойчивость к рибонуклеазе восстанавливается, если это вещество охладить до температуры ниже ее температуры плавления [79—84, 94]. При градиентном центрифугировании двухцепочечная форма характеризуется несколько меньшей плотностью, чем соответствующая одноценочечная. [c.59]

Кольцевая форма вирусной ДНК обнаружена также у двухцепочечной репликативной формы бактериофага ф Х174 (стр. 215), ДНК бактериофага % (стр. 161) и ДНК вируса нолиомы, которая существует и в виде кольца и в форме прямой цепи (49—51, 84). В последнем случае обе формы состоят из двойной цепи и обе они инфекционны. Кольцевую структуру можно наблюдать при помощи электронного микроскопа. Предполагается, что кольцевую форму имеет также ДНК бактериофага Т2 (стр. 157) [87]. [c.72]

В процессе размножения вируса в организме хозяина происходит отделение вирусного белка от РНК [28, 29]. При заражении растительной клетки свободной РНК синтез вируса в ней начинается раньше, чем после заражения интактным вирусом. Сначала размножается РНК вируса, претерпевающая превращение в двух-цепочечпую репликативную форму (стр. 250) [144, 145]. Затем под контролем РНК начинается образование вирусного белка и наконец белок и РНК соединяются, формируя полный вирус [51, 53]. [c.154]

Из клеток, зараженных фагом ФХ174, наряду с одноцепочечной ДНК, присутствующей в вирусных частицах, можно с помощью центрифугирования в градиенте плотности и хроматографией на МАК получить двухцепочечный комплекс ДНК с вдвое большим молекулярным весом зэ — так называемую репликативную форму ДНК фага ФХ174. Присутствие в зараженной вирусом клетке форм вирусной ДНК, отличающихся по своей структуре от ДНК вирусных частиц, показано и для многих других вирусов. [c.32]

Подобные ковалентно-связанные циклические структуры ДНК были доказаны для ДНК фага ФХ174 и соответствующей репликативной формы ДНК, ДНК вирусов полиомы, папилломы, простого герпеса, вируса 5У40, репликативных форм ДНК ряда других вирусов, ДНК митохондрий (обзоры —см.26, 78) Ддд ДНК митохондрий было показано электронно-микроскопически, что кольцевые молекулы могут соединяться между собой как звенья в цепи, образуя димеры, тримеры и тетрамеры, аналогичные катенанам - з. [c.48]

Известны три типа двухцепочечных кольцевых ДНК- Первый из них — ковалентно замкнутая кольцевая ДНК. Такие ДНК имеют сравнительно небольшой молекулярный вес.Примером указанных ДНК служат нуклеиновые кислоты вирусов полиомы и ЗУ 40, репликативная форма ДНК бактериофага ФХ174 В их молекулах обе полинуклеотидные цепи не имеют ни единого разрыва, поэтому любое изменение вторичной структуры, связанное с изменением количества остатков на один виток спирали, влечет за собой перестройку третичного строения ДНК. [c.47]

Ковалентно замкнутая кольцевая двухцепочечная ДНК — особый тип макромолекулярной организации ДНК. Например, ДНК вируса полиомы и ЗУ 40 вируса, а также двухцепочечная репликативная форма ДНК бактериофага ФХ174. Такие ДНК характеризуются сравнительно небольшой мол. массой. Обе цепи в их молекулах не имеют ни одного разрыва, вследствие чего любое изменение спирали влечет за собой перестройку третичной структуры. [c.56]

Репликативная форма РНК — один из типов макромолекулярной организации РНК с полностью двухспиральным строением. Репликативные формы РНК обнаружены в вирусах полиомиелита, сендай и энцефаломиокардита. Анализ комплементар-вости пар азотистых оснований в таких РНК, устойчивость к действию панкреатической РНК-азы, характер тепловой денатурации, отсутствие реакции с формальдегидом и рентгеновская дифракция — все подтверждает двухспиральное их строение. Репликация вирусных РНК проходит через стадию образования двухцепочечной репликативной формы. [c.73]

Механизм действия репликаз мелких РНК-содержащих вирусов точно еще не изучен. Можно было бы предположить а priori, что в результате каждого акта репликации образуются полностью двухцепочечные молекулы. Такие двухцепочечные формы уже были обнаружены в клетках, инфицированных РНК они получили название репликативных форм (РФ). Кроме того, получены многочисленные данные о существовании таких молекул, в которых РНК лишь частично имеет двухцепочечный характер (репликативная промежуточная форма, РПФ). Были предложены схемы, объясняющие появление РПФ в результате одновременного образования многочислен--ных комплементарных копий, которые последовательно вытесняют друг друга с одной и той же матричной моле- кулы [206]. Схематическое изображение этого механизма [c.240]

Некоторые данные о репликации вируса саркомы Рауса служат довольно ясным намеком на механизм онкогенеза, индуцированного РНК-содержащими вирусами. Оказалось, что уже на ранних стадиях инфекции вирусом саркомы Рауса должен происходить синтез ДНК, и при этом необходимо, чтобы ДНК функционировала на протяжении всего процесса репликации вируса [24] — обстоятельство, прямо противоположное тому, что наблюдается с репликацией всех неонкогенных РНК-содержащих вирусов. Высказывалось предположение, что РНК — ДНК-гибрид может представлять собой эквивалент репликативной формы (РФ) этих онкогенных вирусов [24]. Существует также предположение об образовании двух-ценочечных ДНК-провирусов, включенных в геном хозяина [497] Опыты по гибридизации ДНК хозяина и РНК вируса саркомы Рауса или РНК какого-нибудь другого вируса лейкоза показали, что небольшие сегменты этих РНК, особенно богатые аденином, комплементарны к ДНК-хозяина 1180, 181]. [c.276]

Ретровирусы представляют семейство РНК-содержащих вирусов, репликативный цикл которых отличается тем, что вирусный РНК-геном транскрибируется в ДНК-форму эту функцию обеспечивает обратная транскриптаза —фермент, кодируемый вирусным геномом. Жизненный цикл типичного ретровируса, такого, например, как вирус лейкоза мышей (МЬУ), показан в упрощенном виде на рис. 9.1. Вирусные частицы, каждая из которых содержит две копии одноцепочечного РНК-генома, образованы центральным нуклеопротеиновым кором, окруженным мембраной, которая несет на своей наружной поверхности специфическую оболочку из гликопротеинов. Инфицирование [c.274]

Векторы на основе бактериофага Я. Бактериофаг Я. — это вирус, размножающийся на бактериях Е. соИ. За последние 3U лет он стал излюбленным и наиболее изученным объектом генетиков и молекулярных биологов. Геном фага Я. представлен двуцепочечной ДНК размером в 48,5 т.п.о., которая упакована в головку фага в виде линейной молекулы с однонитевыми комплементарными концами длинои в 12 п.о. (липкие концы). После проникновения в клетку липкие концы объединяются и ДНК замыкается в кольцо. Кольцевая ДНК является репликативной формой. Возможность создания векторов на основе фага Я связана с тем его свойством, что гены центральной части (от I до N) несущественны для литического развития. Уже более 20 лет известны способы замещения центральной части фага сегментами бактериальной хромосомы путем определенных генетических манипуляций in vivo. Созданные таким образом специализированные трансдуцирующие фаги хорошо изучены. Идея провести манипуляцию замены центральной части ДНК фага Я in vitro на чужеродные фрагменты послужила поэтому логическим продолжением опытов in vivo. [c.147]

В 1978 г. было опубликовано две работы [21, 38], показавшие, каким образом с помощью олигонуклеотидов можно осуществлять прецизионные изменения в структуре ДНК. В обеих работах мутациям подвергался геном бактериофага ФХ174. В зрелом вирусе ДНК этого фага находится в одноцепочечной форме, но при инфицировании перед образованием новых фагов превращается в двухцепочечную, или репликативную, форму (RF). Авторы [21, 38] использовали синтетические олигонуклеотиды, комплементарные к вирусной ( + ) цепи, в качестве праймеров для синтеза in vitro [c.102]

Если обе нити циклической двуспиральной ДНК, например ДНК вируса 5У40 или репликативной формы ДНК фага 0X174, замкнуты, т. е. сахарофосфатная цепь непрерывна, то они могут иметь суперспиральную или суперскрученную конформацию. [c.229]

Двухценочечная молекула ДНК-это физиологическая матрица для синтеза всех клеточных РНК. Даже если геном, как у некоторых вирусов, представлен одноцепочечной ДНК, последняя перед транскрипцией обязательно переходит в двухцепочечную репликативную форму. Транскрибирована [c.118]

РИС. 2-23. А. Двойная спираль ДНК В-форма. (Arnott S., Hukins D. W. L.. JMB, 81, 93—105, 1975.) Б. Электронная микрофотография молекулы ДНК бактериального вируса (бактериофаг Т7) в момент ее репликации. Вирусная ДНК представляет собой длинный ( 14 мкм) дуплексный стержень, содержащий около 40 000 пар оснований. Виден небольшой репликативный глаз — участок, где происходит удвоение ДНК. Синтез ДНК начинается в особой точке (точке инициации), расположенной иа расстоянии, равном 17% длины молекулы, от одного из концов дуплекса. Окраска уранилацетатом негативное контрастирование. (С любезного разрешения Т. Wolfson [c.131]

У фага MS2 молекулярный вес частиц составляет 3,6-10 содерллание РНК — 31 % РНК находится в нем в виде компактной структуры с большим количеством водородных связей эта РНК инфекционна для бактериальных протопластов. РНК-содержащие фаги представляют значительный интерес для изучения репликации РНК в связи с образованием двухцепочечных молекул РНК (стр. 59) [136—139, 144]. Возможно, что при внедрении РНК-содержащего вируса в клетку РНК играет роль матрицы (стр. 271) для синтеза РНК-зависимой РНК-полимеразы (стр. 246) и белка вирусной оболочки. Образовавшаяся в результате полимераза синтезирует затем комплементарную цепь РНК, приводя к образованию двухцепочечной репликативной РНК. На этой синтезированной полимеразой комплементарной цепи двухцепочечной формы по,лимераза образует новые цепи вирусной РНК. К этому процессу мы еще вернемся в гл. XII (стр. 249). [c.161]

Так, например, если цепи ДНК разделить денатурированием, то ни одна из разошедшихся цепей инфекционностью обладать не будет (в системе с фагом-помощником). После ренатурации, однако, инфекционность восстанавливается 1951. Во время литической реакции ДНК фага находится преимущественно в суперспирализованной кольцевой форме, которая соответствует репликативной промежуточной форме ДНК этого фага. Кольцо разрывается только ко времени созревания вируса 1574]. [c.253]

Смотреть страницы где упоминается термин Вирус репликативная форма: [c.282] [c.259] [c.277] [c.181] [c.269] [c.274] [c.282] [c.495] [c.541] [c.868] [c.160] [c.137] [c.246] [c.108] [c.108] [c.49] [c.61] [c.71] [c.184] [c.345] [c.17] [c.222] [c.89] [c.897]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология