Хроматографический метод фракционирования

Описаны многочисленные колоночные и хроматографические методы фракционирования 19, гл. 4], позволяющие осуществить [c.551]

Уже указывалось, что имеется мало экспериментальных данных, пригодных для сравнения с теоретическими функциями распределения. Однако недавно Бейкер и Уильямс [5] разработали новый хроматографический метод фракционирования смесей и получили очень интересные результаты, [c.316]

Хроматографических методов фракционирования полимеров несколько. Адсорбционная хроматография (на активной подложке). Сила связи полимерной фракции с активной подложкой зависит от молекулярной массы полимера полимеры с большей молекулярной массой сильнее связываются с подложкой, хуже растворяются и поэтому вымываются из хроматографической колонки в последнюю очередь. При пропускании растворителя через колонку происходит постепенное вымывание фракций с увеличивающейся молекулярной массой. [c.26]

Ранние хроматографические методы фракционирования и анализа полимеров, такие, как осадительная хроматография Бейкера — Вильямса и элюирование в колонке без температурного градиента, в настоящее время развиваются мало. Они хорошо и достаточно полно описаны в ранее вышедших руководствах по фракционированию полимеров и поэтому в данной книге не рассматриваются. [c.9]

Описаны многочисленные колоночные и хроматографические методы фракционирования (элюирование в градиенте температуры и растворителя, прямая экстракция, селективное осаждение с последующим элюированием, адсорбционная и гелевая хроматография и т. д.), позволяющие осуществить разделение не только по молекулярным весам, но также по степени разветвленности макромолекулы, химическому составу и структуре. При применении таких методов, которые могут быть частично автоматизированы, можно проводить [c.418]

Хроматографический метод фракционирования [c.48]

При хроматографическом методе фракционирования полимера последовательно выполняют следующие операции 1) нанесение полимера на насадку 2) заполнение насадкой колонки и сборку прибора 3) фракционирование 4) выделение полимера из раствора. [c.51]

В настоящее время существует несколько методов фракционирования РНК. Наибольшее распространение получили хроматографические методы фракционирования высокополимерных нуклеиновых кислот на метилированном альбумине — кизельгуре (МАК) [777] и порошковой целлюлозе [337], которые позволяют фракционировать РНК соответственно их молекулярному весу и вторичной структуре. [c.183]

С рождением сорбционных и особенно хроматографических методов в распоряжении исследователей оказались самые эффективные пз современных средств фракционирования. Разработка широкого круга разнообразнейших сорбентов, твердых носителей и стационарных жидких фаз, препаративного и аналитического [c.14]

Чистый метан получают из природного газа фракционированной ректификацией или очисткой его хроматографическими методами. [c.301]

Среди лабораторных методов очистки, фракционирования и анализа структуры белков, нуклеиновых кислот и их компонентов совокупность различных хроматографических методов занимает центральное место. Ни один другой метод не может сравниться с хроматографией по широте количественного диапазона. Начиная от препаративных колонок объемом в несколько литров, на которых можно вести фракционирование граммовых количеств препарата на первых этапах выделения фермента, через разделение близких по своей природе компонентов очищенной смеси веществ, количество которых измеряется миллиграммами или долями миллиграмма, этот диапазон простирается до микроанализа аминокислотного состава белка, когда на колонку вносят сотые доли микрограмма исходного гидролизата. Вне конкуренции остается и разнообразие физико-химических параметров, по которым может осуществляться хроматографическое фракционирование молекулярные размеры, вторичная или третичная структура биополимеров, растворимость, адсорбционные характеристики молекул, степень их гидрофоб-ности, электрический заряд и, наконец, биологическое сродство к другим молекулам. [c.3]

Естественно, что фракционирование по столь широкому кругу параметров реализуется путем использования достаточно разнообразных методических подходов и аппаратуры. Тем не менее, одна принципиальная особенность остается неизменной для всех этих подходов, что и позволяет объединит ) их в одну категорию хроматографических методов. В любом из них можно обнаружить двухфазную систему, в которой одна фаза неподвижна, а другая перемещается относительно нее с некоторой скоростью в одном определенном направлении. Неподвижная фаза остается неизменной, заполняя полость трубки (хроматографической колонки ) или фиксируясь на поверхности стеклянной или пластиковой пластинки иногда ее основу образует фильтровальная бумага или пленка ацетилцеллюлозы. Подвижная фаза непрерывно обновляется, поступая в систему с одного ее конца и покидая с другого. Молекулы компонентов исходной смеси веществ распределяются между двумя фазами в соответствии со степенями своего сродства к ним. На каждом участке неподвижной фазы это распределение стремится к состоянию динамического равновесия, которое непрерывно нарушается вследствие перемещения подвижной фазы. В результате постоянно идущего перераспределения молекул вещества между фазами они мигрируют в направлении течения подвижной фазы. Скорость такой миграции тем меньше, чем больше сродство молекул к неподвижной фазе. Распределение между фазами происходит независимо для каждого компонента смесн веществ. Еслп соотношения сродства к двум фазам у молекул разных компонентов смеси не одина- [c.3]

Фракционирование белков методом гель-фильтрации используется довольно редко, очевидно, ввиду низкой (по сравнению с другими хроматографическими методами) эффективности, присущей самому процессу (см. выше). Однако в тех случаях, когда число компонентов белковой смеси заведомо невелико, такое фракционирование может оказаться вполне эффективным приемом. Так, четыре главных белка вируса рака молочной железы мышей были успешно разделены по молекулярной массе методом гель-фильтрации их ком- [c.139]

Для фракционирования пептидов используют различные методы колоночной хроматографии и ТСХ. Ранее мы уже знакомились с разделением пептидов гель-фильтрацией и обратнофазовой гидрофобной хроматографией. Нередко, если пептидов много, хроматографические методы следуют один за другим. Например, сначала пептиды разделяют на группы по размерам гель-фильтрацией, а затем следует ХОФ или ионообменная хроматография. [c.299]

После перекристаллизации получается треонин, содержащий значительно меньше аллотреонина. Однако при проведении реакции с указанными количествами исходных веществ общий выход уменьшается до 50%. Ни этот химический метод, ни метод бумажной хроматографии не позволяет полностью разделить изомеры в случае малых количеств исходных веществ. Такие смеси можно разделить фракционированием натриевых солей [5] в растворе этилового спирта или при помощи хроматографического метода с использованием ионообменных смол (см. ниже). [c.198]

Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы (молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы (для очистки ферментов) или антитела (для очистки антигенов) в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя pH, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы (см. разд. 26.3.7.6) конканавалина А [40], являющегося фитогемагглютинином (лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. Благодаря достижениям в производстве носителей для жидкостной хроматографии под высоким давлением можно осуществить хроматографическое разделение быстро и избирательно описаны методы фракционирования небольших олигосахаридов, продолжающегося менее 1 ч [42]. [c.224]

Для разделения полимера на фракции, более или менее одинаковые по молекулярной массе, степени стереорегулярности (для гомополимеров) или составу (для сополимеров), применяют фракционирование [37—39]. К методам фракционирования относятся седиментация, хроматографическое фракционирование, турбидиметрическое титрование, термодиффузия. [c.38]

Количественное определение фенолов может быть осуществлено чисто химическими и различными физико-химическими методами. Критическое рассмотрение различных методов свидетельствует о том, что в настоящее время пока еще отсутствуют методы количественного анализа фенолов с широким диапазоном применения. Это, в первую очередь, относится к анализу сложных фенольных смесей, изучение состава которых приводит к удовлетворительным результатам лишь при сочетании различных модификаций хроматографических методов с методами спектрального и химического анализа, а также с физическими методами фракционирования смесей ректификацией, кристаллизацией и т. д. Ректификация, как один из первых способов анализа фенолов, претерпела со временем значительные усовершенствования [15— 19] и в сочетании с другими методами не утратила своего практического значения до настоящего времени. Однако область ее применения весьма ограничена, поскольку фенолы образуют со многими соединениями азеотропные смеси. Особенно сильно отрица-, тельное влияние примесей на аналитическую ректификацию фенолов сказывается при исследовании коксохимических и сланцевых смол. [c.45]

Если вычисленное значение [т)] меньше опытного [" j], то это может быть связано с потерей самых высокомолекулярных фракций, наиболее вероятной в описываемых ниже методах фракционирования экстракцией тонкой пленки полимера и хроматографического осаждения. [c.150]

СО щелочью. Выход же оснований, найденный хроматографическим методом, оказался вдвое большим, чем при взбалтывании дегтя с соляной кислотой. Таким образом, при хроматографическом фракционировании из колонки вымывались не только основания, но также еще и другие вещества неизвестной природы. [c.25]

В последнее время широко применяется хроматографический метод анализа, основанный на адсорбции веществ каким-либо сорбентом (смеси углеводородов, благородных газов и др.) и их последующей фракционированной десорбции. В процессе десорбции вытесняются более легкие, а затем более тяжелые компоненты, концентрация которых может быть определена, например, по теплопроводности. [c.85]

Потребовалось выполнить исключительно большую экспериментальную работу по выбору п синтезу сорбентов и изучению условий проведения хроматографических процессов, прежде чем были созданы современные весьма изяш,ные хроматографические методы фракционирования макромолекул. Затруднения, возникшие при разработке этих методов, связаны прежде всего с необратимостью сорбции и малой емкостью сорбции белков. Период поисковых работ включал изучение распределительной хроматографии [1, 4] и молекулярной сорбционной хроматографии, в том числе весьма удачный для своего времени разработанный Тизелиусом метод хроматографии на фосфате кальция [2] и высаливающий хроматографический процесс [3], в котором емкость сорбции белков резко увеличивалась при высоких концентрациях электролита в растворе. Все эти методы, однако, уступили свое место высокоэффективной хроматографии белков на некоторых типах ионообменных смол, на модифицированных целлюлозах и методу гельфильтрации на сефадексах. Имеется значительное число обзоров по хроматографии белков, среди которых наиболее подробными являются статьи Циттла [4] и Мура и Штейна [5]. [c.188]

За последние десять лет разработан принципиально новый хроматографический метод фракционирования макромолекул, вирусов и компонентов клетки, который широко используется в аналитической и препаративной биохимии, Этот метод основан на способности пористых материалов, работающих по принципу обратных молекулярных СИТ)), разделять смесь веществ по размеру и молекулярному весу компонентов. Эти молекулярные сита почти не обладают сорбционным сродством к фракционируемым веществам. В качестве таких пористых материалов применяют гранулированные гели полисахаридов (сефадексы, агароза), полиакриламида (биогели) и пористое порошковое стекло. Метод подобного фракционирования обычно называют молекулярно-ситевой хроматографией, молекулярной фильтрацией или гельфильтрацией. [c.125]

Проблема анализа распределения компонентов остатков по размерам приобрела большое значение сравнительно недавно и в основном связана с развитием процессов их каталитического гидрооблагораживашм. Возможность получать какие-то определенные результаты появилась после разработки метода гель-хроматографического разделения. Метод этот — гель-проникающая хроматография (ГПХ) — впервые нашел широкое применение в биохимии и химии полимеров [31]. При ГПХ разделение органических веществ осуществляется совсем на иных принципах, чем при других хроматографических методах. Принцип метода заключается в том, что во время прохождения раствора исследуемого вещества через колонку, заполненную частицами твердого геля, происходит разделение молекул этого вещества за счет различной способности их проникать в поры геля. Поры в частице геля имеют различный размер. Молекулы образца также различаются по величине. Некоторые молекулы слшиком велики, чтобы войти даже в самые крупные поры, и исключаются из частицы геля. Поэтому они двигаются через слой геля между его частицами и первыми выходят из колонки. Другие молекулы так малы, что входят во все поры геля, полностью проникая в частицу. Эти соединения задерживаются в наибольшей степени и появляются на хроматограмме последними. Молекулы промежуточных размеров могут входить только в некоторые поры и двигаются по колонке со средней скоростью. При разделении смеси с ширркой областью молекулярных масс используют набор гелей с разными пределами исключения. Это позволяет расширить область фракционирования колонки. Использование различных гелей дает эффект только при последовательном соединении колонок с разными гелями. При разделении соединений, мало различающихся по размеру, используют гели с узкой областью [c.36]

В работе [329] был изучен фотолиз (СНз)зССНО и смесей изовалерианового альдегида с этиленом. Продукты фотолиза после низкотемпературного фракционирования анализировались хроматографическим методом. Из отношений выходов продуктов фотолиза при различных температурах были определены константы скоростей различных элементарных стадий фотолиза изовалерианового альдегида, отнесенные к константе скорости рекомбинации третичных изобутильных радикалов. Предполагая, что константа рекомбинации равна 10 для константы диспропорционирования третичных изобутильных радикалов нашли значение Реакция взаимодействия третичных изобутильных радикалов с молекулами изовалерианового альдегида, приводящая к образованию изобутана и триметилкарбонила, имеет в температурном интервале 300—797 К константу скорости, вычисленную по формуле 10 ° ехр Исследование фотолиза (СНз)2СНСН2СНО в области 25—417° С позволило определить константу диспропорционирования первичных изобутильных радикалов, которая равна 10 при условии, что константа рекомбинации этих радикалов принимается равной 10 . [c.245]

Выделяющийся этан очищают от примесей двуокиси углерода, паров метанола и метилацетата, этилена, водорода, ки.слорода и окиси углерода, пропуская его последааатеяьно через промывные склянки с 30%-ным раствором КОН, с дымящей серной кислотой, с концентрированной серной кислотой и снова с 30%-ным -раствором КОН. Затем газ сушат в колонках с твердым КОН и с пятиокисью фосфора. В дальнейшем газ сжижают, подвергают фракционированной ректификации (см. стр. 52), многократной Дистилляции, замораживанию и откачке трудно конденсирующихся газов (см. ст.р. 313) или очищают хроматографическими методами (см. стр. 59—76). Конечный чисгый продукт ранят в небольшом стальном баллоне. [c.315]

Всем хроматографическим методам присущи некоторые общие характеристики, позволяющие ниже изложить элементы их обобщенной теории. Однако сначала рассмотрим специфические особенности различных вариантов хроматографического фракционирования. Это, с одно11 стороны, позволит за теоретическими рассуждениями все время видеть реальные черты хроматографического эксперимента, а с другой — даст возможность ввестп классификацию хроматографических методов. В ходе дальнейшего изложения (в частности, для его разбиения по главам) удобнее всего классифицировать методы по основному принципу фракционирования. Такую классификацию мы рассмотрим достаточно подробно и лишь в конце раздела кратко отметил другие возможные варианты классификации. [c.6]

Роговин и Дружинина [Ю] определяли содержание аморфного полимера экстрагированием толуолом при 50°С, Вийга с сотрудниками [11] при помощи хроматографического метода провели фракционирование полипропилена, во-первых, по стереорегулярности (при повышении температуры и постоянном составе экстрагента) и, во-вторых, по молекулярному весу (при постоянной температуре 150° С и различном составе экстрагента). [c.65]

Хроматографический метод разделения титана, циркония и тория на катионите дауэкс-50, предложенный Брауном и Ри-мансм [481], основан на фракционированном вымывании элементов при pH 2,00 буфером лимонная кислота — цитрат аммония, который используется в качестве комплексообразующего агента. При этих условиях десорбируются Т1 и 7г, а ТЬ прочно удерживается смолой даже при пропускании 10 л десорбента. После отделения Т и 7г торий вымывают 0,0520 М раствором двузамещенного цитрата аммония с pH 4,98. Разделение количественное. [c.127]

Если проанализировать состав каждой из фракций, можно получить интегральную кривую распределения по составу (ИКРС), дающую полную количественную информацию о неоднородности по составу анализируемого образца [ 13] и массовую долю фракции любого состава. Поскольку при построении ИКРС не исключено искажение неоднородности по составу анализируемого образца за счет полидисперсности отдельных фракций, то для получения достаточно объективной картины число анализируемых фракций должно быть достаточно велико, больше 10-12, Препаративные хроматографические методы позволяют существенно повысить это число современная хроматографическая техника позволяет обойтись вообще без материального фракционирования. [c.332]

Выделение стильбенов проводится с помощью фракционирования в несмешивающихся растворителях, хроматографических методов, характерных для фенольных веществ с использованием силикагеля, полиамида и других сорбентов. Растительные стильбены препаративно разделяют методом жидкостной хроматографии. Этим же методом проводят их количественное определение [9, 10]. На бумажных хроматограммах под действием ультрафиолетового света стильбены окрашиваются в различные [c.38]

При анализе молекулярно-массового расиределения полиокси-пропиленполполов в последнее время широко используют хроматографические методы. Гельхроматография является наиболее экспрессным способом для получения кривых ММР и дает результаты, удовлетворительно согласуюш иеся с данными препаративного фракционирования ([80], рис. 95). [c.245]

Фракционирование олигомеров осуш ествляют, используя методы скоростной седиментации в ультрацентрифуге и турбидиметрического титрования, а также хроматографические методы (электрофорез, тонкослойная и гель-проникаюш,ая хроматография и др.). [c.130]

В последние годы хроматографические методы были использованы для разделения и выделения радиоактивных элементов, весьма близких по химическим свойствам [17]. Эти методы неоднократно использовались также для фракционирования меченых органических веществ. В обзорной работе Роше, Лисицкого и Михеля [44] показано, как важно использовать в различных хроматографических методах изотопы, в особенности при биохимических исследованиях. Многие авторы описали специальное биохимическое применение разных радиохроматографических методов [2, 14]. Особенное впечатление производят исследования Кальвина [13] по ассимиляции радиоактивного углекислого газа и анализ методом хроматографии на бумаге меченых первичных продуктов фотосинтеза в водорослях и других зеленых растениях. С тех пор как Финк, Дент и Финк [16] описали фотографический способ локализации радиоактивных веществ на бумажной хроматограмме, радио авто графия стала незаменимым вспомогательным средством при исследованиях механизма фотосинтеза [5, 6, 13] и других проблем биохимии. [c.66]

В настоящее время хроматографические методы в значительной степени вытеснили все другие методы фракционирования липидов в аналитическом и микропрепаративном масштабе. Для разделения сложных смесей липидов на отдельные классы соединений использовали адсорбционную и распределительную хроматографию на колонках с силикагелем, на целлюлозных фильтрах, импрегнированных силикагелем, и на бумаге из стекловолокна. Распределительная хроматография с обращенными фазами использовалась для разделения членов винилогомологического ряда на гидрофобизованной колонке или на гидрофобизованной бумаге. Газовую хроматографию использовали в виде распределительно-хроматографического варианта в первую очередь для разделения метиловых эфиров жирных кислот. Разделение смеси липидов по степени ненасыщенности можно осуществить путем хроматографического разделения на силикагеле комплексных ртутноацетатных соединений ненасыщенных липидов. Для выделения кислот и для фракционирования сильно полярных липидов была использована ионообменная колоночная и ионообменная бумажная хроматография. Методом хроматографии на колонках с мочевиной или на бумаге, пропитанной мочевиной, можно отделить жирные кислоты с прямой цепью от кислот с разветвленной цепью. Эффект разделения основан на образовании соединений включения неразветвлеиных жирных кислот с мочевиной. Разли шые хроматографические методы разделения липидов описаны в многочисленных обзорах [23, 86, 96, 100]. [c.144]

Дробное фракционирование ацетоновой фракции, полученной при предварительном разделении (рис. 7). Как упомянуто выше, ацетоновые элюаты, полученные на колонке из окиси алюминия, содержали все основания и фенолы. Была предпринята попытка разделить эти группы веществ хроматографическим методом. [c.24]

Фриш и Е Си-лун [94] применили хроматографический метод для фракционирования искусственной смеси двух образцов полистирола путем высаживания полимера на носитель (сажа, осажденная на целите) и последующего элюирования фракций при помощи различных растворителей метилэтилкетона (плохой растворитель), толуола (удовлетворительный) и тетралина (хороший растворитель). Разделение проводили при комнатной температуре на колонке обычного типа с термостатированными стенками. Концентрацию полимера в элюате контролировали рефрактометрически молекулярные веса контролировали вискозиметрически, пользуясь известными константами. Было установлено, что меньшие молекулы десорбируются в первую очередь. Чгм лучше растворитель, тем полнее извлечение, включая и самую высокомолекулярную часть. Однако авторам не удалось вернуть более 80% осажденного полимера, поэтому они пришли к заключению, что этот метод может дать лишь весьма приближенную картину МВР. [c.52]

Было проведено [73] сравнительное изучение эффективности метода последовательного дробного осаждения и хроматографического экстракционного фракционирования на примере разделения технического полистирола (стирон-666). [c.57]

Ксилан действительно гидролизуется примерно в 1500 раз быстрее целлюлозы. Химизм этой теории во всех его деталях никогда не был широко принят, однако среди продуктов гидролиза целлюлоз различного происхождения хроматографическим методом были обнаружены следы ксилозы и ман-нозы [35]. Не установлено, присутствовали ли эти посторонние звенья в исходном материале или они образовались при обработке, состоящей из нитрования, фракционирования и денитрации. Однако несомненно, что слабые связи могут образовываться во время предварительной обработки и при переработке целлюлозы [36], причем, по-видимому, в их образовании определенную роль играют процессы окисления. [c.111]

С целью дифференцирования азотистых оснований (деасфальтенизатов), выделенных из нефтей по схеме на рис. 5.3, соответствующие концентраты подвергали фракционированию на ряд продуктов с использованием экстракционных и хроматографических методов разделения. В отдельных случаях из концентратов К-1 извлекали низкомолекулярные азотистые основания путем однократной обработки их экстрагентом при следующем соотношении реагентов Н2304 [c.129]

Дальнейший анализ смолисто-асфальтеновых веществ потребовалось дополнить методами фракционирования мальтенов на смолы и масла. Так, Маркуссоном [13] впервые был разработан способ хроматографического разделения мальтенов на фуллеровой земле с последующей исчерпывающей экстракцией углеводородов петролейным эфиром и смол сероуглеродом. Впоследствии был предложен ряд усовер-шецствованных модификаций методики Маркуссона, основные отличия которых состоят в следующем [c.6]

Собственно хроматографические методы основаны на тех явле-лиях, которые были обнаружены М. Цветом [78] в 1903 г. Пропуская раствор смеси веществ через адсорбционную колонку, М. С. Цвет обнаружил, что происходит разделение этих веществ и объяснил это следующим образом Вещества, растворенные в определенной жидкости, образуют определенный адсорбционный ряд А, В, С, выражающий относительное адсорбционное сродство его членов к адсорбенту. Каждый из членов адсорбционного ряда, обладая большим адсорбционным сродством, чем последующий, вытесняет его из соединения и в свою очередь вытесняется предыдущим. Пропускание раствора А + В С через столб адсорбента равносильно фракционированной адсорбции, с той особенностью, что ввиду ничтожных размеров капиллярных пространств, суще-ствуюших между крупинками адсорбента, адсорбционное равновесие устанавливается быстро. Для того, чтобы два находящихся в растворе вещества могли быть разъединены адсорбционным методом, необходимо чтобы они занимали неодинаковый ранг в адсорбционном ряду. [c.106]