Фиксация фиксирующие агенты

Для приготовления постоянного препарата, который можно окрасить и наблюдать в микроскоп, необходимо сначала обработать клетки фиксирующим агентом с тем, чтобы иммобилизировать, убить и сохранить их. Используя химические термины можно сказать, что фиксация повышает доступность клеток красителям макромолекулы клеток скрепляются поперечными сшивками, что стабилизирует и закрепляет их в определенном положении. Некоторые ранние методы фиксации включали обработку кислотами или органическими растворителями, например, спиртом. В современных методах, как правило, используется обработка альдегидами, например, формальдегидом или глутаральдегидом, которые формируют ковалентные связи со свободными аминогруппами белков и, таким образом, сшивают соседние молекулы. [c.175]

Щадящая стабилизация ткани достигается фиксацией в пар . Согласно данным сравнительных исследований для фиксации в пар , можно рекомендовать следующие фиксирующие агенты формальдегид, акролеин, глутаральдегид, четырехокись осмия, глиоксиловую кислоту, хромилхлорид и этанол. [c.34]

Выход — 80—95% от взятого красителя. Для вступления в реакцию активной группы, способной фиксироваться на волокне в кислой среде, необходимо создание условий, требующихся для прохождения конденсации, а субстантивность не нужна. Так как в реакции с целлюлозой участвует мочевина, ее нельзя применять при растворении красителя и для набухания волокна. Поэтому для активных красителей, способных к фиксации в кислой среде, очень важна способность к диффузии. Прочность целлюлозных волокон, окрашенных по этому методу, несколько понижена от действия. кислотного катализатора, а также (если краситель содержит полифункциональные активные группы) и от действия структурирующих агентов. Снижение прочности зависит и от глубины окраски и может доходить до 10—20%. Активные системы, которые способны реагировать с целлюлозой только в щелочной среде, можно ввести в реакцию и в кислой среде с волокнами, содержащими NH-группы, т. е. с шерстью и полиамидами, что объясняется высокой нуклеофильностью азота. Можно также проводить фиксацию красителей на целлюлозе с помощью галогенсодержащих гетероциклов в комбинации с обработкой смолами, содержащими метилольные соединения с NH-группами. В этом случае нет непосредственного связывания с волокном, краситель взаимодействует с NH-группой смолы, а ее метилольная группа реагирует с волокном. [c.277]

Более четко, хотя и с большими затратами времени, фиксацию осуществляют с помощью химических агентов. Проста и часто вполне удовлетворительна фиксация 5%-ным формалином (объем/объем) в течение нескольких минут, особенно для окраски по Граму (разд. 3.3.5). Подробное описание фиксации четырехокисью осмия (разд. 2.2.2) и по Боуэну (разд. 2.2.1) см. в гл. 2. В последнем случае берут бактерии, выросшие за несколько часов в микроколонии или распределенные до монослоя на твердой среде в чашке Петри. Кусочек агара с бактериями вырезают, фиксируют и переносят на покровное стекло, а затем окрашивают соответствующим образом одним из основных красителей или специально обрабатывают для получения цитохимической информации. Эту методику применяют к молодым культурам всего через несколько часов после посева на агар, когда формируется сплошной слой из микроколоний. Лучше всего заливать агар соответствующей суспензией и отсасывать избыток пастеровской пипеткой, наклоняя чашку. После этого чашку подсушивают и инкубируют. Влажные пленки бактерий на покровных стеклах фиксируют и до высушивания, выдерживая их в парах 2%-но- [c.60]

Некоторые методы оказываются чрезвычайно чувствительными, это. в особенности относится к ЭПР, ХДПЯ и инициируемой полимеризации, поэтому следует всегда иметь в виду возможность того, что детектируемый с помощью такого метода интермедиат является продуктом параллельной второстепенной реакции и не характеризует рассматриваемую основную реакцию. Эта возможность менее вероятна при использовании метода химической фиксации (химической ловушки), в частности если фиксирующий агент превращает весь или большую часть интермедиата в соединение, отличное от обычного продукта реакции. [c.118]

Была исследована возможность иммобилизации хрома и кадмия в шламе гальванических производств [7]. В качестве связывающих агентов использовались смесь NajSiOj с цементом и смесь золы с летучей золой. Хотя приемлемы оба способа, первый оказался предпочтительнее, так как обеспечивает получение более стойких во времени соединений с хромом и кадмием (особенно большая разница наблюдается по отношению к фиксации хрома). Содержание NajSiOj в фиксирующей смеси влияет на стойкость соединений связанных металлов. Чем выше концентрация Na2Si03, тем больше устойчивость соединений. [c.50]

Регенерированный фиксирующий раствор откачивается из циркуляциоииого резервуара 9 иасосом 19, Регенерирующий агент добавляется к раствору из резервуара 20, а регенерированный раствор иаправляется иа хранение в резервуар 21, откуда по мере необходимости его подают в резервуар для фиксации 22. Таким образом, процесс регенерации заканчивается. [c.329]

НОГО освещения в течение 15 мин. в азоте, индикатор попадает почти исключительно в фосфоглицериновую и пировиноградную кислоты. Отношение активности фосфоглицериновой кислоты к активности пировиноградной кислоты (7 1) указывает, что фосфоглицериновая кислота получается не в результате образования фосфопировиноградной кислоты, а предшествует последней. На основания этих резз льтатов можно отметить следующее во-первых, темновая фиксация, следующая за предварительным освещением,, происходит в результате продолжительного существования акцептора двуокиси Зтлерода, во-вторых, этот акцептор подобен акцептору, действующему при фотосинтезе, не только в том отношении, что он приводит к одному и тому же соединению, — фосфоглицериновой кислоте, но осуществляет это при помощи механизма, в котором фосфопировиноградная кислота не участвует как предшественник. Тот факт, что, помимо фосфоглицериновой кислоты, фиксируются лишь незначительные количества индикатора, также отвергает возможность появления долго лгивущего общего восстановительного агента при фотохимическом разложении воды предварите.1ьным освещением. [c.605]

М-В5 фиксируют после промежуточной сушки в ванне, состоящей из 20 г кальцияированной соды, 0,6 г едкого натра, 10 г сульфата натрия и 100 г воды, продолжительность фиксации 15 с при 30 °С [402]. При применении красителей с низкой активностью темпера туру фиксации приходится поднять до 95° С. Окрашенный или на печатанный материал пропитывают щелочным проявляющим рас твором и проводят фиксацию прогоном ткани по воздуху [403 Можно также разбрызгивать связывающий кислоту агент [404 [c.304]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология