Методы приготовления препаратов микроорганизмов

МЕТОДЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ МИКРООРГАНИЗМОВ ДЛЯ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ [c.114]

Для исследования препаратов в электронном микроскопе вместо предметных стекол применяются специальные пленки, незначительно поглощающие электроны. Они крепятся на опорные сетки. Материалом для приготовления пленок служат коллодий, окись алюминия и кварц. Тщательно очищенный от различных примесей и нанесенный на пленку исследуемый материал после испарения жидкости оставляет на ней тончайший слой, который и подлежит микроскопии. В электронном микроскопе можно также исследовать срезы тканей, клеток, микроорганизмов, полученные с помощью ультрамикротома. Препараты контрастируют с помощью электронно-плотных (задерживающих электроны) веществ, используя разные методы напыление тяжелых металлов, обработка фосфорно-вольфрамовой кислотой, уранилацета-том, солями осмиевой кислоты и др. [c.11]

Фармацевтическая микробиология исследует инфекционные болезни лекарственных растений, порчу лекарственных растений и сырья под действием микроорганизмов, обсемененность лекарственных средств в процессе приготовления, а также готовых лекарственных форм, методы асептики и антисептики, дезинфекции при производстве лекарственных препаратов, технологию получения микробиологических и иммунологических диагностических, профилактических и лечебных препаратов. [c.10]

МЕТОДЫ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ МИКРООРГАНИЗМОВ [c.23]

С целью концентрации патогенных микроорганизмов исследуемую воду можно фильтровать через мембранные фильтры. Для приготовления препаратов в этом случае делаются мазки-отпечатки с верхней поверхности фильтра. На обезжиренное предметное стекло помещают фильтр его верхней поверхностью и ребром пинцета тщательно прижимают к стеклу. После высыхания фильтр отделяемся от стекла. Мазок-отпечаток фиксируют и обрабатывают одним из описанных выше методов. [c.166]

К недостаткам метода Пешкова следует отнести сложность и длительность выполнения, необходимость приготовления препарата на предметном стекле, что не позволяет вести одновременно точный количественный учет всех микроорганизмов. Результаты во многом зависят от качества светлого зеленого красителя. [c.113]

Искусственное обогащение почвы клубеньковыми бактериями оказывает весьма благоприятное влияние на азотный баланс почвы и на развитие бобовых и других растений севооборота. Препарат клубеньковых бактерий, который называется нитрагином, вносят вместе с семенами бобовых при посеве. При приготовлении нитрагина следует учитывать специфичность клубеньковых бактерий, выражающуюся в том, что отдельные их расы способны развиваться лишь на корнях одного или очень небольшого числа определенных видов бобового растения (рис, 140), Специализация эта, правда, не имеет абсолютного значения и может быть преодолена методами направленного воспитания микроорганизмов. [c.464]

В приготовленные разведения антибиотика вносят бульонные культуры микроорганизмов в логарифмической или ранней стационарной фазе роста. Для большинства патогенных микроорганизмов этот период соответствует 16—18 ч для некоторых видов, рост которых замедлен, — 48 ч культивирования. В соответствии с действующим приказом № 250 от 13 марта 1975 г. Об унификации методов определения чувствительности микроорганизмов к химиотерапевтическим препаратам вместо бульонных культур допускается использование агаровых культур, которые разводят бульоном и стандартизируют до содержания 10 —10 микробных тел в 1 мл. Бульонную культуру или взвесь агаровой культуры исследуемых бактерий в бульоне добавляют в объеме 1 мл к каждому разведению антибиотика. При этом концентрация антибиотика в пробирке становится в 2 раза ниже. Все ряды пробирок включают по одной контрольной пробирке, содержащей 1 мл бульона без антибиотика и 1 мл культуры каждого испытываемого штамма. [c.71]

В последние годы энтомопатогенные микроорганизмы широко и успешно применялись в борьбе против насекомых на культурах всех типов с помощью обычной наземной и авиационной аппаратуры. Вследствие легкости приготовления суспензий из инфекционного материала, выращенного в лаборатории или собранного в поле, большинство исследователей в прошлом предпочитало опрыскивание. Для его проведения применялись различные методы устойчивые стадии некоторых возбудителей болезней в ряде случаев рассеивались при крайне высоких давлениях, до 70 атм. Гораздо меньше испытаний было проведено с другими типами бактериальных препаратов, хотя в прошлом иногда экспериментально применялись различные несовершенные дусты, а недавно проводились широкие испытания бактериальных пылевидных и гранулированных препаратов, изготовленных промышленностью. То обстоятельство, что многие возбудители болезней насекомых могут быть включены в очень разнообразные препараты, расширяет возможности успешного экспериментирования с методами их распределения для достижения удовлетворительного уничтожения вредных насекомых. [c.463]

Капельный метод Линднера используют при работе с крупными микроорганизмами дрожжами, мицелиальными грибами, водорослями. Порядок работы следующий. Накопительную культуру разводят в стерильной среде с таким расчетом, чтобы в небольшой капле были одиночные клетки микроорганизмов. Затем на поверхность стерильного покровного стекла стерильным стальным пером наносят ряд капель приготовленного разведения. Готовят препарат висячая капля . Нанесенные на покровное стекло капли просматривают под микроскопом и отмечают те, в которых обнаружена только одна клетка. После этого препарат помещают в термостат во влажную камеру, которой обычно служит чашка Петри с увлажненной фильтровальной бумагой на дне. Череа 12—24 ч отмеченные капли вновь микроскопируют. Те капли, в. которых наблюдается образование микроколоний, осторожно снимают с покровного стекла кусочками стерильной фильтровальной бумаги и переносят в пробирки со стерильной средой. [c.79]

Каляев (1936), перечисляя методы приготовления вакцины из фитопатогенных микроорганизмов, описывает применение культуральных жидкостей и препаратов из микроорганизмов, убитых наркозом или нагреванием. Кроме того, для иммунизации может быть использован приготовленный обычным способом бактериофаг, а также сыворотка от животных, иммунизированных микроорганизмом, патогенным для растения. [c.301]

Применение сушки методом сублимации дало возможность получить продукт весьма высокого качества. Начало этому методу положили биология и медицина [237], [250], так как для них было особенно важно сохранить жизнеспособность микроорганизмов, что никаким другим способом сушки сделать не удавалось. Например, при сушке веществ,, содержащих сложные белковые -соединения, может происходить необратимая агрегация белковых молекул. Она имеет место под воздействием концентрированных растворов солей, образующихся в материале по мере уменьшения его влажности. После такой агрегации белковых молекул, так называемой денатурации, растворимость их резко понижается. Если же сушка производится методом сублимации, то сетка льда исчезает из замороженного белкового раствора, оста-вляя молекулы белка, и солей разделенными в сухом молекулярном скелете, образующем губчатую массу, объем которой равен объему первоначально замороженной массы [70]. Вследствие этого готовый продукт чрезвычайнолегко растворяется. Так, например, раствор желатины, приготовленный в горячей воде, после сушки легко растворяется холодной водой. Полученный после сушки и расфасовки сухой продукт может храниться длительное время (по данным ИЭМ им. Гамалея, сыворотка, высушенная в ампулах, хранилась в течение 14 лет без заметной потери титра). Выпускаемые в жидком виде в ампулах лечебно-профилактические антитоксические сыворотки — противодифтерийные, противостолбнячные и т. п. — могут храниться в течение 1,5—2 лет. Если учесть большой масштаб производства сывороток для создания запаса, то становятся очевидны.ми преимущества применения процесса сушки. В ряде технологических процессов производства медицинских и биологических препаратов такой процесс является единственно возможным методом сушки и позволяет получать высококачественный сухой продукт. Большие 280 [c.280]

Пытаясь стандартизировать микробиологические препараты, приготовленные в лаборатории или собранные в поле, для использования в полевых опытах, дозировки часто устанавливали, исходя из инфекционного содержимого определенного числа больных насекомых на единицу опытной площади. Этот метод дает грубое представление о количестве распределяемого инфекционного материала и особенно пригоден для первоначального испытания чрезвычайно патогенных микроорганизмов. Однако лучший метод, который широко применялся при оценке концентраций, связан с использованием гемоцитометра для определения приблизительного числа устойчйвых форм (спор спорообразующих микроорганизмов и полиэдров вирусов) возбудителя болезней насекомых, которые содержатся в единице веса или объема. О подобном методе оценки концентрации капсул вируса гранулеза в инфекционном материале сообщали Мартиньони и Ауэр [1293], которые проводили точные определения с помощью специальной счетной камеры и фазового микроскопа. [c.464]

Подсчитать клетки микроорганизмов под микроскопом можно, используя счетные камеры, капилляры Перфильева, препараты фиксированных и окрашенных клеток, приготовленные на предметных стеклах или мембранных фильтрах. Перечисленные методы позволяют определить обихее количество клеток в единице объема. Следует помнить, что подсчитываются все клетки, как живые, так и мертвые. Основное ограничение большинства указанных методов — необходимость довольно высоких концентраций клеток в единице исследуемого субстрата. [c.117]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология