Разделение полисахаридов

Оказалось возможным разделение полисахаридов гемицеллюлоз различными приемами, основанными на различии в структуре полисахаридов, их растворимости и количественном содержании неуглеводных остатков или групп, входящих в состав молекул. Рассмотрим основные из них. [c.36]

Описано также электрофоретическое разделение полисахаридов в щелочном буфере [35]. [c.50]

Фракционированием спиртом не всегда достигается полное разделение полисахаридов, однако обогащение отдельных фракций полисахаридами одного вида облегчает дальнейшее разделение и очистку полисахаридов другими методами. Простота разделения, незначительные потери полисахаридов делают этот метод весьма ценным для предварительного их разделения. [c.37]

Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы (молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы (для очистки ферментов) или антитела (для очистки антигенов) в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя pH, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы (см. разд. 26.3.7.6) конканавалина А [40], являющегося фитогемагглютинином (лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. Благодаря достижениям в производстве носителей для жидкостной хроматографии под высоким давлением можно осуществить хроматографическое разделение быстро и избирательно описаны методы фракционирования небольших олигосахаридов, продолжающегося менее 1 ч [42]. [c.224]

РАЗДЕЛЕНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ И ИХ ОЧИСТКА [c.36]

ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКОЕ РАЗДЕЛЕНИЕ ПОЛИСАХАРИДОВ [c.48]

Неодинаковая растворимость полисахаридов гемицеллюлоз в калиевой и натриевой щелочи используется иногда для фракционного разделения полисахаридов на стадии выделения их из холоцеллюлозы. [c.30]

При фракционном выделении гемицеллюлоз экстракцией холоцеллюлозы или непосредственно растительной ткани не достигается полного разделения полисахаридов. Обычно экстракты содержат смесь полисахаридов или фракции с преобладающим содержанием того или иного компонента. Разделение смеси на отдельные полисахариды связано с большими трудностями. [c.36]

Рис. 26. Разделение полисахаридов гемицеллюлоз древесины кедра электрофорезом на бумаге

Для разделения полисахаридов используют их различия в раствори- [c.186]

Для разделения полисахаридов может быть использована бумажная [34] и тонкослойная [35] хроматография, однако основами методами являются колоночные гель-фильтрация [36] и [c.223]

Электрофоретическое разделение полисахаридов может быть осуществлено различными путями под действием электрического тока в растворе (электрофорез с подвижной границей в ячейке Ти-зелиуса) на полосках бумаги, на листах бумаги из стеклянного волокна, на лентах из чистого отбеленного шелка, на колонках, заполненных стеклянным порошком (зонный электрофорез). [c.48]

Гель-проникающая хроматография является, вероятно, наиболее часто используемым методом [13], так как это самый простой метод разделения полисахаридов, имеющих большой диапазон молекулярных масс. Одновременно он позволяет определять молекулярные массы полисахаридов. Когда применимы мягкие условия определения, этот метод особенно полезен для нестабильных биологических материалов. Некоторые из нескольких сот статей, касающихся. этого вопроса, приведены в табл. 23.1. [c.131]

Некоторые исследователи термин полисахариды применяют для обозначения только высших полисахаридов, и все углеводы делят на три группы моносахариды, олигосахариды и полисахариды. Нам (как -и ряду других авторов) представляется целесообразным разделение углеводов на две группы моно- и полисахаридов, различающихся по неспособности или способности гидролизоваться, с последующим разделением полисахаридов на олигосахариды и высшие полиозы. [c.6]

Для электрофоретического разделения полисахаридов пользуются как аппаратом Тизелиуса, так и электрофорезом на бумаге или на стекловолокнистой бумаге, а также на колонке со стеклянным порошком. Последние два метода имеют преимущества перед бумажным электрофорезом, поскольку в этих случаях исключается взаимодействие полисахаридов с целлюлозой бумаги, обладающей сильными сорбционными свойствами. [c.56]

Углеводы. Принцип. В осадке и активном иле углеводы представлены полисахаридами. Метод основан на разделении полисахаридов по степени их гидролиза кислотами и определении редуцируемого сахара по Бертрану. [c.160]

Наиболее характерной особенностью полиоз является многообразие типов связей между элементарными звеньями в макромолекулах. В макромолекулах целлюлозы и крахмала, которые относятся к наиболее распространенным в природе полисахаридам, основным видом связей являются связи 1—4. Такие связи встречаются и в полиозах, но этот тип связи не является ни единственным, ни основным. В полиозах могут содержаться все возможные связи между 1-м атомом углерода одного звена и 2-м, 3-м, 4-м и 6-м атомами углерода соседнего звена, причем в одной и той же макромолекуле могут быть связи различных типов. Нередки случаи, когда одно звено соединяется одновременно с 3—4 звеньями, и в результате макромолекулы имеют сильно разветвленную форму. Принцип классификации полиоз на основании химического состава и строения элементарного звена позволяет наиболее целесообразно распределить все полиозы в группы по характерным и вполне определенным признакам. Бесспорно, что при распределении индивидуальных полисахаридов по группам встречается ряд трудностей, однако эти затруднения обусловлены не дефектами вышеприведенной классификации, а исключительно недостаточной изученностью полиоз. В частности, в ряде случаев трудно решить вопрос о том, является ли данное вещество смесью индивидуальных полисахаридов или представляет собой смешанный полисахарид, макромолекула которого состоит из остатков нескольких моноз. Обычные физические методы разделения полисахаридов не всегда дают достоверные результаты, так как некоторые из них могут обладать одинаковыми или очень близкими физическими свойствами. [c.507]

Для разделения полисахаридов (а и -амилозы) используют в качестве адсорбента вату. [c.144]

Фракционирование обычно проводят при pH 7,0, при котором полисахариды наиболее устойчивы. При выдерживании гемицеллюлоз 1 кислой среде может происходить значительный гидролиз гликозидных связей [1], а в растворах оснований наблюдается щелочное расщепление 12]. При pH 7,0 карбоксильные группы уроновых кислот, входящих н состав гемицеллюлоз, находятся в форме ионизованных солей. Иногда хорошее разделение полисахаридов достигается только в кислой среде (pH 2—4), если эти карбоксильные группы не ионизованы. Поскольку при низких значениях pH может происходить гидролиз, разделения лучше проводить с небольшими количествами веществ, быстро и при пониженной температуре. [c.285]

Обычные синтетические анионообменные смолы оказались малодейственными при разделении полисахаридов гемицеллюлоз. Полисахариды из-за больших размеров молекулы задерживаются смолами лишь на поверхности зерен и по этой причине обменная емкость их используется лишь в незначительной степени. [c.46]

Общего метода очистки для всех полисахаридов не существует, и используемые методики в каждом случае зависят от характера отдельных полисахаридов и от возможных загрязнений. Второй том книги Пигмана и Хортона [1] посвящен химии и биохимии полисахаридов, их выделению, разделению и очистке, так что мы решили в этом обзоре рассматривать только взаимное хроматографическое разделение полисахаридов. [c.129]

Для обнаружения разделенных полисахаридов на электрофо-реграммах применяют опрыскивание раствором а-нафтисульфокис-слоты в бутаноле [36] или определяют их по свечению в ультрафиолетовом свете [35]. Однако не все полисахариды светятся в ультрафиолетовом свете и, кроме того, вызывают яркое свечение в этих условиях незначительные примеси в образце полисахарида веществ лигниновой природы. [c.50]

Для анализа электрофореграммы разрезают на отрезки по 2 см, полисахариды с полученных отрезков элюируют водой, элюаты гидролизуют и углеводный состав гидролизатов определяют хроматографией на бумаге с растворителем пиридин— этилацетат—вода (1 5 5). Состав углеводов на хроматограммах, соответствующих отрезкам —6 электрофореграмм (рис. 26), дает возможность представитв распределение на электрофореграммах 4-0-метилглюкуроноарабоксилана и галактуроноарабогалактана. Наличие только двух пиков на электрофореграмме свидетельствует об однородности разделенных полисахаридов. [c.177]

Однако, трудность разделения полисахаридов и лигнина привела к предположению о существовании химических связей между лигнином и углеводами. Установили, что для извлечения лнгнина из клеточных стенок органическими растворителями, растворяющими выделенные препараты лигнинов, необходимо присутствие каталитических количеств сильных минеральных кислот (см. 12.2.3) или воздействие гидролизующих ферментов. Невозможно ни извлечь углеводы из древесины без удаления некоторого количества лигнина, ни полностью удалить лигнин без разрушения некоторой части углеводов. Препараты вьщеленных из древесины холоцеллюлозы и целлюлозы, а также технические целлюлозы всегда содержат большую или меньшую примесь остаточного лигнина, и, наоборот, препараты выделенных лигнинов всегда содержат примесь углеводов. [c.407]

Другим большим разделом химии углеводов является химия полисахаридов. Полисахариды представляют собой полимеры моносахаридов, точнее продукты их поликонденсации, и их молекулы образуют цепи, состоящие из моносахаридных звеньев, связанных друг с другом через атом кислорода. Полисахариды — типичные высокомолекулярные вещества, и этот раздел химии углеводов по принципиальным и методическим подходам сходен с другими разделами химии полимеров. В частности, уже само понятие индивидуального вещества в данном случае теряет смысл и часто заменяется понятием фракции, содержащей идентичное по строению, но различающееся по молекулярному весу семейство полимергомо-логов. Это накладывает свой отпечаток на методы выделения и разделения полисахаридов. Далее, понятие структуры полисахарида и методы ее установления также сходны с соответствующими понятиями и методами высокомолекулярной химии. [c.9]

В первой работе в этой области [4] было показано, что основные ионообменники целлюлозы, такие, как DEAE-целлюлоза, являются более подходящими для разделения полисахаридов, чем ионообменные смолы, которые использовали ранее [5], вследствие более обширной активной поверхности DEAE-целлю-лозы. Углеводы кислого характера хорошо адсорбируются при нейтральном значении pH, а углеводы нейтрального характера — только в щелочной среде. Для разделения подобного типа использовали E TEOLA-целлюлозу [6]. [c.130]

Разделение полисахаридов на групйы олигосахаридов и высших полиоз оправдано не только с позиций оценки их молекулярной массы и указанных различий свойств, но и с позиции техники их исследования. Если при изучении олигосахаридов применяются обычные классические методы органической химии, то при исследовании высших полиоз помимо названных методов используются и приемы работы с высокополимерами. [c.6]

Например, Виллокс с сотр. [32] в исследованиях метаболизма анилина у пауков хроматографировал водорастворимые метаболиты на сефадексе G-15, проводя элюирование водой. В этом случае, при отборе фракций по 15 мл, жидкостный сцинтилляционный счет показал наличие двух основных метаболитов. Гель-хроматография часто используется для анализа высокомолекулярных комплексов. Игл [33] анализировал экстракты, содержащие индолуксусную кислоту, связанную с белком из растений, на колонках с сефадексом G-25 или G-50. Элюат собирали по фракциям объемом около 2 мл и для измерения активности отбирали пробы по 0,2 мл. Нельсон с сотр. [34] использовал сефадекс G-10 для разделения продуктов, которые образовались при инкубировании микросом печени в присутствии [ С] ацетилгид-)азина. Они собирали фракции по 2 мл. Клейн с сотр. 35] хроматографировал на сефадексах G-I00 и G-200 55]гепаран-сульфат и также использовал метод со сбором фракций. Гель-хроматографию применяют и для разделения полисахаридов. Пример разделения меченых В-глюканов приведен в работе Говарда с сотр. [36]. [c.193]

Разделение полисахаридов описано Гарделлом [4], Беренсоном [5] и Гранатом 16). Эти авторы основывали свои методы на неодинаковой растворимости различных полисахаридов в разных смесях воды и органических растворителей. Позже Антонопулос и сотр. [7] описали колоночный процесс разделения кислых полисахаридов, основанный на различной растворимости в солевых растворах их комплексов с четвертичными аммониевыми соединениями, содержащими алифатические радикалы с длинной цепью. Возможности использования этих соединений для [c.264]