Фенилтиогидантоин

Метод Эдмана последовательной деградации пептидов и белков основан на реакции фенилизотиоцианата с концевой аминогруппой в щелочной среде, которая приводит сначала к образованию тиомочевинной метки концевой аминокислоты, последняя при действии СРзСООН отщепляется, в конечном счете, в виде замещенного фенилтиогидантоина, после чего полипептидная цепь белка укорачивается на один аминокислотный остаток. Далее этот процесс повторяется вновь [c.94]

Для этой цели в настоящее время можно было бы воспользоваться методом Эдмана—последовательным отщеплением аминокислот в виде фенилтиогидантоинов (см. стр. 511). Широко применяют также кар-боксипептидазу и аминопептидазу. [c.514]

При осторожном нагревании с НС1 в нитрометане оно циклизуется распадом на фенилтиогидантоин и пептид. [c.512]

Фенилтиогидантоины, фенилуретаны, фенилмочевина [c.263]

Иод-азид. Перед хроматографией бумагу погружают в 0,5%-ный раствор крахмала и высушивают. После проведения хроматографии высушивают при комнатной температуре и опрыскивают смесью равных объемов 0,01 М Тг в 0,5 М К1 и 0,5 М азида натрия. Фенилтиогидантоины и гидантоины дают светлые пятна на темном фоне. [c.394]

Фенилтиогидантоины После деградации по Эдману [66] [c.314]

В результате образуется фенилтиогидантоин, содержащий боковой радикал аминокислоты Ri, который может быть идентифицирован путем измерения какой-либо физической или физико-химической характеристики, позволяющей различать гидантоины, соответствующие разным входящим в состав белков аминокислотам. В качестве такой характеристики может служить хроматографическая подвижность в какой-либо предварительно проградуированной по стандартным образцам гидантоинов системе или молекулярная масса, определяемая с помощью масс-спектрометра. [c.271]

Указанные выше условия образования фенилтиогидантоинов (ФТГ-ами-нокислот) иллюстрируются следующей реакционной схемой [178, 179]. [c.425]

По окончании реакции фенилтиогидантоин выделяют, идентифицируют и таким образом устанавливают характер К-концевой группы в исходном полипептиде. [c.521]

СО следующей концевой аминокислотой образующиеся производные фенилтиогидантоина идентифицируются хроматографически, поскольку все они различаются по структуре радикалов Н сбот-ветствующих аминокислот (схема 4.8.1). [c.95]

Осн. метод исследования аминокислотной последовательности пептидов и Б.-хим. деградация с помощью фенилизотио-цианата. Этот метод позволяет последовательно отщеплять Н-концевые аминокислотные остатки в виде фенилтиогидантоинов, к-рые абсорбируют свет в [c.251]

Оставшийся пептид можно подвергнуть вторичной обработке фе-нилизотиоцианатом и отщепить следующий аминокислотный остаток. Таким образом, этот метод пригоден также и для установления последовательности аминокислотных остатков в пептидах. Френкель-Конрат видоизменил метод для микроопределения аминокислотных остатков в виде фенилтиогидантоинов на бумаге и определил с его помощью первые 8 аминокислот в кортикотрооине. [c.512]

Одним из самых ценных реагентов при работе с белками является фенилизотиоцианат, впервые примененный П. Эдманом. Это соединение реагирует с хМ-концевой аминогруппой пептидов [уравнение (2-25)]. Образующийся продукт циклизуется, что в кислой среде влечет за собой разрыв пептидной цепи (2-25). В итоге образуется соответствующий Ы-концевой аминокислоте фенилтиогидантоин, который можно идентифицировать. Проделав ту же операцию с укороченной указанным путем пептидной цепью, можно определить следующий аминокислотный остаток. При тщательной постановке эксперимента с помощью реакции Эдмана можно пройти вдоль пептидной цепи несколько десятков остатков. Есть специальные приборы — так называемые секвена-торы, в которых все необходимые операции осуществляются автоматически. [c.174]

Циклизация осуществляется в парах смеси 6 н. НС1 и ледяной уксусной кислоты ори комнатной температуре в течение 4—16 час. Все ФТГ-производные можно экстрагировать из бумаги, но ФТГ-производное полуцистина, если оно образуется, остается соединенным с пептидной цепью. Выходы фенилтиогидантоинов на последовательных стадиях расщеп- [c.243]

Тиогидантойны удается идентифицировать хроматографированием на бумаге [68, 94] или путем регенерации из них аминокислоты [19], как это описано выше для фенилтиогидантоинов, полученных по методу Эдмана (см. стр. 237—245). [c.247]

Другой метод определения Ы-концевых групп (разработанный в 1950 г. П. Эдманом в Университете Лунда, Швеция) основан на реакции между аминогруппой и фенилизотиоцианатом, приводящей к образованию замещенной мочевины (ср. разд. 29.14). Гидролиз соляной кислотой в мягких условиях селективно удаляет Ы-концевой остаток в виде фенилтиогидантоина, который затем идентифицируют. Большое преимущество этого метода состоит в том, что он не затрагивает остальной части пептида поэтому анализ можно вновь повторить и идентифицировать при этом следующую концевую группу в укороченном пептиде. В идеале этот метод можно использовать многократно до полного определения всей последовательности звеньев, аминокислота за аминокисло той однако на практике это оказывается неосуществимым. [c.1049]

Обработка продукта реакции кислотой приводит к циклизации и освобождению фенилтиогидантоина N-концевой аминокислоты, природу которого устанавливают хроматографически. Укороченный на одну аминокислоту полипептид подвергают дальнейшему анализу. [c.54]

Хорошо известный метод Эдмана для определения аминокислотной последовательности в пептидах основан на образовании тиогидантоинов (12) за счет концевой аминокислоты при действии на пептиды соответствующего RN = = S. Масс-спектры таких тиогидантоинов достаточно характеристичны и облегчают задачу идентификации отщепленной аминокислоты [507]. Масс-спектры фенилтиогидантоинов (12, R = 6Hs), например, всегда содержат интенсивные пики М+ и пики ионов [СбН5]+ и [ eH5N = = S] + - (m/z 135). Если в (12) К >СНз, то из М+ легко отщепляется молекула (R —Н). [c.291]

Г , 95 Раств-сть н.р. HjO р. EtOH, эф. Взаимодействует с —NHj-rp. с образованием фенилтиокарбамоиль-ных (ФТК) производных. При расщеплении по Эдману с целью определения белковой последовательности от полипептида отщепляется а-ФТЦ-произ-водное аминоконцевого аминокислотного остатка и циклизуется с образованием фенилтиогидантоина (ФТГ). [c.331]

Секвенирование полипептидов проводят методом, известным как метод Эдмона. Последовательная обработка полипептида, имеющего свободную концевую а-аминогруппу, каким-либо алкил- или арилизотиоцианатом в слабощелочной среде приводит к образованию соответствующей тиомочевины, которая в умеренно кислой среде (при значениях кислотности, не повреждающих пептидные связи) отщепляется в виде соответствующего тиогидантоина. Оригинальная процедура Эдмана основана на использовании феаилизотиоцианата и тем самым на образовании фенилтиогидантоинов [c.271]

Смотреть страницы где упоминается термин Фенилтиогидантоин: [c.410] [c.384] [c.691] [c.692] [c.270] [c.231] [c.25] [c.1049] [c.652] [c.652] [c.394] [c.39] [c.57] [c.58] [c.334] [c.272] [c.425] [c.329] [c.329] [c.521] [c.36] [c.692]

Органическая химия. Т.2 (1970) -- [ c.691 ]

Биохимия Том 3 (1980) -- [ c.174 ]

Органическая химия (1974) -- [ c.1049 ]

Справочник биохимии (1991) -- [ c.331 ]

Органическая химия Том2 (2004) -- [ c.521 ]

Основные начала органической химии том 1 (1963) -- [ c.812 ]

Биохимия растений (1966) -- [ c.30 , c.31 ]

Органическая химия Углубленный курс Том 2 (1966) -- [ c.675 ]

Начала органической химии Кн 2 Издание 2 (1974) -- [ c.661 ]

Начала органической химии Книга 2 (1970) -- [ c.730 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология