Молекулярные сита агароза

Стабилизирующая среда при электрофорезе либо проявляет едва заметные свойства молекулярного сита (например, среда, применяемая для создания градиента плотности [68], ацетат целлюлозы [69] и агароза [51]), либо значительно тормозит [c.112]

В комбинированных гелях, приготовленных одним из описанных выше способов [984], агароза содержится в такой концентрации, которая достаточна лишь для поддержания формы полиакриламидного геля. Таким образом, разделение нуклеиновых кислот в комбинированном геле зависит в основном от свойств полиакриламидного геля как молекулярного сита. Соответственно нуклеиновые кислоты имеют близкие электрофоретические подвижности в комбинированном и чисто полиакриламидном гелях. [c.381]

В этом методе используются одновременно и разделение по заряду, и эффект молекулярного сита. В качестве сита применяют крахмал и агарозу, [c.36]

Лучшего разделения, в частности, белков и нуклеиновых кислот можно достигнуть, если в качестве носителя использовать гели крахмала, полиакриламида, агарозы и агарозы — акриламида. Причины этого не совсем ясны, однако такой эффект, очевидно,, связан с пониженной диффузией в сетке геля и разделяющим действием гель-проникающей хроматографии (эффект молекулярного сита ). [c.228]

Полиакриламидный гель заменил крахмальный гель потому, что при его использовании можно контролировать эффект молекулярного сита с помощью изменения концентрации геля, а адсорбция белков в нем весьма мала. Полиакриламид — наиболее эффективный носитель для электрофореза белков и небольших молекул РНК. (Для нуклеиновых кислот, размер молекул которых больше размера пор полиакриламида, лучше использовать агарозу или агарозу — акриламид.) Полиакриламидный гель получается при сшивании акриламида Ы,Ы -метилен-бис-акрила- [c.229]

Далее оказалось, что на пористых гелях декстрана (сефадекс G-200) и агарозы (сефароза) достигается эффективное разделение ДНК и РНК (рис. 38.11 и рис. 38.12 соответственно) [122, 123]. Эти примеры показывают, что разделение на молекулярных ситах основано на различиях в молекулярных массах и форме молекул. Как уже отмечалось (стр. 67), хроматография на сефарозе в буферном растворе постоянного состава является одним из наиболее мягких [30] методов очистки ДНК от трудно удаляемых примесей [124, 125]. Этот метод сравнительно недавно вошел в лабораторную практику и, по-видимому, является достаточно перспективным. По аналогии с фракционированием низкомолекулярных веществ разрешение в этом случае зависит от отношения образец—сорбент. [c.82]

Понятие молекулярное сито с большим правом, чем к цеолитам, можно отнести к полупроницаемым мембранам. В первых работах по диализу мембранами служили пленки животного происхождения [7]. В настоящее время для диализа применяют преимущественно пленки из целлюлозы (Visking или Kalle). Эти пленки проницаемы в основном лишь для небольших молекул. Именно поэтому диализ вот уже в течение нескольких десятилетий используется как стандартный метод обессоливания высокомолекулярных соединений в водных растворах. Набухание мембран в растворе хлористого цинка или механическое растягивание значительно увеличивают их проницаемость [8]. Через такие мембраны довольно быстро могут диффундировать даже белки с молекулярным весом до 100 000 [8—10]. Из агара и агарозы получают мембраны, которые в набухшем состоянии полупроницаемы для белков [11] и даже для вирусов [12]. Изме- рение скорости диффузии через модифицированные мембраны из целлюлозы, обладающие ярко выраженной избирательностью, открывает новые возможности для изучения пространственной структуры сахаров [13], аминокислот [14] и пептидов [15]. Для такого тонкого разделения Крэйг предложил термин дифференциальный диализ [16]. [c.13]

Для гель-фильтрации используются так называемые молекулярные сита — инертные гидратированные полисахаридные материалы, представляющие собой пористые гранулы. Их получают на основе декстрана (сефадекс — бактериальный полисахарид), агарозы (из некоторых морских водорослей) или полимеризованных акриламид-ных гелей (акрилекс). [c.58]

При разделении белков с очень большой молекулярной массой эффект молекулярного сита можно уменьшить, если использовать смесь 0,5%-ная агароза — 2%-ный полиакриламид [79]. В ни>1чний электродный буфер добавляют раствор метилового красного (0,5 части на [c.277]

Препараты мембран эритроцитов можно получить с помопдью метода молекулярного сита. Для этого применяют гель-хроматографию на сефарозе 4В ( РЬагтас1а , Швеция). Сефароза 4 В представляет собой гель агарозы, которая поставляется в набухшем состоянии. Преимущество этого геля по сравнению с другими носителями для хроматографии заключается в его способности разделять комплексы биополимеров, полисахариды, мембраны и фрагменты клеток. Для эффективного отделения гемоглобина от мембран необходимо лизировать эритроциты не менее, чем двумя объемами буфера. Установлены оптимальные условия для разделения на сефарозе 4В 4 ммоль/л фосфатный буфер (pH 7,5). На колонку размером 1,5x5,1 см можно наносить до [c.232]

С тех пор как полиакриламидно-агарозные составные гели были предложены [984, 1324] в качестве поддерживающей среды при исследовании полимеров с очень высокой молекулярной массой, эти гели часто используются при изучении нуклеиновых кислот и нуклеопротеидных частиц. Разделение в них также зависит от размеров н заряда макромолекул. При этом агароза лишь улучшает механические свойства разбавленного полиакриламидного геля и не влияет существенно на свойственный ему эффект молекулярного сита. [c.90]

За последнее десятилетие разработан принципиально новый хроматографический метод макромолекул, вирусов и субклеточных частиц — хроматография на молекулярных ситах. Б качестве таких наполнителей хроматографичесхшх колонок применяются гранули-рованные гели сефадексы агароза и биогели. Эти три тина молекулярных сит позволяют фракционировать биологические макромолекулы но их молекулярному весу. [c.45]

За последние десять лет разработан принципиально новый хроматографический метод фракционирования макромолекул, вирусов и компонентов клетки, который широко используется в аналитической и препаративной биохимии, Этот метод основан на способности пористых материалов, работающих по принципу обратных молекулярных СИТ)), разделять смесь веществ по размеру и молекулярному весу компонентов. Эти молекулярные сита почти не обладают сорбционным сродством к фракционируемым веществам. В качестве таких пористых материалов применяют гранулированные гели полисахаридов (сефадексы, агароза), полиакриламида (биогели) и пористое порошковое стекло. Метод подобного фракционирования обычно называют молекулярно-ситевой хроматографией, молекулярной фильтрацией или гельфильтрацией. [c.125]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология