Гликопротеиды, окрашивание

Иммуноэлектрофорез сыграл существенную роль в развитии исследований сывороточных белков. В свое время свободный и зональный электрофорезы позволили проанализировать сравнительно небольшое число индивидуальных белков сыворотки. За исключением 5 классических белков, выявляемых в свободном и зональном электрофорезе, остальные фракции сыворотки не всегда легко поддаются идентификации. Поэтому специальные виды зонального электрофореза с более высокой разрешающей способностью, чем простой электрофорез на бумаге, так и не вошли в повседневную практику клинических лабораторий, сохранив свое значение главным образом для научных исследований. Определение процентного содержания альбумина, а-, р- и у-глобулинов нередко помогает поставить верный клинический диагноз, но мы должны помнить о том, что фракции белков, гомогенные в зональном электрофорезе, могут включать разные белки, образующие одну фракцию только благодаря сходной электрофоретической подвижности. Об этом свидетельствует также окрашивание липо- и гликопротеидов. [c.20]

Различные методики окрашивания фиксированных нагреванием электрофореграмм позволяют не только выявить, но и количественно измерить различные белковые фракции. Кроме методик окрашивания белка, существуют также способы окрашивания липидных и углеводных компонентов липопротеидов и гликопротеидов. [c.54]

Сывороточные гликопротеиды выявляются толуидиновым синим, который дает с ними метахроматическое окрашивание, или в цветной реакции с йодной кислотой и реактивом Шиффа (ШИК-реакция). [c.58]

ОКРАШИВАНИЕ ГЛИКОПРОТЕИДОВ ТОЛУИДИНОВЫМ СИНИМ [2] [c.58]

ОКРАШИВАНИЕ ГЛИКОПРОТЕИДОВ ЙОДНОЙ КИСЛОТОЙ — РЕАКТИВОМ [c.59]

После электрофоретического разделения белковые фракции можно фиксировать в поддерживающей среде и выявить с помощью специфического окрашивания. Среди многочисленных методов окрашивания особое значение в клинических исследованиях приобрели способы выявления связанных с белками липидных и углеводных компонентов. Благодаря простоте этих методов анализ липо-протеидов и гликопротеидов стал обычным в повседневной клинической практике. Он приобрел большое значение в диагностике некоторых заболеваний, а это позволило значительно продвинуться в выяснении их патогенеза. Специальные методы окрашивания помогают также обнаружить трансферрин, гаптоглобин, церуло-плазмин и другие компоненты сыворотки. [c.11]

С помощью специфического окрашивания на бумаге установлено, что в а- и р-глобулиновых фракциях содержатся линонро-теиды и гликопротеиды с помощью радиоактивно меченных железа, меди и некоторых других металлов установлено, что последние связаны в крови преимущественно с белками этих фракций. Все это указывает на рол а- и -глобулинов как агентов, транспортирующих жиры, углеводы, металлы и т. д. К наиболее исследованным гликопротеидам крови относятся трансферрин — белок, переносящий железо, гаптоглобин — белок, способный специфически связываться с гемоглобином, и целый ряд других, для которых разработаны специальные методы анализа. Большое число исследований посвящено также и липопротеидам. [c.101]

Для количественного определения положение зон можно установить до окрашивания по поглощению в ультрафиолетовой части спектра, а затем вырезать соответствующие участки бумаги для элюирования. Опубликовано много отличных прописей для прямой фотометрии полос бумаги, особенно в применении к рутинным клиническим и диагностическим исследованиям. Для окрашивания липопротеидов применяют красители судан черный, масляный красный О и масляный синий N. Их используют в виде насыщенных растворов в 60%-ном (по объему) этаноле. Время окрашивания равно 4—12 час. Гликопротеиды легко можно обнаружить при помощи кипящего раствора дефениламина в уксусной кислоте [11]. [c.251]

Гликопротеиды можно выявить путем окрашивания как белковой, так и углеводной части молекулы. Для обнаружения гликопротеидов после электрофореза используют такие белковые красители, как амидовый черный 10 В i[473], быстрый зеленый 883] или кумасси яркий синий R-250 [839]. Методы, основанные на реакциях углеводной части молекулы, обсуждаются в последующих разделах. [c.277]

Захариус и др. [1477] предложили метод с применением йодной кислоты и реактива Шиффа. В присутствии ДСН некоторые белки, не содержащие углеводов, также выявляются данным методом. [442, 1163]. Поэтому была предложена модифицированная методика, позволяющая проводить специфическое окрашивание гликопротеидов даже в присутствии ДСН i[1163]. [c.277]

Церулоплазмин (система Ср). Показано, что переносящий медь гликопротеид плазмы также существует в нескольких формах, обладающих различной электрофоретической подвижностью. Вариантные фенотипы довольно часто встречаются в популяциях негроидов и очень редко у европеоидов. Шреффлер и др. [1146] применяли для определения фенотипа церулоплаз-мина горизонтальный электрофорез в крахмальном геле с бо-ратным буфером (pH 9,5). Образцы сыворотки в разведении 1 3 (по объему) подвергали электрофорезу при 4 °С и напряжении 7 В/см. Для окрашивания церулоплазмина может быть использована его оксидазная активность. Шреффлер и др. [1146] окрашивали церулоплазмин 0,1%-ным раствором о-дианизидина в 0,04 М ацетатном буфере (pH 5,5), содержащим 20% этанола. Фрагменты геля инкубируют в этом растворе [c.340]

Более вероятно, что изменение состава гликопротеидов в клетках RF- EM происходит скорее вследствие увеличения интенсивности гликозилирования, чем за счет повышения содержания белка, так как различия между лекарственно устойчивыми и чувствительными клетками не были обнаружены путем включения Н-лейципа в белки или окрашивания геля кумасси голубым. [c.104]

Различить ДНК и РНК, находящиеся в одном геле, можно с помощью красителя Stains-all , применение которого для окрашивания белков и гликопротеидов было описано в предыдущей главе. Там же были приведены рабочие концентрации этого красителя и условия окрашивания. [c.151]

Электрофорез используется для разделения молекул, несущих суммарный заряд. Низковольтный электрофорез на бумаге нашел широкое применение для разделения аминокислот, пептидов, белков, нуклеотидов, нуклеиновых кислот и заряженных производных углеводов. Однако при низковольтном электрофорезе на бумаге имеет место значительная диффузия малых молекул, поэтому для их разделения применяют, как правило, высоковольтный электрофорез, при котором время разделения сводится до минимума и вследствие этого уменьшается диффузия. Вместо бумаги в качестве носителя зачастую используют ацетат целлюлозы, высокая чистота которого обусловливает уменьшение адсорбции образца, а следовательно, и лучшее разделение его компонентов. Одним из преимуществ ацетата целлюлозы является также его слабое фоновое окрашивание, что облегчает выявление соединений после рааделе-ния. Электрофорез на ацетате целлюлозы нашел широкое применение в клинике для разделения белков сыворотки крови (включая гликопротеиды и липопротеиды) и гемоглобинов он применяется также при иммуноэлектрофорезе. Высоковольтный электрофорез, как бумажный, так и тонкослойный, используется для разделения аминокислот, концентрация которых в плазме крови и моче при различных нарушениях обмена может быть довольно высокой. Особенно велика ценность тонкослойного электрофореза при разделении малых молекул, таких, как аминокислоты и нуклеотиды, поскольку [c.136]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология