Лекарственная устойчивость

Для преодоления множественной лекарственной устойчивости возбудителей осуществляется постоянный поиск новых антибиотиков, проводится химическая модификация известных молекул и выяснение путей подавления транспортных систем экскреции лекарственных веществ. [c.85]

Приведите классификацию антимикробных агентов. Назовите причины возникновения среди микроорганизмов множественной лекарственной устойчивости. [c.85]

Человечество научилось успешно бороться со многими инфекционными заболеваниями, однако микроорганизмы также видоизменяются под действием факторов окружающей среды и под прессингом лечебных препаратов. Возникла множественная лекарственная устойчивость, и многие побежденные болезнетворные микробы появились вновь в другой, более опасной форме (при- [c.307]

Осложнения со стороны микроорганизма проявляются развитием лекарственной устойчивости. В ее основе лежат мутации хромосомных генов или приобретение плазмид устойчивости. Существуют роды микроорганизмов, обладающие природной устойчивостью. [c.43]

Методы борьбы с лекарственной устойчивостью [c.44]

Многочисленный опыт клинической практики последних лет свидетельствует о весьма настораживающем факте, с которым практическая ветеринария сталкивается ежегодно, это увеличивающиеся случаи неэффективной терапии антибиотиками многочисленных заболеваний, в этиологии и патогенезе которых явное участие принимает условно-пато-генная микрофлора. Ярким примером этому служит увеличение случаев заболевания кокковой инфекцией, занимающей основное место по распространенности, опережая все вместе взятые заразные болезни людей и животных. В клинической практике все чаще встречаются случаи, когда даже самые сильно действующие антибиотики не могут преодолеть лекарственную устойчивость микроорганизмов, что ставит перед ветеринарами трудную задачу выбора препаратов при тяжело поддающихся лечению заболеваниях инфекционной этиологии. [c.246]

Некоторые транспозоны (помимо генов, связанных с транспозицией) несут маркеры лекарственной устойчивости (или какие-либо другие). Такие транспозоны обозначаются как Тп с добавлением соответствующего номера. Один класс более крупных транспозонов представлен сложными элементами, состоящими из центральной области, несущей маркер лекарственной устойчивости, и фланкирующих с каждой стороны родственных последовательностей (плеч). Их иногда называют длинными концевыми повторами (LTR). (Не следует путать с короткими инвертированными концевыми повторами у IS-эле-ментов.) Плечи могут либо иметь одну и ту же или (более часто) инвертированную ориентацию. Таким образом, сложный транспозон с плечами, представленными прямыми повторами, имеет структуру [c.461]

Рис, 36.3. Сложные транспозоны имеют центральную область, несущую маркеры, не связанные с транспозицией (например, ген лекарственной устойчивости). Центральная область фланкирована 18-модулями. Модули имеют короткие инвертированные концевые повторы. Если модули находятся в инвертированной ориентации относительно друг друга (как показано на рисунке), короткие инвертированные повторы на концах транспозона являются идентичными. [c.461]

Здесь ограничимся тем, что напомним об эписомах бактерий (гл. 9) — элементах бактериального генома, которые могут существовать в интегрированном с хромосомой и в свободном состоянии. О них было рассказано на примерах f-фактора Е. соИ, факторов лекарственной устойчивости и умеренных бактериофагов в состоянии профага. Таким образом, сходные элементы существуют и в геномах эукариот. Во многих случаях показано не только сходство, но и тождество первичной структуры экстрахромосомных и хромосомных элементов. Так, в частности, уже упоминавшаяся двунитевая РНК штаммов-убийц у дрожжей имеет комплементарные последовательности в геноме. У того же объекта Р. Планта и В. Л. Ларионов описали кольцевую плазмиду с контурной длиной 3 мкм (9000 п. н.) — копию генов XII хромосомы, кодирующих рибосомную РНК. У дрозофилы обнаружены свободные кольцевые формы некоторых МДГ. [c.252]

В последние годы в практике стали применять ПЦР для выявления у микробов специфических генов, ответственных за формирование лекарственной устойчивости (геноиндикация антибиотикоустойчивых культур). [c.46]

ПЦР. Использование ПЦР позволяет быстро выявить М. tuber ulosis как при туберкулезе органов дыхания, так и при внелегоч-ных формах (туберкулезный менингит, туберкулез кожи, кишечника и др.), в том числе у больных СПИДом. При высокой чувствительности метода (10— 1000 клеток в пробе) имеется возможность быстро выявлять штаммы М. tuber ulosis с множественной лекарственной устойчивостью. Методом ПЦР контролируют также эффективность лечения больных туберкулезом. При использовании нескольких образцов исследуемого материала от каждого пациента чувствительность ПЦР достигает 100 %, специфичность — 99,8 — 100%, что значительно выше, чем у других методов диагностики. [c.215]

ПЦР. Разработаны методы генодиагностики малярии с помощью обычной и гнездной ПЦР, причем для вьщеления ДНК возбудителя могут использоваться препараты крови толстая капля , ранее окрещенные по Романовскому —Гимзе. Кроме того, гнезд-ный вариант ПЦР позволяет дифференцировать рецидив лекарственно-устойчивой малярии и реинфекцию. Высокая чувствительность ПЦР-анализа способствует более эффективному выявлению лиц, зараженных малярией, предупреждает гипо- и гипердиагностику инфекции. [c.356]

Внехромосомные элементы наследственности — плазмиды, контролирующие лекарственную устойчивость у многих стафилоккоков, передаются не при конъюгации, а с помощью фагов (трансдукция) они всегда существуют отдельно от хромосомы, т. е. автономно. [c.88]

Еще одно противотуберкулезное средство — пиразинамид (36), тоже очень похожее по химической структуре на изониазид, получают из хиноксалина. Туберкулезные палочки быстро приобретают лекарственную устойчивость, и для борьбы с этим явлением часто применяют комбинированную терапию , т. е. смесь лекарств. Так, антибиотик стрептомицин (37) (т. 4, [c.414]

Антимикробная активность исследованных соединений не зависит от лекарственной устойчивости подопытных микробов. В частности, стафилококки, шигеллы и сальмонеллы, обладающие эписомной устойчивостью к 5—8 антибиотикам, в такой же мере чувствительны к препаратам, как н аитибиотпкочув-ствительные штаммы. [c.154]

Держивается в росте (лучшие результаты получаются, когда растения находятся в фазе розетки и в начале формирования цветушего побега) щавель широколистный, крестовник луговой и одуванчик лекарственный — устойчивы к 2М-4ХМ. [c.85]

Существует много различных космидных векторов (см. Маниатис и др. [3], Пауэле и др. [4]). Наиболее важное значение из их свойств имеют лекарственная устойчивость, характер реп-ликона и наличие подходящих сайтов рестрикции. Рассмотрим их по порядку. [c.41]

Некоторые космиды несут кроме прокариотических маркеров лекарственной устойчивости гены,, обеспечивающие селекцию эукариотических клеток. Наиболее удобные из них — это гены тимидинкиназы и устойчивости к антибиотику G418 [4] но в принципе можно использовать и некоторые другие. Наличие селектированного маркера, облегчающего введение ДНК в эукариотические клетки, может служить решающим критерием при выборе вектора. Описаны подходы, предполагающие спасение космидной ДНК в подобных экспериментах, что часто требует определенных комбинаций детерминант устойчивости [5]. [c.42]

В основе метода лежит использование двух векторов — одного космидного, а другого плазмидного, не имеющих областей взаимной гомологии и различающихся по маркерам лекарственной устойчивости, например, Кт и Ар Оба вектора способны временно поддерживаться в гес+-окружении в штаммах для упаковки in vivo (разд. 2.2.8.5), причем клетки содержат обе эписомы. [c.62]

Индукция профага приводит к упаковке космиды Кт , но не плазмиды Ар Однако если между фрагментами ДНК, клонированными в космиде и в плазмиде, имеется гомология, то между гомологичными последовательностями может с частотой 10 произойти рекомбинация, в результате которой оба вектора объединяются в одну крупную кольцевую космиду. Только в этом случае упаковка обеспечит возможность трансдукции обоих маркеров Д /п и Лр . Поэтому для клонирования какого-либо гена достаточно лишь вставить небольшой фрагмент его ДНК в плазмиду-зонд, содержащуюся в линии хелперных клеток, суперинфицировать их космидной библиотекой (упакованной, как указано в разд. 2.2.8.5), индуцировать профаг в хелперных клетках и высеять их на чашки с Km и Ар. Колонии с двойной лекарственной устойчивостью должны в принципе содержать ген, клонированный в космиде, в которую интегрировала плаз-мида-зонд. [c.62]

Принцип метода схематически показан на рис. 3.2. Космидные библиотеки, сконструированные в гесЛ -клетке, упаковывают в Я-частицы, чтобы получить лизат с высоким титром трансдуцирующих частиц. Аликвоты упакованной библиотеки используют затем для заражения гес+-клеток, в которые предварительно введена последовательность (или последовательности) -зонд, клонированная в плазмиде, не имеющей гомологии с космидным вектором. Через 30 мин — 2 ч, в течение которых должна произойти рекомбинация, космиды вновь упаковывают в фаговые частицы. Упакованные космиды используют для заражения гесЛ -хозяина, проводя селекцию по обоим маркерам лекарственной устойчивости — плазмидному и космидному. Поскольку плазмида не несет os-последовательностей, она будет перенесена в реципиентные клетки только в случае рекомбинации с гомологичной последовательностью в космидном клоне. Для того чтобы восстановить исходную космиду, можно вновь разделить два клопа в результате второго рекомбинационного события и после переноса в нового хозяина идентифицировать ревертантов на индикаторных чашках. Как будет сказано ниже, точное восстановление, однако, не всегда возможно (или желательно). [c.78]

Векторы, несущие ген dhfr, имеют то преимущество, что провирусные последовательности можно подвергнуть амплификации путем метотрексатной селекции это позволяет повысить уровень экспрессии и титр вирусных препаратов [21]. Тем пе менее наибольшее распространение в качестве доминантных маркеров получили гены, обеспечивающие селективную лекарственную устойчивость — такие, как neo или hgr. Это объясняется тем, что они хорошо сочетаются со многими клеточными типами и не требуют специальной среды для селекции. Во всех известных конструкциях векторов для спаренных генов ген, расположенный ближе к 5 -LTR, экспрессируется в составе геномного вирусного РНК-транскрипта. Для обеспечения экспрессии более удаленного гена применяют два разных методических приема это либо экспрессия в составе отдельной субгеномной РНК, образующейся в результате сплайсинга вирусной РНК, либо использование внутреннего промотора, введенного в состав вектора. [c.281]

Основные белки, протамины, гистоныи некоторые другие биологически активные соединения (этилендиамин-тетраацетат, лизоцим) при совместном применении с антибиотиками (стрептомицином, хлорамфениколом, тетрациклином, эритромицином) способны повышать чувствительность штаммов Е. oli, S. aureus к антибиотическим веществам и ингибировать передачу лекарственной устойчивости при конъюгации. [c.461]

С появлением методологии генной инженерии метод локализованного мутагенеза становится доступным для широкого круга микроорганизмов. В наиболее простом варианте клонированный фрагмент ДНК, ограниченный удобными сайтами рестрикции, может быть выделен и подвергнут мутагенезу in vitro. Вследствие проведения реакции in vitro дозы мутагена могут быть достаточно высокими, что сильно повышает частоту мутагенеза. Такой подход использован при создании штамма-продуцента гомосерина (см. гл. 4). Для получения стабильных неревер-тирующих мутаций в определенном гене можно применить метод инсерционного локализованного мутагенеза. С этой целью инактивируемый ген клонируют на плазмиде и встраивают в него детерминант устойчивости к антибиотику (рис. 29). Затем компетентные клетки трансформируют сконструированной гибридной плазмидой (или полученной при ее расщеплении линейной молекулой ДНК), содержащей указанный детерминант, фланкированный последовательностями, гомологичными хромосомному гену. В результате двойного кроссинговера происходит интеграция гена лекарственной устойчивости в гомологичный район хромосомы. Искомые трансформанты отбирают на селективных [c.160]

Существование транспонируемых элементов (транспозонов) приводит к необходимости введения дополнительных правил. Вставки (инсерционные мутации) обозначают теми же тремя буквами, символами генов и номерами аллелей, как это было описано выше. К этому добавляют символ, обозначающий встроенный материал. Символ этот ставится после двух двоеточий. (Например, his 8e9l ТпЮ обозначает определенную вставку сообщающего лекарственную устойчивость транспозона ТпЮ в ген his этой мутации дан номер 8691 аллеля his.y В символе транспонируемого элемента две прописные буквы обозначают тип элемента. Простые последовательности-вставки, которые содержат лишь гены, участвующие в транспозиции, обозначают IS. Более сложные транспозоны, включающие дополнительные гены, например гены устойчивости к лекарственному препарату, обозначаются Тп. [c.13]

Транспонируемые элементы могут встраиваться во многие точки бактериальной хромосомы. Если сайт включения оказывается в пределах какого-либо гена бактерии, то линейная непрерывность этого гена нарушается и он инактивируется. При встраивании элемента лекарственной устойчивости в ген, кодирующий какой-нибудь фермент биосинтеза, получается мутант с двойственным фенотипом. Потеря способности к биосинтезу того или иного соединения приводит к потребности в соответствующем питательном веществе (ауксотрофности), а экспрессия встроенной генетической информации — к лекарственной устойчивости. Оба этих фенотипа обусловлены одной и той же вставкой и при последующих генетических манипуляциях оказываются полностью сцепленными (Kle kner et al., 1975). [c.19]

При многих перестройках, индуцированных 1п10, происходит утрата детерминант устойчивости к лекарственным препаратам. Поэтому если взять штамм, содержаш,ий вставку ТпЮ в интересующей нас области, и проводить отбор клеток, утративших лекарственную устойчивость, то можно получить популяцию, сильно обогащенную делециями (или инверсиями) вблизи исходного сайта локализации ТпЮ. [c.29]

Были выявлены пять клонов, в которых степень устойчивости к колхицину варьировала от 3 до 180 раз. Плазматические мембраны метили метаболически радиоактивным глюкозамином полностью или только их поверхность с помощью галактозоксидазы — В Н4. Выделяли их из лекарственно чувствительных клеток и сравнивали белковый состав с помощью электрофореза в ДНС-полиакриламидном геле. Гликопротеид с высокой молекулярной массой (165—170 кД) был обнаружен в мембранах лекарственно устойчивых клеток, но отсутствовал в мембранах чувствительных к препаратам клеток. Количество этого белка, именуемого р-гликопротеидом, коррелирует со степенью лекарственной устойчивости в некоторых, но не всех клонах. р-Гликопротеид может составлять не более чем 4 % общего белка плазматической мембраны и действует, как предполагается, путем изменения текучести окружающего его липидного домена [c.103]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология