Гликопротеины кислые

Все поверхности, на которых происходит соприкосновение живых клеток организма животных с внешней средой, покрыты толстым ( 0,5 мм) слоем слизи, главным компонентом которой являются гликопротеины. Слизь не только предохраняет клетки от механического повреждения и облегчает движение (например, движение пищи по пищеварительному тракту), но и обладает разнообразной активностью . Иммунологическая активность гликопротеинов слизи, по-видпмому, связана с нх защитной функцией. Гликопротеины слизи вырабатываются специализированными клетками железистого эпителия. Как правило, в состав слизистых выделений входят сложные смеси гликопротеинов. Только в немногих случаях удалось выделить индивидуальные гликопротеины, например муцин подчелюстной железы (см. стр. 578). В состав слизи желудка входят углеводсодержащие биополимеры по крайней мере трех групп кислые мукополисахариды, близкие или идентичные мукополисахаридам соединительной ткани, нейтральные гликопротеины, содер- [c.605]

Метод окрашивания полисахаридов перед электрофорезом [478] использовали Павленко и Оводов [479] для анализа ряда нейтральных и кислых полисахаридов с помощью электрофореза в полиакриламидном геле. Для разделения различных компонентов полидисперсных декстранов и амилопектинов с помощью диск-электрофореза ими использованы буферы, содержащие тетраборат натрия (или борную кислоту), трис(гидроксиметил)-аминометан и натриевую соль ЕВТА при pH 9,2—9,3. Электрофорез в полиакриламидном геле используют также для анализа пектиновых веществ [480] и сульфатированных полисахаридов из морских водорослей [481], однако основной областью применения данного метода в химии углеводов является исследование гликопротеинов [482] и гликозаминогликанов (483, 484]. В по- [c.75]

От обычных белков, состоящих исключительно из протеиногенных аминокислот, следует отличать сложные белки, называемые также конъюгированными белками или протеидами. Это вещества, содержащие помимо белковой части небелковый органический или неорганический компонент, необходимый для функционирования, могущий быть связанным с полипептидной цепью ковалентно, гетерополярно или координационно и вместе с аминокислотами присутствующий в гидролизате. Важнейшие представители сложных белков гликопроТеины (простетическая группа — нейтральные сахара (галактоза, манноза, фукоза), аминосахара (N-aцeтилглюкoзa-мин, N-aцeтилгaлaктoэaмин) или кислые производные моносахаридов (уро-новые или сиаловые кислоты)), липопротеины, содержащие триглицериды, фосфолипиды и холестерин, металлопротеины с ионом металла, связанным ионной или координационной связью, фосфопротеины, связанные эфирной связью через остаток серина или треонина с фосфорной кислотой, нуклеопротеины, ассоциирующиеся с нуклеиновыми кислотами в рибосомах или вирусах, а также хромопротеины, содержащие в качестве просте-тической группы окрашенный компонент. Обзор структур важнейших белков см. в разд. 3.8. [c.345]

Еще одну группу структурных и защитных полисахаридов составляют гли-козаминогликаны, или кислые мукополи-сахариды. Обычно они присоединяются к белкам, образуя протеогликаны (рис. 11-24), т.е. такие состоящие из полисахаридов и белков соединения, в которых на долю полисахарида приходится основная часть молекулы-обычно более 95%. В отличие от протеогликанов в гликопротеинах, также состоящих из полисахаридов и белков, ббльшую часть молекулы составляет белковая часть. [c.320]

МН 2/618, 777 3/1078 4/1099 Я 3/386 5Н 2/777 51Н 2/777 Т 3/381 Кислые соединения. гликопротеин 1/1139 глины 2/679 гудрон 1/1212 [c.625]

Кислый ai-гликопротеин, экстензии [c.264]

Несмотря на то что белки вызывают большой интерес как потенциальные ХНФ, помимо альбумина в настоящее время исследован еще только один белок — протеин плазмы крови человека, так называемый кислый а -гликопротеин (АГП) или орозомукоид, присутствующий в плазме в концентрации 55—140 мг на 100 мл. Установлено, что АГП — основной белок в организме человека, способный связывать катионы [93]. [c.137]

Термин гликопротеин часто используют для обозначения любого соединения, содержащего углеводную и белковую части, в том числе для гликопротеинов, протеогликанов и углевод-белко-вых комплексов. Гликопротеины содержат белковую цепь, состоящую из 300 и более остатков природных -а-аминокислот. С основной белковой цепью ковалентно связаны боковые углеводные Цепи, являющиеся остатками гетероолигосахаридов. Они обычно разветвлены (см. рис. 26.3.2) и могут содержать нейтральные моносахариды (Л-глюкозу, Л-галактозу, Л-маннозу, -фукозу), сновные (2-амино-2-дезокси-Л-глюкозу, 2-амино-2-дезокси-Л-га-актозу) и кислые (б-амино-З.б-дидезокси-Л-глицеро- -гала/сго- [c.215]

Сиаловые кислоты чрезвычайно широко распространены в при роде. Они входят в состав различных органов и тканей животных встречаются в микроорганизмах и, по-видимому, в растениях В свободном виде сиаловые кислоты присутствуют в спинномозговой жидкости слизистой оболочке желудка щитовидной железе а также в икре некоторых видов рыб . Сиаловые кислоты входят в состав олигосахари-дов молока (см. стр. 423), ганглиозидов (см. стр. 588), ряда гликопротеинов (см. гл. 21), в том числе муцинов из подчелюстной железы различных видов животных гликопротеинов кожи фетуина кислого [c.332]

Из а,-глобулиновой фракции при фракционировании растворами сульфата аммония или спиртом выделен кислый гликопротеин, названный а -мукопротеином или орозомукоидом. Он имеет молекулярный вес около 44 ООО и содержит примерно 16% нейтральных сахаров (галактоза, [c.576]

Хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе использована для фракционирования пектиновых веществ [5, 8—И] и полисахаридов почвы [12], для отделения кислых полисахаридов от глюкоманнанов [13] и для фракционирования пентогликанов и гликопротеинов пшеничной муки [14, 15]. Различные гликопротеины сыворотки также были подвергнуты фракционированию на колонках с ДЭАЭ-целлюлозой [16—19], а мукополисахариды (гепарин, хондроитинсерная и гиалуроновая кислоты) были разделены хроматографированием на ЭКТЕОЛА-целлюлозе [6, [c.269]

Калиевую соль хоидроитинсульфата можно получить из гликопротеина PP-L (см. стр. 343), выделяемого из носового хряща быка под действием едкого кали [3]. Метанольный 0,06 М раствор хлористого водорода получают при пропускании сухого хлористого водорода в метанол концентрацию раствора доводят до нужной после титрования образца. Можно также прибавить 5 мл хлористого ацетила к 1000 мл метанола и оставить раствор стоять на несколько часов. Тонко измельченную, тщательно высушенную калиевую соль хоидроитинсульфата (5,0 г) и 1000 мл кислого метанольного раствора встряхивают в течение 1 дня, после чего смесь центрифугируют и прозрачный раствор отбрасывают, а остаток обрабатывают таким же образом еще 2 раза. Полученный в результате совершенно белый осадок растворяют в 100 мл воды, затем осаждают, прибавляя 600 мл спирта, отделяют от раствора центрифугированием. Выделенный продукт промывают в центрифужном стакане спиртом и эфиром и сушат в вакууме. Выход продукта, представляющего собой метиловый эфир хондроити-на, 2,8 г. [c.346]

Известен ряд методов определения муравьиной кислоты, образующейся при периодатном окислении. На страницах этой серии сборни-ников рассматривались методы, включающие а) прямое > титрование муравьиной кислоты щелочами [2—4] б) титрование иода, выделяющегося из смеси иодида и иодата [3, 5] в) манометрическое определение углекислого газа, образующегося при разложении бикарбонат-ного буферного раствора [6]. Перечисленные методы не пригодны для определения содержания муравьиной кислоты в интервале О—5 мкмоль в ряде случаев ввиду того, что все эти методы основаны на измерении кислотности среды. На результатах анализа сказывается присутствие любых кислых продуктов и pH раствора, в котором проводится окисление. Кроме того, результат анализа зависит от наличия в биополимере (например, гликопротеине) кислотных групп. Этот фактор устраняют, проводя в тех же условиях холостой опыт биополимер обраба- [c.78]

В состав желудочного сока входят вода, белки, ферменты (пепсин, гастриксин, липаза), муцин, НС1, Na l, кислые фосфаты, гормон — гастрин, гликопротеин,— внутренний фактор Кастла. Соляная кислота, вырабатываемая обкладочными клетками, выполняет функцию активации пепсиногена в пепсин, денатурирует пищевые белки, способствует набуханию пищевого комка, оказывает бактерицидное действие, обеспечивает усвоение железа, активирует выработку секретина и внутреннего фактора Кастла. [c.251]

Принципы и техника электрофореза не требуют специального описания [14—16]. Обнаружение одиночного пика при двух или трех достаточно далеких значениях pH является признаком гомогенности. Применение для этой цели интерференционной онтики менее удовлетворительно, несмотря на ее высокую чувствительность, поскольку полученная кривая требует дифференцирования. Электрофоретическая подвижность зависит как от заряда молекулы, так и от гидродинамического сопротивления, причем оба эти фактора независимы. Они могут компенсироваться, давая в результате одинаковую подвижность для двух физически совершенно различных молекул, по это не может происходить при различных значениях pH. Поэтому важно проверить устойчивость гликопротеина в изучаемом интервале pH многие гликонротеины неустойчивы, особенно при высоких pH [17—19]. Полезная дополнительная информация может быть получена, если гликопротеин содержит заметные количества концевой сиаловой кислоты. В таких случаях заряд молекулы онределяется главным образом этим компонентом, и в большинстве случаев сиаловую кислоту можно почти полностью удалить с помош ью нейраминидазы. Если используемое количество фермента таково, что его можно обнаружить при последуюш,ем электрофоретическом анализе, фермент лучше сначала удалить, если это можно сделать удобным способом. Часто для этого пригодна гель-фильтрация. Молекулярный вес нейраминидазы холерного вибриона составляет около 9 -10 (Лэйвер [20]). Если после обработки нейраминидазой наблюдается два или более электрофоретически различных компонента вместо одного, наблюдавшегося перед обработкой, это значит, что материал, несмотря на его электрофоретическую гомогенность, содержит молекулы, различающиеся по химической природе остатков, от которых зависит заряд молекулы. Эта процедура может повысить степень полидисперсности, если реакция пе доведена до конца, но она не будет превращать гомогенные препараты в гетерогенные. Очевидно, важно убедиться, что используемая нейраминидаза не обладает никакой иной ферментативной активностью, особенно протеолитической. Описаны методы получения нейраминидазы необходимой чистоты [21, 22]. Проверке по этому способу был подвергнут а1-кислый гликопротеин человека [23], после обработки нейраминидазой наблюдалось два электрофоретических ника, несмотря на кажущуюся гомогенность необработанного материала в широком интервале рЬ1. [c.45]

При применении этого метода наносят очень небольшие количества концентрированного раствора исследуемого препарата на старт в виде узкой полосы. В результате электрофореза (может быть приложена весьма высокая разность потенциалов, поскольку в геле подавляются конвекционные токи) смесь будет разделяться на ряд зон, что позволяет получить более высокое разрешение, чем при работе по методу свободной границы. Более того, можно варьировать средний размер пор и распределение пор по размерам для некоторых поддерживаюш,их сред (крахмал, агар, полиакриламид) таким образом, что действие одного из факторов, влияюш их на электрофоретическую подвижность, а именно гидродинамического сопротивления, будет столь велико, что часть молекул будет практически неподвижной [30]. Электрофоретические подвижности в гелях или на бумаге нельзя непосредственно сравнивать с электрофоретическими подвижностями, измеренными методом свободной границы, кроме тех случаев, когда рассматриваемые молекулы малы по сравнению с размерами пор в поддерживающей среде. Компактные белки с молекулярным весом вплоть до 50 ООО легко диффундируют в 5%-ном полиакриламидном геле, и даже с веществами большего молекулярного веса можно получить хорошие результаты. Бумагу или гелевый блок нужно окрасить, чтобы показать положение различных компонентов можно также сделать перенос на подходящим образом вырезанный кусок фильтровальной бумаги, хотя эта методика часто малочувствительна. Обычные красители, применяемые для обнаружения белков (нигрозин, амидовый черный), дают удовлетворительные результаты для многих гликонротеинов, но некоторые эпителиальные вещества, которые могут представлять собой по существу углеводы (до 90%), окрашиваются довольно плохо. Было найдено, что для кислых гликонротеинов лучше применять толуидиновый голубой [32] или муцикармин [33], а алциановый голубой окрашивает как кислые, так и нейтральные гликопротеины [34]. Наиболее общей методикой окрашивания является, по опыту автора, методика Райдона и Смита [35] (хлорирование и обработка смесью крахмала и иодистого калия), но она неприменима на полиакриламидных гелях. [c.47]

Прежде чем анализировать гидролизованный гликопротеин, обычно необходимо удалить избыток кислоты. Соляная кислота легко удаляется при упаривании, но надо избегать условий, в которых происходят потери аминокислот за счет реакции с продуктами расщепления углеводов. Упаривание нужно проводить быстрее и при возможно более низкой температуре. Необходимо также поддерживать в процессе упаривания достаточно кислую реакцию раствора во избежание реакции Майяра (см. стр. 105 и сл.), которая происходит в нейтральных или очень слабокислых средах. По-видимому, при упаривании соляной кислоты в вакууме pH гидролизатов не превышает 3, если не было добавлено щелочи. [c.135]

Эти значения устойчивости чистых сахаров в горячих минеральных кислотах могут дать лишь весьма приближенное представление об их устойчивости в процессе гидролиза гликопротеинов, что объясняется несколькими причинами. Во-первых, происходит катализируемая кислотами реакция между свободными сахарами и такими аминокислотами, как триптофан, цистин, цистеин и метионин, ведущая к предпочтительному расщеплению этих аминокислот [8, 9] (см. также гл. 5). Однако имеется мало сведений о расщеплении в горячем кислом растворе сахаров в присутствии этих аминокислот известно, что цистеин повышает скорость деструкции маннозы [7, 10]. Некоторые поправки на исчезновение сахара можно ввести с помощью модельных экспериментов, в которых измеряют деструкцию, нагревая смеси, содержащие исследуемый сахар и аминокислоты, аналогичные тем, которые присутствуют в гидролизате изучаемого гликонротеина. Другим приемом является прибавление изотопно меченного сахара к гликопротеину перед гидролизом, выделение сахара или его производного и вычисление количества, присутствовавшего в гликопротеине, из данных изотопного разбавления [7]. Во-вторых, восстанавливающая группа моносахарида в условиях кислотного катализа может реагировать с первичной или даже со вторичными гидроксильными группами другой молекулы сахара, давая ди- или олигосахариды эта реакция называется кислотной реверсией [И, 12]. Такого рода бимолекулярные побочные реакции можно в значительной степени устранить, проводя гидролиз при низкой концентрации вещества. Однако таким способом нельзя избежать другого возмоншого источника ошибок. Сахар может предпочтительно освобождаться в виде переходного оксониевого или карбониевого иона, который, вероятно, будет легко взаимодействовать с реак- [c.196]

В тех гликопротеинах, где углевод-пептидная связь осуществляется через остатки серина и (или) треонина, аминокислотные остатки, включенные в эту связь, могут быть обнаружены методом, основанным на характерной реакции -элиминирования (см. стр. 289), которая наблюдается при обработке гликонротеинов и гликопентидов в мягких щелочных условиях. Механизм р-элиминирования обсуждается более полно на стр. 291 и сл. Если провести аминокислотный анализ кислого гидролизата гликопротеина до и после обработки гликонротеина щелочью, то значительное уменьшение количеств серина и (или) треонина, вызываемое щелочной обработкой, может рассматриваться как хороший довод в пользу участия остатков одной или обеих аминокислот в углевод-пептидной связи. Более того, а-аминоакриловая или а-аминокротоновая кислоты, образующиеся из связанных О-гликозидноп связью остатков серина и треонина соответственно, могут быть восстановлены водородом в присутствии платины на угле [21] или борогидридом [22] до соответствующих насыщенных а-аминокислот. Образовавшиеся непредельные а-аминокислоты могут быть также превращены с помощью сульфита в цистеиновую кислоту (из серина) или соответствующее производное треонина [19] можно измерить, кроме того, характерное поглощение непредельных аминокислот в УФ-свете [20]. [c.279]

Интересно, что во всех до сих пор изученных гликопротеинах моносахаридом, через который осуществлялась связь, неизменно оказывался N-aцeтил-D-гeк oзaмин. Это справедливо для яичного альбумина [4, 9, 23, 24], овомукоида [10, 25], ai-кислого гликонротеина плазмы крови человека [12], у-глобулина человека [26, 27], гликонротеинов подчелюстных желез овцы и быка [28, 29]. В гликопротеинах яичного белка и плазмы моносахаридом, через который осуществляется связь, служит К-ацетил-в-глюкозамин, в гликопротеине подчелюстных желез — К-ацетил-в-галактозамин. Однако полученных данных еще недостаточно для достоверных обобщений. Так, имеются сообщения [30—32], что в хондроитин-4-сульфате и гепарине связь между полисахаридом и пептидом осуществляется через ксилозу. [c.280]

Второй том монографии Гликопротеины , изданной под редакцией Готтшалка, посвящен физическим, химическим и биологическим свойствам важнейших классов гликопротеинов. В нем подробно охарактеризованы такие вещества, как казеин и яичный альбумин, сывороточные глобулины (фетуин, ai-кислый гликопротеин, трансферрин, гаптоглобин, иммуноглобулины и т. д.), гликопротеины мочи, щитовидной железы, подчелюстных же.пез и многие другие. [c.5]

Определение обш его количества нейтральных сахаров в овомукоиде обработкой гликопротеина орцином или антроном в присутствии высококонцентрированной минеральной кислоты обычно дает приблизительно 8—10%. Однако при определении свободных гексоз в кислом гидролизате овомукоида получали значительно меньшую величину (например, 7% [37] 5,7% [38] 5,7% [21]). Очень маловероятно, что величины, полученные при применении орцина или антрона, при исследовании овальбумина являются завышенными. Если приведенная выше величина верна для овомукоида, расхождение может быть обусловлено потерей нейтрального сахара даже при сравнительно мягком кислотном гидролизе гликопротеина. Такая потеря может быть результатом разрушения выделенного сахара или, что более вероятно, захвата нейтральных сахаров дезацетилированпыми гексо-заминами ([38] см. также том 1, гл. 8). При работе с овомукоидом могут иметь место ошибки последнего типа, что объясняется сравнительно высоким отношением в его молекуле количества гексозаминов к гексозам (около [c.31]

В последнем десятилетии XIX века было обнаружено, что в крови имеются вещества, содержащие углеводный остаток, химически связанный с белком. Первые попытки исследования химической структуры этих веществ связаны с именами Бьерри, Хьюитта, Римингтона и др. После второй мировой войны интерес к изучению этой проблемы резко возрос. Это было обусловлено в основном успехами в разработке методов фракционирования и идентификации белков. Усовершенствование методов очистки белков заставило химиков многократно повторять уже проведенные опыты со все более и более чистыми препаратами. Некоторые гликопротеины, исследованные в период 1920—1940 гг., например серомукоид, имели степень очистки, по современным представлениям составляющую 60—70%. Однако многие соединения, которые рассматривались в то время как одно или два вещества, впоследствии были разделены на большое число хорошо изученных гликопротеинов. Вещество, описываемое в этой главе, — а -кислый гликопротеин плазмы человека, рассматривается нами как индивидуальный белок. Однако недавно были получены сообщения о возможности дальнейшего разделения его на несколько компонентов, причем нельзя с уверенностью сказать, что каждый из этих компонентов является гомогенным по химической структуре. Следовательно, изучение физических и химических свойств вещества, которое доступно нам в настоящее время, дает возможность получить представление только о некоторой модельной молекуле с усредненной структурой. [c.67]

Смотреть страницы где упоминается термин Гликопротеины кислые: [c.353] [c.9] [c.556] [c.268] [c.277] [c.299] [c.606] [c.105] [c.79] [c.49] [c.171] [c.197] [c.199] [c.76] [c.459] [c.29] [c.30] [c.48] [c.48] [c.116] [c.165] [c.186] [c.202] [c.212] [c.278]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология