Техника гель-фильтрации

ТЕХНИКА ГЕЛЬ-ФИЛЬТРАЦИИ [c.250]

Техника хроматографии на ионообменных смолах и (или) гель-фильтрация, используемая совместно с вышеупомянутыми методами или сама по себе, позволили улучшить фракционирование и очистку альбуминовых и глобулиновых фракций. [c.153]

Эту технику нельзя, конечно, четко выделить отдельно, поскольку она зависит от набивки колонны это лишь развитие и совершенствование ранее описанных методов. Однако данный метод имеет столь большие преимущества в эффективности и в скорости разделения, что целесообразно отдельно рассмотреть области его применения. Были применены набивки для ионного обмена, адсорбции и гель-фильтрации использование всей этой техники описано Леонардом для разделения некоторых цитокининов (производных аденозина), включая их разделение ня цис- и транс-то-меры [34]. Применение в области нуклеиновых кислот находится еще в стадии становления, но со временем этому методу несомненно предназначено сыграть важную роль в разделении смесей нуклеозидов, а колонки для гель-фильтрации будут широко применяться при обессоливании элюатов нуклеозидов после ионообменной хроматографии. [c.75]

ТЕХНИКА ПРОВЕДЕНИЯ ГЕЛЬ-ФИЛЬТРАЦИИ [c.28]

Техника проведения гель-фильтрации 29 [c.29]

Техника проведения гель-фильтрации 31 [c.31]

Техника проведения гель-фильтрации [c.33]

Техника проведения гель-фильтрации 35 [c.35]

Техника проведения гель-фильтрации 41 [c.41]

Техника проведения гель-фильтрации 43 [c.43]

Техника проведения гель-фильтрации 47 [c.47]

Техника проведения гель-фильтрации 59 [c.59]

Техника Проведения гель-фильтрации 61 [c.61]

Техника проведения гель-фильтрации бз [c.63]

Техника проведения гель-фильтрации 65 [c.65]

Техника проведения гель-фильтрации 67 [c.67]

Техника проведения гель-фильтрации 69 [c.69]

Техника проведения гель-фильтраций 71 [c.71]

Техника проведения гель-фильтрации 73 [c.73]

Техника проведения гель-фильтрации 79 [c.79]

Техника проведения гель-фильтрации 85 [c.85]

Техника проведения гель-фильтрации 87 [c.87]

Техника проведения гель-фильтрации 89 [c.89]

Техника проведения гель-фильтрации 91 [c.91]

Техника проведения гель-фильтрации 93 [c.95]

За последнее время фракционную адсорбцию все чаще проводят в колонках. Колоночная техника используется в трех важнейших способах разделения белков, основанных а) на явлениях адсорбции, б) на ионном обмене и в) на эффекте молекулярного сита (гель-фильтрации). Во всех этих случаях (во множестве известных вариантов) техника выделения и высокой очистки ферментов, а также иных белков остается в принципе одинаковой. Она быстро развивается и можно полагать, что будущее перечисленных приемов очень велико. [c.150]

Техническими предшественниками анионных обменников были неорганические сорбенты, и в первую очередь гели глинозема и железа, почти одновременно предложенные немецким Пермутитовым обществом АГ (Г) и ИГ Фарбениндустри (Ь) для нейтрализации кислых вод. Для этой же цели были рекомендованы окиси и гидроокиси хрома, свинца, олова и других элементов. Особый интерес и большое техническое значение представило использование названных веществ для удаления кремневой кислоты из воды для паровых котлов. Названные вещества в виде свежеосажденных осадков (флоккулированных гидроокисями алюминия или железа) или в высокодисперсной форме (частично также при добавке магнезии) и поныне имеют значение в технике водоподготовки. Процесс фильтрации воды через зерне-ные гели таких веществ в целях удаления кремнекислоты свя зан с некоторыми трудностями, обусловленными ограниченной регенерируемостью сорбентов. [c.50]

Техника подготовки колонки и препаратов для гель-фильтрации в 6 М растворе гуанидинхлорида описана довольно подробно [Mann, Fish, 1972]. 6 M раствор гуанидинхлорида ( 50%) должен быть прозрачным. Оптическая плотность его резко увеличивается только вблизи длпны волны 225 им. Перед исиользованием раствор следует отфильтровать сперва через средний, а затем — через мелкий стеклянный фильтр и деаэрировать. [c.154]

Наверное, простейшая по типу хроматография — это хроматография, использующая пористую инертную стационарную фазу. Разделение здесь достигается на основе соответствия размера и формы молекул размеру и форме пор, В методе гельпроникающей хроматографии 39] стационарной фазой обычно служит сшитая полистирольная смола, а подвижной фазой — органический растворитель, который в практических целях пропускают через колонку под высоким давлением. Очень близок к этому методу по технике исполнения метод гель-фильтрации [40], где стационарной фазой является сшитый полиакриламид (или другой гидрофильный материал), а подвижной фазой слух<ит водный раство- [c.318]

В целом следует отметить, что техника препаративной энзимологии быстро совершенствуется и сложные операции, затруднительные в настоящее время, становятся все более доступными. Уже в ближайшем будущем тонкие и совершенные способы, такие как адсорбция, ионообменная хроматография, гель-фильтрация или электрофорез, применяемые сейчас недостаточно, широко войдут в практику. Возможно, что они вытеснят частично или полностью многие из привычных, простых способов, но это приведет к ускоренному развитию и совершенствованию производства ферментов. [c.157]

Принципы и техника электрофореза не требуют специального описания [14—16]. Обнаружение одиночного пика при двух или трех достаточно далеких значениях pH является признаком гомогенности. Применение для этой цели интерференционной онтики менее удовлетворительно, несмотря на ее высокую чувствительность, поскольку полученная кривая требует дифференцирования. Электрофоретическая подвижность зависит как от заряда молекулы, так и от гидродинамического сопротивления, причем оба эти фактора независимы. Они могут компенсироваться, давая в результате одинаковую подвижность для двух физически совершенно различных молекул, по это не может происходить при различных значениях pH. Поэтому важно проверить устойчивость гликопротеина в изучаемом интервале pH многие гликонротеины неустойчивы, особенно при высоких pH [17—19]. Полезная дополнительная информация может быть получена, если гликопротеин содержит заметные количества концевой сиаловой кислоты. В таких случаях заряд молекулы онределяется главным образом этим компонентом, и в большинстве случаев сиаловую кислоту можно почти полностью удалить с помош ью нейраминидазы. Если используемое количество фермента таково, что его можно обнаружить при последуюш,ем электрофоретическом анализе, фермент лучше сначала удалить, если это можно сделать удобным способом. Часто для этого пригодна гель-фильтрация. Молекулярный вес нейраминидазы холерного вибриона составляет около 9 -10 (Лэйвер [20]). Если после обработки нейраминидазой наблюдается два или более электрофоретически различных компонента вместо одного, наблюдавшегося перед обработкой, это значит, что материал, несмотря на его электрофоретическую гомогенность, содержит молекулы, различающиеся по химической природе остатков, от которых зависит заряд молекулы. Эта процедура может повысить степень полидисперсности, если реакция пе доведена до конца, но она не будет превращать гомогенные препараты в гетерогенные. Очевидно, важно убедиться, что используемая нейраминидаза не обладает никакой иной ферментативной активностью, особенно протеолитической. Описаны методы получения нейраминидазы необходимой чистоты [21, 22]. Проверке по этому способу был подвергнут а1-кислый гликопротеин человека [23], после обработки нейраминидазой наблюдалось два электрофоретических ника, несмотря на кажущуюся гомогенность необработанного материала в широком интервале рЬ1. [c.45]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология