Энзимология препаративная

Учение о ферментах имеет свою по меньшей мере полуторавековую историю. За это время сложились не только ясные представления о ферментах как специфических каталитических агентах, но и были достигнуты большие успехи в препаративной энзи-мологии, изучении свойств, функций и природы ферментов. Особенно важны достижения в изучении одной из самых интересных проблем энзимологии — механизма действия ферментов.. [c.164]

Внедрению энзимотерапии в клиническую медицину способствовали не только крупные достижения в области теоретической энзимологии, но, в первую очередь, успехи в разработке совершенных методов препаративного выделения высокоочищенных препаратов ферментов и их ингибиторов, пригодных для медицинских целей. В ближайшие годы с развитием методов генной инженерии, позволяющей получать белковые препараты с заданной видовой специфичностью, арсенал ферментных препаратов в клинической медицине существенно расширится. [c.321]

Высаливание. При добавлении растворов солей щелочных и щелочноземельных металлов происходит осаждение белков из раствора. Обычно белок не теряет способности растворяться вновь в воде после удаления солей методами диализа или гельхроматографии. Высаливанием белков обычно пользуются в клинической практике при анализе белков сыворотки крови и других биологических жидкостей, а также в препаративной энзимологии для предварительного осаждения и удаления балластных белков или выделения исследуемого фермента. Различные белки высаливаются из растворов при разных концентрациях нейтральных растворов сульфата аммония. Поэтому метод нашел широкое применение в клинике для разделения глобулинов (выпадают в осадок при 50% насыщении) и альбуминов (выпадают при 100% насыщении). [c.26]

Химическая концепция брожения, базирующаяся на триумфе препаративного органического синтеза, в тенденции сводила весь биокатализ к обычному химическому катализу. И несмотря на значительные упрощения в познании действительности, ее заслуги в развитии энзимологии бесспорны и велики. Именно она помогла установить многие положения, прочно вошедшие в современную энзимологию, а именно I) аналогию между биокатализом и катализом, между ферментами и катализаторами 2) положение о наличии в ферментах двух неравноценных компонентов — своего рода активных центров и носителей 3) заключение о важной роли ионов переходных металлов в активных центрах многих ферментов [c.176]

Предлагаемые в данном разделе методы имеют общий характер и используются студентами при выполнении задач последующих разделов практикума, в частности в разделе Препаративная энзимология а др [c.79]

В пособии (1-е изд.— 1979 г.) рассматриваются современные методы аналитической биохимии, основы препаративной энзимологии, методы изучения кинетики и механизмов регуляции ферментативных процессов, приемы иммобилизации ферментов и иммуноферментного анализа, а также методы, используемые при изучении метаболизма митохондрий и биоэнергетики. [c.2]

Метод нашел широкое применение в препаративной энзимологии. С помощью сефадекса можно разделить белки с разной молекулярной массой. [c.30]

Вопрос о локализации ферментов в структурных образованиях клетки (ядро, митохондрии, лизосомы и др.) является чрезвычайно важным, особенно в препаративной энзимологии, когда перед исследователем поставлена задача изолировать и вьщелить фермент в чистом виде. Сравнительно легко обнаружить локализацию фермента методами цито-и гистохимии. Для этого тонкие срезы органа инкубируют с соответствующими субстратами и после инкубации локализацию продукта реакции устанавливают добавлением подходящих реактивов до появления специфической окраски. [c.158]

В препаративной энзимологии чаще пользуются методом дифференциального центрифугирования гомогенатов тканей (рис. 4.26). Для этого сначала разрушают клеточную структуру с помощью подходящего дезинтегратора и полученную квазиоднородную (гомогенизированную) массу подвергают дифференциальному центрифугированию при температуре О—4°С. Обычно распределение ферментов изучают в последовательных индивидуальных фракциях, изолированных при дробном центрифугировании гомогенатов, в частности во фракции ядер, которую получают при низкой скорости центрифугирования, во фракции митохондрий, которая осаждается при средней скорости центрифугирования, во фракции микросом (или рибосом), для изолирования которой требуется высокая скорость центрифугирования, и, наконец, в оставшейся прозрачной надосадочной жидкости (супернатант), представляющей собой растворимую фракцию цитоплазмы. Следует отметить, что фракция митохондрий не является гомогенной, поскольку из нее удается изолировать частицы, известные как лизосомы, размер которьгх занимает промежуточное место между размерами митохондрий и микросом. В свою очередь микросомальная фракция также является гетерогенной, поскольку состоит в основном из элементов эндоплазматической сети неоднородного строения. [c.158]

Аминокислотный состав точно установлен сейчас для многих десятков ферментных белков, так как с развитием методов препаративной энзимологии (кристаллизации и иных способов очистки) их можно получать весьма чистыми и в больших количествах. Анализы показали, что ферменты по составу не отличаются от других белков и состоят только из аминокислот, если не включают в себя еще простетической группы. Каких-либо особых компонентов в них нет. Расшифровка же последовательности аминокислот в цепях — задача более сложная и пока разрешена для небольшого числа ферментов рибонуклеазы, цитохрома С, лизо-цима (мурамидазы), трипсина, химотрипсина, папаина и ряда других. В настоящее время заканчивается исследование еще ряда белков. Молекула рибонуклеазы, например, оказалась состоящей из одной полипептидной цепи, содержащей 124 аминокислотных остатка молекула химотрипсиногена, предшественника химотрипсина,— также из одной цепи с 246 остатками трипсиногена— с 229 остатками аминокислот. Тем не менее в молекуле а-химотрипсина найдены три цепи. У большинства изученных [c.72]

В целом следует отметить, что техника препаративной энзимологии быстро совершенствуется и сложные операции, затруднительные в настоящее время, становятся все более доступными. Уже в ближайшем будущем тонкие и совершенные способы, такие как адсорбция, ионообменная хроматография, гель-фильтрация или электрофорез, применяемые сейчас недостаточно, широко войдут в практику. Возможно, что они вытеснят частично или полностью многие из привычных, простых способов, но это приведет к ускоренному развитию и совершенствованию производства ферментов. [c.157]

С. Препаративная органическая химия. Природные вещества моно- и олигосахариды гликозиды алкалоиды природные красители терпены сапогенины стероиды желчные кислоты гормо-иы витамины энзимы антибиотики. Другие природные вещества. D. Макромолекулярная химия. Е. Биологическая химия. Физиология. Медицина. Е . Общая биология и биохимия. Ej. Энзимология брожение. Eg. Микробиология бактериология иммунология. Е . Химия растений физиология растений патология растений. Ej. Химия животных физиология животных патология животных. Eg. Фармакология терапия токсикология гигиена. F. Фармацевтическая химия дезинфекция. G. Анализ лаборатория. Н. Прикладная химия I. Общая химическая технология. И. Техника безопасности противопожарная защита. П1. Электротехника. IV. Вода сточные воды. V. Технология не- [c.39]

Эта работа была встречена резкой критикой, несмотря на все приведенные автором доказательства. Были выдвинуты положения об обязательной нативности изучаемых белков, о том, что само препаративное направление в энзимологии методологически бесперспективно. Указывалось, что нефизиологично выделять ферменты из клетки и что ценность представляют только те методы, которые позволяют изучать ферменты в неповрежденных клетках (б9). По-прежнему высказьшались предположения, что полученные препараты хотя, возможно, и представляют собой белки, но их ферментативная активность обусловлена лишь адсорбированной примесью. Указывалось также на то, что уреаза-не типичный фермент, в силу его чрезвычайно высокого содержания в бобах канаваллии, что и позволяло получать столь активные препараты, даже в том случае, когда фермент там присутствует лишь в виде примеси. [c.154]

С ) времени появления работы Кона [1] колоночная хроматох рафпя на дауэксе 1 играет важную роль в изучении иуклеииовых кислот как аналитический и препаративный метод. Эти методы описаны в трех статьях серии Методы в энзимологии . Однако хроматография с использованием [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология