Электрофоретическое разделение полисахаридов

Описано также электрофоретическое разделение полисахаридов в щелочном буфере [35]. [c.50]

ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ [c.48]

Биологические макромолекулы — белки, нуклеиновые кислоты, полисахариды — находятся в растворе в виде частиц, которые по своим размерам соответствуют коллоидным частицам. Они несут определенный электрический заряд благодаря наличию групп, способных к электролитической диссоциации. Общий заряд данной частицы определяется прежде всего концентрацией Н+- ионов в среде и может изменяться при ее взаимодействии с ионами малой молекулярной массы или другими макромолекулами. Под действием электрического поля заряженные частицы перемещаются к катоду или аноду в зависимости от знака их суммарного заряда. Такое явление носит название электрофореза. Скорость движения частицы (см/с) при напряженности электрического поля 1 В/см называется электрофоретической подвижностью. Она имеет размерность ом .с- -В , а ее знак совпадает со знаком суммарного заряда. Различия в подвижности частиц служат основой для разделения смесей веществ в аналитических или препаративных целях. Определение подвижности используется также для характеристики вещества, [c.11]

Электрофоретическое разделение полисахаридов может быть осуществлено различными путями под действием электрического тока в растворе (электрофорез с подвижной границей в ячейке Ти-зелиуса) на полосках бумаги, на листах бумаги из стеклянного волокна, на лентах из чистого отбеленного шелка, на колонках, заполненных стеклянным порошком (зонный электрофорез). [c.48]

Качественное, количественное и препаративное электрофоретическое разделение нейтральных полисахаридов [c.295]

Для электрофоретического разделения полисахаридов пользуются как аппаратом Тизелиуса, так и электрофорезом на бумаге или на стекловолокнистой бумаге, а также на колонке со стеклянным порошком. Последние два метода имеют преимущества перед бумажным электрофорезом, поскольку в этих случаях исключается взаимодействие полисахаридов с целлюлозой бумаги, обладающей сильными сорбционными свойствами. [c.56]

Электрофоретическое разделение в ячейке Тизелиуса применяется для определения гомогенности полисахаридов и определения числа компонентов в смесях полисахаридов. [c.48]

На рис. 2 представлена типичная картина электрофоретического разделения в агарозном блоке из сыворотки кролика 4184-изолировали три популяции антител к пневмококку типа III, обладающих различной электрофоретической подвижностью. Сыворотка содержала около 15 мг антител класса IgG в 1 мл. Получены четыре основные фракции, содержащие иммуноглобулины. Картина изоэлектрического фокусирования для трех из них (рис. 3) подтверждает эффективность электрофоретического метода можно видеть, что фракция 4 содержит в основном антитела с р1 7,7-—8 (медленно мигрирующий компонент), а фракция 2 (быстро мигрирующий компонент) — антитела с р 5,9—6,2. Фракция 3, как и следовало ожидать на основании электрофореграммы, содержит примесь фракции 2. Фракция 1 (на рис. 3 не Показана) по данным микрозонального электрофореза загрязнена другими сывороточными белками. С помощью количественной преципитации с полисахаридом пневмококка типа III было показано, что в элюат из геля выходит в общей сложности 74,2% антител, содержавшихся в нанесенном образце сыворотки. [c.66]

Электрофорез в крахмальном геле был первым электрофоретическим методом, в котором для улучшения разделения была использована среда, обладающая овойствами молекулярного сита. Крахмал — это нерастворимый в воде полисахарид. В нативном состоянии он связывает некоторое количество воды и набухает, но не способен превратиться в жидкость при повышении температуры. Путем частичного кислотного гидролиза крахмал может быть переведен в форму, представляющую собой жидкий золь при температурах выше и твердый гидрогель при комнатной температуре. Оказалось, что для электрофореза вполне подходит картофельный крахмал [1199], но можно использовать также и рисовый [1037]. [c.68]

Как построены макро.чолекулы, входящие в состав живых организмов Первые биохимики обнаружили в живых организмах вещества, которые были названы белками, нуклеиновыми кислотами, полисахаридами и сложными липидами. Развитие биохимии в немалой степени зависело от разработки методов выделения и очистки этих соединений. С помощью новых физико-химических методов удалось установить, что их молекулярные массы характеризуются величинами от 10 000 до 100 000 000 и более. В течение долгого времени кажущаяся поистине геркулесовой работа по установлению полной структуры таких молекул представлялась экспериментально вообще неосуществимой. Однако создание ряда новых физических приборов ультрацентрифуг, электрофоретических аппаратов, регистрирующих спектрофотометров, спектропо-ляриметров и аминокислотных анализаторов — позволило определить основные структурные характеристики этих молекул. Усовершенствованная техника анализа и, в частности, хроматографические методы сделали возможным разделение сложных смесей веществ и определение их микроколичеств, что является необходимой предпосылкой для установления ковалентных структур строительных блоков различных макромолекул. Благодаря развитию рентгеноструктурных методов оказалось возможным построить детальные трехмерные модели многих относительно небольших [c.13]

Если при электрофоретическом разделении на диаграмме будет получен один пик, это еще не значит, что исследуемый полисахарид является однородным, так как несколько полисахаридов могут иметь одинаковую подвижность. Смена буфера помогает иногда выявить различия в полисахаридах. Вещество можно считать электрофоретически гомогенным, если для полисахарида наблюдается единственный пик в различных буферных растворах. [c.49]

Из зеленых морских водорослей (Ulma la tu a) [263] экстракцией холодной и горячей водой выделен полисахарид ([а]о = = —70,7°), состоящий из остатков -рамнозы, D-ксилозы и D-глюкозы в отношении 4,8 3,4 1. Электрофоретически однородный полисахарид содержал 18% SO4 и 14,1% уронового ангидрида. При разделении на колонке с диэтиламиноэтилцеллюлозой были получены три фракции с различным молекулярным весом, но близкие по составу моносахаридов, величине [а]о, содержанию S0 и [c.277]

Электрофорез и электромиграцию можно использовать для разделения и идентификации микроколичеств материалов. Широкое использование этих методов, нанример в анализе аминокислот, белков, алкалоидов, красителей и их полупродуктов, сахаров и полисахаридов, хорошо известно. Применение этих методов в неорганическом анализе в некоторых случаях может иметь преимущество по сравнению с обычными методами. В этой связи может быть перспективным применение органических растворителей. Так, при электрофоретическом разделении в метанол — ацетонных смесях подвижность ионов резко отличается от подвижности в водных растворах, и Зг и Ва легко можно разделить, так же как отделить Zn от N1, Со и Мн [224]. [c.315]

Качественный и количественный микроанализ смесей нейтральных цолисахаридов можно провести с помощью электрофореза этих веществ в боратном буфере [1, 2]. Электрофоретическое разделение можно применять также в большом масштабе для получения индивидуальных полисахаридов из смеси [3] при этом используют колонку, аналогичную описанной Поратом [4]. Выходы при таких разделениях вполне удовлетворительны и в препаративных методах достигают 90% [5]. [c.295]