Фосфоглюкозоизомераза

Примечание. Если в препарате дегидрогеназы глюкозо-6-фос-фата имеется примесь дегидрогеназы-6-фосфоглюконата, при энзиматическом методе определения активности фосфоглюкозоизомеразы образуется 6-фосфоглюконат — конкурентный ингибитор фермента. Учитывая количество образовавщегося б-фосфоглюконата, вносят поправку при расчете активности фосфоглюкозоизомеразы. [c.234]

Очевидно, в некоторых химических реакциях, особенно в тех, которые проводят в неполярных растворителях, скорость установления равновесия ионогенных протонов с растворителем может быть меньше, чем скорость других реакций. То же справедливо для ферментативных реакций. Так, например, фосфоглюкозоизомераза катализирует перенос протона в молекуле сахара от атома углерода 2 к атому 1 с образованием фруктозо-6-фосфата. То, что в этой реакции действительно переносится протон, почти не вызывает сомнений, так как меченый атом водорода в положении 2 в процессе переноса в положение 1 претерпевает частичный обмен с растворителем. Однако тот факт, что некоторые процессы переноса идут без обмена с растворителем, означает, что промежуточное соединение, в котором протон присоединен к основной группе активного центра фермента [схема (60)], может [c.168]

Предположим, что в ферменте, катализирующем реакцию переноса протона, например в фосфоглюкозоизомеразе или в кетостероидизомеразе, основанием, которое удаляет протон от углерода, является имидазольный остаток гистидина. Чтобы произошел протонный обмен, необходим перенос протона от сопряженной кислоты имидазола к растворителю, что может быть результатом реакции с ионом гидроксила или с водой. Реакция с ионом гидроксила [уравнение (65)] протекает в благоприятном для равновесия направлении с константой скорости, соответствующей диффузионно контролируемому пределу 2,3-10 ° л/моль-с [c.170]

Энергия активации для диффузионно контролируемых реакций мала, однако теплота диссоциации воды и иона имидазолия велика — 13 200 и 7 700 кал/моль (63 500—36 900 Дж/дюль) соответственно [72]. Эффективный температурный коэффициент реакции иона имидазолия с ионом гидроксила при pH 7 [уравнение (65)] будет большим вследствие увеличения кон-центра] ии ионов гидроксила с увеличением температуры. Тот же температурный коэффициент для реакции с водой [уравнение (66)] также будет большим, поскольку он определяется малым температурным коэффициентом диффузионно контролируемой стадии /с уравнения (66) и большим температурным коэффициентом равновесия. Таким образом, очевидно, что с ростом температуры обмен протона с растворителем будет увеличиваться быстрее, чем реакция переноса протона в фосфоглюкозоизомеразе [68]. [c.171]

Первоначально окислительный пентозофосфатный путь возник, вероятно, для обеспечения прокариот пентозами. В этом случае возникновение только трех новых ферментов (глюкозо-6-фосфат-дегидроге-пазы, лактоназы и фосфоглюконатдегидрогеназы) уже приводило к синтезу пентоз. Поскольку к этому времени функционировали изоме-разные ферменты гликолитического пути (фосфоглюкозоизомераза и триозофосфатизомераза), формирование фосфопентозоизомеразы, катализирующей превращение рибулозо-5-фосфата в рибозо-5-фосфат, произошло довольно легко. Действительно, при определенных условиях окислительный пентозофосфатный путь на этом завершается. [c.217]

Это ограничение можно снять, удаляя глюкозо-6-фосфат из реакционной смеси. При добавлении фосфоглюкозоизомеразы, фосфофруктокиназы и АТР глюкозо-6-фосфат превращается во фруктозо-1,6-дифосфат, т. е. основная часть глюкозо-6-фосфата, образующегося под действием гексокиназы в свободной жидкости, исчезает, тогда как глюкозо-6-фосфат, выделяющийся внутри гранул, сохраняется. Кинетика образования NADH становится линейной, а модуляция сигнала антигеном — неограниченной во времени. [c.116]

КОЛОНОЧНОГО типа могут адсорбировать различные ненужные белки, другие макромолекулы и низкомолекулярные соединения, оставляя -нужный фермент в растворе готовым для следующей стадии очистки. В качестве примера можно привести очистку дрожжевой фосфоглюкозоизомеразы (КФ 5.3.1.9) с использованием как гидроокиси цинка, так и бентонита в качестве адсорбентов объемного типа (табл. 4.9) [111]. Гидроокись цин- [c.180]

Таблица 4.9. Очистка фосфоглюкозоизомеразы из экстракта дрожжей с помощью адсорбции примесных белков в объеме fill]

Даже в том случае, когда фермент совсем не адсорбируется, обработка исходного раствора путем добавления к нему порции адсорбента может быть чрезвычайно полезной, так как при этом удаляются другие белки. Пример такой обработки приведен в предыдущем разделе. В дрожжевой экстракт добавляли сначала гидроокись цинка, а затем бентонит. Большая часть белкового материала адсорбировалась, а вся фосфоглюкозоизомераза оставалась в растворе [111] (см. табл. 4.9). Существует много других примеров обработки экстрактов адсорбентами иногда она проводится с целью осветления экстракта, но сопровождается также адсорбцией ненужного материала. Даже тогда, когда достигается лишь небольшая степень очистки (например, только 10—20%-ное повышение удельной активности), удаленный белок может оказаться важной примесью, мешающей реализации последующих стадий очистки. [c.193]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология