Гилберт

Гилберта в общих чертах показана на рис. 6. Рассмотрим здесь основные принципы этого метода. [c.16]

Значения этих коэффициентов приводятся в работах Т. Гилберта [54], Ц. В. Миллера [55] и др. [c.70]

В 1926 г. американский физико-химик Гилберт Льюис (1875 - 1946 гг.) предложил электронную теорию кислот и оснований. [c.14]

Метод Гилберта-Джонсона и силильный метод) [c.80]

Рис. 8.7. Схема метода Мак-сама — Гилберта

Открытие основных компонентов систем транскрипции и трансляции послужило важным стимулом в изучении механизмов регуляции этих процессов. В 1961 г. Ф. Жакоб и Ж. Моно опубликовали схему регуляции синтеза белков на уровне транскрипции при помощи регуляторных белков, а в 1966 г. У. Гилберт и Б, Мюллер-Хилл впервые выделили такой белок. Кроме того, оказалось, что РНК-полимераза сама является регулятором генной активности (Р. Б. Хесин. 1962—1966). Эти работы привели к открытию основных регуляторных генетических элементов — промоторов и терминаторов транскрипции. [c.7]

В середине 1960-х годов начались исследования нуклеотидных последовательностей РНК. Первыми были определены первичные структуры тРНК (Р. Холли и сотр., 1965 А. А. Баев и сотр., 1967). Развитие техники фракционирования фрагментов нуклеиновых кислот и прежде всего гель-электрофореза (Ф. Сэнгер и сотр.) позволило в начале 1970-х годов приступить к изучению первичной структуры высокомолекулярных РНК. В 1976—1978 гг. были созданы исключительно быстрые и эффективные методы секвени-рования ДНК и РНК (А. Максам и У. Гилберт, Ф. Сэнгер и сотр.), которые позволили за короткое время получить огромную информацию о первичной структуре генов, их регуляторных элементах, вирусных и рибосомных РНК и т. д. [c.7]

Существует два принципиально различных подхода к определению нуклеотидной последовательности ДНК. Первый из них предложен А. Максамом и У. Гилбертом и основан на специфическом химическом расщеплении полинуклеотидной цепи. Последовательность операций при секвенировании ДНК методом Максама — [c.15]

Рис. 6. Схема определения 13-членной нуклеотидной последовательности в 30-членном фрагменте ДНК по Максаму — Гилберту

ДНК-полимеразной реакции (рассуатриваемой в гл. II при обсуждении репликации ДНК). Принцип метода показан иа рис. 7. Как и при секвенировании ДНК по Максаму — Гилберту, здесь добиваются, чтобы обрыв цепи (при попадании на ее З -конец комплементарного терминаторного нуклеотидного остатка) происходил равновероятно по всем положениям данного остатка (рис. 7 — остаток Т). Это достигается экспериментальным выбором правиль ного соотношения дезоксинуклеозидтрифосфатов и терминаторного [c.18]

Меченые фрагменты разделяют так же, как и при секвенировании ДНК по Максаму — Гилберту. [c.19]

В настоящее время существует множество вариантов как метода Максама — Гилберта, так и метода Сэнгера. Главное, эти методы удалось полностью автоматизировать. Так, например, при секвенировании ДНК по Сэнгеру на 5 -конец праймера вводят флуоресцентные метки, причем для каждого из четырех анализируемых нуклеотидов используются флуоресцирующие агенты с различными спектральными характеристиками. После электрофоретического разделения гель сканируется при четырех различных длинах волн и полученная информация сразу обрабатывается на ЭВМ. При этом все биохимические операции также проводятся роботом. [c.19]

Макропористые ионообменные смолы 2/1267, 304, 320, 701, 702, 1268 1/289, 311 Макрорадикалы 2/1268, 230, 231, 432 Макросетчатые смолы 2/1268 Макроскопическая константа скорости реакций 1/347 Макроуцобрения 3/54 Макроэлементы 5/34 Макроэргическне соединения 3/933 Максама-Гилберта метод 3/388, 389, [c.642]

В классических работах Дж. Гилберта с сотр. было установлено, что диалкилдиазометилфосфонаты в результате катализируемого основанием присоединения по карбонильной группе генерируют соответсвующие неустойчивые винилкарбены. Последние перегруппировываются в ацетилены, либо присоединяются по я-связям, внедряются по 6-связям и др. [c.220]

Установлено преимущественное образование продуктов внедрения по вторичным и третичным С-Н-связям. Продолжая эти исследования, Дж. Гилберт и Б. Блэкборн нашли что промежуточные винилкарбены конкурентно перегруппировьшаются и внедряются по неэквивалентным С-Н-связям. [c.221]

Ф.Сэнгер, Р. Баррел, А. Максам, В. Гилберт Разработаны методы быстрого определения нуклеотидной последовательности [c.105]

Для полноты картины следует упомянуть концепцию Гилберта Н. Льюиса (1875-1946), предложенную им в 1916г. Согласно Лькмсу, кислота является акцептором электронной пары, а основание — донором электронной пары. Следовательно, к кислотно-основным относятся не только реакции переноса протона. В рамках этой теории протон не играет никакой особой роли, а кислотно- [c.142]

Хотя в качестве продуктов реакции Гилберта-Джонсона можно ожидать как а-, так н р-нуклеозиды, долю каждого из образующихся продуктов можно изменить, меняя условия реакции. Это до некоторой степени объясняет то большое различие в условиях реакций, о которых сообщается в литературе и которое наводит новичка на мысль, что синтез есть больше искусство, чем наука. Наиболее эффективной добавкой, по-видимому, является бромид ртути(II), который не только повышает скорость реакции, но влияет также на стереохимию продуктов таким образом, что образуется больше р-нуклеозида. Это особенно важно в синтезе дезоксинуклеозидов, поскольку используемая галогеноза довольно нестабильна и любое повышение скорости реакции будет увеличивать выход обоих аномеров, хотя на практике в большей пропорции обычно образуется р-аномер. 3,5-Ди-0-(и-нитробензоил)-2-дезокси-а-О-эрыгро-пентафуранозилхлорид можно получить в кристаллическом виде, и его реакция с 2,4-диалкоксипиримидинами, как обнаружено, иногда дает преимущественно а-нуклеозиды с сохранением конфигурации. Это объясняют образованием интермедиата (11), который далее атакуется нуклеофилом по С-1. [c.81]

Механизм реакции подобен предложенному для реакции Гилберта-Джонсона см. схему (2) с той разницей, что уходящей группой является не этильная, а триметилсилильная. Обнаружено также, что соотношение получающихся аномерных продуктов зависит от того, образовался или нет триметилсилилхлорид в ходе конденсации [59]. В условиях, которые благоприятствуют его быстрому удалению, образуется исключительно р-нуклеозид. Когда же условия благоприятствуют его сохранению в реакционной смеси, предпочтительно образуется а-аномер. Вероятно, а-аномер образуется в результате прямого 5м2 замещения в р-галогенозе, которая образуется при катализируемой триметилсилилхлоридом аномеризации а-галогенозы схема (4) . [c.82]

Одно из наиболее интересных достижений в этой области — работа Форбрюггена и сотр. по получению нуклеозидов с помощью катализируемой по Фриделю-Крафтсу реакции перацилированного углевода с силилированным гетероциклом в 1,2-дихлорэтане или в ацетонитриле [48, 61]. Авторы [48] рассматривают эту реакцию как разновидность реакции Гилберта-Джонсона, тогда как автор [c.83]

Сенжер и Коулсон создали метод анализа последовательности ДНК, который основан на ферментативном копировании однонитевых частиц ДНК [18]. Максам и Гилберт создали метод, в основу которого положена химическая модификация четырех оснований, входящих в состав ДНК, и который с одинаковым успехом применим как к однонитевым, так и к двунитевым молекулам ДНК [19]. Оба метода используют авторадиографическое определение згр-меченных олигонуклеотидов, которые разделяют в зависимости от их длины электрофорезом денатурированных фрагментов в полиакриламидном геле. На практике, успех этих методов во многом определяется недавними достижениями в энзимологии нуклеиновых кислот, особенно использованием ферментов рестрикции, расщепляющих молекулы ДНК, и обратной транскриптазы, с помощью которой получают циклические ДНК, комплиментарные РНК-матрице. Нижеследующее описание методики анализа будет, однако, предполагать наличие гомогенных образцов ДНК подходящей длины. [c.188]

За разработку этого метода Ф. Сэнджер удостоен Нобелевской премии (1958). В 1980 г. он был удостоен второй раз Нобелевской премии вместе с У. Гилбертом и Н. Бергом за разработку метода определения первичной структуры нуклеиновых кислот. [c.53]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология