Метод флуоресцирующего

Большое число микротрубочек содержится в длинных аксонах нервных клеток. Здесь они, вероятно, обеспечивают быстрый перенос белков и других веществ из тела клетки в аксон Микротрубочки, функция которых неизвестна, обнаружены и во многих сенсорных клетках. Недавно было показано, что микротрубочки содержатся в цитоплазме самых разных клеток. Иопользуя непрямой метод флуоресцирующих антител, Вебер и др. получили приведенную ниже [c.276]

Метод флуоресцирующих антител [c.208]

Ограничения метода флуоресцирующих антител [c.161]

Проблемы теории и количественной оценки флуоресценции, принципы флуоресцентной микроскопии, а также разнообразные способы применения метода флуоресцирующих антител в последние годы были предметом обсуждения на многочисленных конференциях, и им посвящена большая литература некоторые издания указаны в разделе Рекомендуемая литература в конце главы. [c.165]

Из множества методов, применяемых для титрования аденовирусов, мы опишем три следующих титрование вируса методом бляшек, титрование вируса по ЦПД определением конечной точки и метод флуоресцирующих фокусов. [c.265]

Метод флуоресцирующих фокусов [c.268]

Наиболее точным методом титрования, несомненно, является метод бляшек. Однако он предполагает сохранение стабильного монослоя клеток при длительном культивировании. Метод титрования вируса по ЦПД определением конечной точки, вероятно, наиболее прост в исполнении и достаточно чувствителен. В большинстве случаев можно ограничиться использованием этого метода. Метод флуоресцирующих фокусов, хотя и занимает меньше всего времени, однако требует большого количества реактивов и предварительного определения оптимального срока для подсчета фокусов первичной инфекции. [c.269]

Пример 15-Х. Метод флуоресцирующих антител Антитело к определенному веществу (например, вирусному антигену или компоненту клеточной стенки) связывается с флуоресцирующим красителем. Если антитело инкубировать с клетками, содержа щими антиген, и затем отмыть, то при исследовании клеток с помощью флуоресцентной микроскопии флуоресценция будет наблюдаться только там, где присутствует антиген. Этот метод широко используется для обнаружения антигенов опухолей и для идентификации внутриклеточных вирусов. Более полное описание метода дано в гл. 2, а на рис. 2-20 приведен пример его использования. [c.446]

Для изучения внутриклеточной локализации вирусов и их распространения по тх аням растепия-хозяина и насекомого-переносчика применяют метод флуоресцирующих антител. [c.379]

По характеру взаимодействия с контролируемым объектом основным способом радиационного (рентгеновского и гамма) контроля является метод прохождения, Он основан на разном поглощении излучения материалом изделия и дефектом. Таким образом, информативным параметром здесь является плотность потока излучения в местах утонений и дефектов плотность прошедшего потока возрастает. Чем больше толщина изделия, тем более высокочастотное (более жесткое) излучение применяют для контроля рентгеновское, гамма (от распада ядер атомов), жесткое тормозное (от ускорителя электронов бетатрона, микротрона, линейного ускорителя). Предельное значение толщины стали, контролируемое с помощью излучения последнего типа,— около 600 мм. Приемником излучения служит, например, рентгенопленка (радиографический метод), сканирующий сцинтилляционный счетчик частиц и фотонов (радиометрический метод), флуоресцирующий экран с последующим преобразованием изображения в телевизионное (радиоскопи-ческий метод) и т. д. [c.16]

Методика исследования микроколоний на мембранных фильтрах с помощью лю линесцентной микроскопии разработана для ускоренной дифференциации кишеЧной палочки и холерного вибриона. Однако эта методика не позволяет осуществлять специфическую окраску и дифференциацию патогенных от непатогенных микробов, имеющих одинаковые морфологические и физиологические свойства. Такая дифференциация осуществляется только с помощью метода флуоресцирующих антител. [c.164]

Новые возможности для усовершенствования определения общего числа микроорганиз.мов открылись с развитием люминесцентного анализа. Метод флуоресцирующих антител нашел широкое применение в микро- [c.90]

Имеются различные экспериментальные методы, позволяющие следить за спадом флуоресценции после воздействия излучения. В большинстве этих методов флуоресцирующее вещество помещается между двумя затворами, которые могут открываться в разное время. Один из затворов позволяет свету от возбуждающего источника падать на образец, тогда как другой затвор позволяет наблюдателю видеть образец через короткое время после закрывания первого затвора. Можно пользоваться механическими затворами для интервалов времени до 10 сек. для времени до 10 се ., используются ячейки Керра и дифракция ультразвуковых волн (очень быстро действующее устройство описано в ([43а]). С помопд,ью этих приспособлений можно непосредственно измерять продолжительности жизни возбужденных молекул и влияние т шителей на эти продолжительности жизни. Следует указать, что на этом пути также можно определить, относится лн тушение к статическому или динамическому типу. При статическом тушении изменение концентрации тушителя просто изменяет число потенциально флуоресцентных молекул без изменения продолжительности их жизни, тогда как при динамическом тушении увеличение концентрации тушителя гювышает вероятность дезактивирующих столкновений и поэтому должно уменьшать продолжительность жизни. [c.530]

Ермакова Г. И., ТарасевичЛ. М. Применение метода флуоресцирующих антител для обнаружения нолиэдренного антигена в яйцах (грене) тутового шелкопряда. — Вопросы вирусологии , 1968, № 1, с. 89—93. [c.333]

I, Метод флуоресцирующих аитител [c.161]

Как прав1ИЛо, для упомянутых исследований обычные прямой и непрямой методы флуоресцирующих аитител не совсем пригодны. Дело в том, что большинство дифференцировочиых антигенов выявляются только как аллоантигены, н поэтому [c.161]

Описанный в этой главе метод представляет собой дальнейшее развитие, а ие просто аналог обычного непрямого метода меченых антител. Преимущества НМГА особенно очевидны при изучении аллоантигенов, где применение обычного непрямого метода флуоресцирующих антител затруднено. [c.185]

Мы не касаемся здесь вопросов приготовления аитисывороток и выделения чистых антител. Антисыворотки конкретной специфичности, которые могут понадобиться при работе методом флуоресцирующих антител, настолько разнообразны, что их трудно даже перечислить. Отметим только, что главное условие приготовления антиглобулиновых реагентов и чистых антител — это предварительное выделение высокоочищенных аитигеиов. [c.165]

Этот бурно развивающийся раздел гистохимии использует способность организма к образованию спещ1-фических антител против чужеродного материала (антигенов). Антиген и антитело взаимодействуют друг с другом с высокой спещ1фичностью. Антигены, антитела, а также комплексы антиген — антитело не видны под микроскопом. Можно, однако, получить конъюгат антител с флуоресцеетным красителем, не вызывая при этом ослабления сродства антител к антигену. При нанесении такого конъюгата на срез ткани происходит специфическая реакция антиген —антитело, которую легко увидеть благодаря характерной флуоресценции в ультрафиолетовом свете при наблюдении в флуоресцентном микроскопе. На этом принципе, основан метод флуоресцирующих антител, позволяющий локализовать специфические реакции антиген — антитело. [c.297]

Для изучения места репродукции РНК и белка вируса полиомиелита в инфицированных клетках HeLa Леви (Levy) (1961) использовал метод флуоресцирующих антител и авторадиографии. В течение первых 3 часов инфекции был обнаружен больший, чем в контрольных клетках, синтез РНК в ядрышках зараженных клеток и более быстрое выделение этой РНК в цитоплазму. Выделяе-мая в цитоплазму РНК связывалась рибосомами. (Следует отметить, что биохимическими исследованиями давно доказана ответственность рибосом за синтез белка.) Спустя 5 часов после инфекции, ядрышко лишалось способности синтезировать РНК- Количество ДНК в зараженных клетках было таким же, как и в нормальных клетках. Общий белковый синтез в зараженных клетках понижен. [c.115]

Многие авторы [371, 1605, 1610] успешно использовали метод флуоресцирующих антител для выявления вирусных аптагепов в насекомых-пере-носчнках (гл. XVI). [c.380]

Белок антител, специфически связанных с антигеном внутри клетки, не отличается но проницаемости для электронов от белков самой клетки, и потому с помощью электронного микроскопа его выявить нельзя. Одиако разработаны методы конъюгации антител с ферритином — низкомолекулярным белком, содержащим большое количество железа. Такие-копъюгированные с ферритином антитела можно использовать в качестве красителя при электронной микроскопии. Шалла и Амици [1547] применяли этот метод при изучении распределения белка ВТМ в клетках листьев томатов. Ои дает гораздо более высокое разрешение но сравнению с методом флуоресцирующих аптител и позволяет обнаруживать единичные вирусные-частицы (фото 83). [c.380]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология