Удаление белков

После удаления белка, желатина и связующего материала с полимерной осиовЫ пленки сетчатый контейнер с остатками пленки вынимают из резервуара и погру жают в следующий промывной резервуар, в котором содержится разбавленный раствор гликоля ( Ю % в воде) либо разбавленный раствор каустика ( 1 %). Оба этих вещества могут быть использованы для удаления остатков связующего материала. [c.321]

Ионообменники, адсорбирующие аминокислоты, пригодны также для удаления белков протеины из-за пространственных препятствий адсорбируются очень слабо, л поэтому основная часть проходит с углеводами, и неорганическими катионами или анионами (сравни обессоливание). [c.397]

Удаление белков из растительных соков с помощью ионообменных смол [1807]. [c.228]

Колориметрическое определение молочной кислоты в биологических жидкостях применение катионитов для удаления белков [1272]. [c.276]

ДЕПРОТЕИНИЗАцИЯ ж. Удаление белка или очистка от белка. [c.122]

Для опытов 125, 126 и 136 можно вместо кристаллической лактозы использовать фильтрат после удаления белков из молока. [c.185]

Осаждение белков с помощью трихлоруксусной кислоты в конечной концентрации 2,5—5% часто применяется для полного удаления белков из биологических жидкостей (например, из сыворотки крови), так как трихлоруксусная кислота осаждает только белки, а продукты их распада при этом остаются в растворе. Это особенно важно, когда нужно определить отдельно содержание азота белка и азота более низкомолекулярных продуктов (аминокислот, мочевины и др.) — так называемый остаточный азот . [c.27]

Для удаления белков пользуются рядом способов, основанных на реакциях осаждения белков (см. стр. 19). [c.164]

В качестве примера приведем удаление белков из сыворотки крови. [c.164]

В работе Елисеевой он применен для определения витамина в моче, крови и тканях [42]. Для устранения мешающего действия флуоресцирующих примесей автор рекомендует обрабатывать исследуемый объект соляной кислотой (нри нагревании) и проводить извлечение тиохрома изобутанол ом предложен метод осаждения белков, почти полностью устраняющий потери тиамина при удалении белков. [c.205]

S с h 1 u b а с h Н. FI., Н a u s с h i 1 d t P., Удаление белков из растительных соков с помощью ионообменных смол, Ann., 577, 54 (1952). [c.331]

ГИДОВ, как и аминокислот, в плазме или сыворотке производится после удаления белков. Освобождение плазмы или сыворотки от белков достигается осаждением их трихлоруксусной кислотой, фосфорновольфрамовой кислотой и др. (стр. 23). В зависимости от способа удаления белков получаются различные числа, характеризующие содержание полипептидов в плазме или сыворотке. Обычное содержание азота полипептидов составляет в норме от 0,1 до 3 мг%. [c.443]

Для удаления примеси нуклеиновых кислот применяют протеазы. Применение ферментов (нуклеаз и др.) требует последующего удаления белков-ферментов. [c.55]

Для успешного проведения аффинной хроматографии необходимо не только связывание аффинного лиганда, но и полное удаление всего аффинного лиганда, нековалентно связанного с носителем. Поэтому соединения следует тщательно промывать, контролируя результаты промывки. Сорбированные ароматические соединения можно успешно удалить с помощью органических растворителей, а для удаления белков полезна промывка денатурирующими агентами, если они не влияют на носитель и на связывающую способность аффинного лиганда. Необходимо быть уверенным в том, что измеряемая биологическая активность специфического адсорбента действительно обусловлена только ковалентно связанным аффинным лигандом. С этой целью определяют изменение концентрации нерастворимого производного после инкубирования в различных буферных растворах или после других подходящих обработок сорбента. [c.12]

Более сложный химический состав кукурузного зерна вызывает необходимость в дополнительных операциях по удалению белков, экстрактивных (растворяющихся в воде) веществ и примесей, растворимых в воде. [c.115]

Удаление белков. Белки из исследуемого раствора осаждают трихлоруксусной или хлорной кислотой, добавляя ее к раствору до конечной концентрации 2,5%. Раствор хорошо перемешивают, осадок белка удаляют фильтрованием или центрифугированием. Если в растворе присутствуют кислотолабильные фосфорные соединения, то фильтрование или центрифугирование проводят на холоде, а кислоту из безбелкового раствора удаляют. От трихлоруксусной кислоты можно освободиться путем повторного встряхивания раствора с 5— 10-кратным объемом насыщенного водой эфира. Трихлоруксусная кис-Исключение составляет метод Бенцини (с 37) [c.33]

В зависимости от метода последующей переработки получаемые гемицеллюлозные гидролизаты отбираются отдельно или одновременно с продуктами гидролиза трудногидролизуемых полисахаридов. Так, длй производства этилового спирта, кормовых дрожжей все моносахариды, образующиеся из легко- и трудногидролизуемых полисахаридов, собираются вместе. Никакой предваретельной обработки растительного сырья не производится. Наоборот, при получении чистых пентозных гидролизатов для выделения кристаллической ксилозы и ее переработки в пятиатомный спирт ксилит растительное сырье, богатое пентозанами, вначале подвергается обработке горячей водой для удаления белков, дубильных веществ, пектинов и части минеральных веществ. Последние остатки растворимых катионов удаляются промыванием сырья теплой разбавленной серной кислотой. Эта обработка носит название облагораживания сырья. Только после этого производится пентозный гидролиз в условиях, исключающих одновременный гидролиз целлюлозы. Для этого используют большую разницу коэффициентов б для гемицеллюлоз и целлюлозы. Например, при получении пентозных гидролизатов из хлопковой шелухи водную обработку ведут 1—2 ч при 120° С, после чего остаток тщательно отмывают и подвергают кисловке 0,1 %-ной серной кислотой для удаления зольных элементов. Иногда эти обе обработки совмещают. Затем производится пентоз-ныи гидролиз 1—2 ч при 125° С с 0,57о-ной серной кислотой. [c.409]

Для удаления белков из капилляра после каждого разделения во второй серии измерений капилляр сначала промывали в течение 5 минут 0.1 М МаОН и затем 5 минут разделяющим бусрером. Этим способом кондиционирования можно было удалять со стенок капилляра мешающие вещества, внесенные пробой, и в конце концов восстановить свойства капилляра новым буфером. Характеристическая кривая зависимости площади пика от времени миграции в этих случаях не имеет наклона, времена, как и площади пиков, колеблются произвольно. Воспроизводимость площади пика для кальция составляет после 8 вводов пробы 2.0%. Если площадь нормировать дополнительно на время, это значение составляет 1.5%. [c.64]

Для идентификации белковых компонентов 50S субчастицы, формирующих факторсвязьшающий участок, были использованы, в частности, антитела против различных рибосомных белков. Оказалось, что только антитела против белка L7 / L12 ингибировали связьшание EF-G, в то время как антитела против большого разнообразия других белков не влияли на эту функцию. Первоначально из этих опытов был сделан вьшод, что местом присоединения EF-G является белок L7 / L12. Действительно, избирательное удаление белка L7 / L12 то 50S субчастицы (с помощью диссоциации 0,5 М NH4 I с этанолом) приводило к значительному падению связьшания EF-G с рибосомой. Однако сродство не исчезало совсем, а лишь уменьшалось. Было показано, что даже при полном отсутствии белков L7 / L12 на рибосоме EF-G способен, хотя и гораздо менее эффективно, не только связываться, но и осуществлять свои функции в гидролизе ГТФ и в транслокации. Следовательно, белок L7 / L12 лишь помогает связьшанию EF-G, а основным связьшающим компонентом, ввиду отсутствия других причастных белков, должна быть рибосомная РНК. В прямых экспериментах это было подтверждено было найдено специфическое сродство определенного района 23S РНК к EF-G. [c.145]

Другой белок —EF-Тц—поступает на рибосому в виде комплекса Aa-tRNA EF-Tu GTP. В составе такого комплекса он взаимодействует с рибосомой, и можно показать, что место его взаимодействия—50S субчастица. Присутствие EF-G на 50S субчастице препятствует взаимодействию EF-Tu с рибосомой, откуда можно заключить, что EF-Tu-связьшающий участок совпадает или перекрьшается с EF-G-связьшающим участком. Как и в случае EF-G, антитела против белка L7/L12, и только они, ингибируют взаимодействие EF-Tu с рибосомой. Удаление белка L7/L12 сильно уменьшает взаимодействие EF-Тц с рибосомой, но не исключает его полностью, и EF-Tu может вьшолнять свои ф щии на рибосомах без белка L7/L12, хотя не так эффективно следовательно, EF-Tu, по-видимому, тоже связьшается с 23S РНК. [c.147]

Оболочки крабов содержат в пересчете на сухую массу примерно 25% карбоната кальция и 15-20% хитина. Хитин и хитозан получают из при-родаого материала после размалывания и деминерализации соляной кислотой и ферментативного удаления белка обработка каустической содой и перекисью водорода приводит к получению хитина, последующее дезацетилирование — хитозана. [c.345]

Однако при ферментативных воздействиях всегда приходится учитывать, что препарат фермента может обладать неизвестной активностью, способной изменить выделяемый полисахарид. Удаление белка после ферментативной обработки достигается обычно одним из методов денатурирования. К ним относятся нагревание, действие щелочи , хлороформа с амиловым спиртом (особенно распространеньый метод ), трифтортрихлорэтана , трихлоруксусной кислоты фссфоЕольфрамовой кислоты и т. д. Кроме того, используется избирательная сорбция белков на геле фосфата кальция , бентоните или каолине . Зти же методы, конечно, могут применяться и для удаления неферменткых белков, загрязняющих растворы полисахаридов. [c.486]

Деиротеинизацию осуществляют рядом способов. Наиболее рас-фостранено удаление белков с помощью довольно мягкого метода Севага, основанного на обработке раствора полисахаридов, содержащего белок, хлороформом с добавлением бутанола либо пен-ганола, что приводит к денатурации белка. Иногда примесь белка удаляют, растворяя полисахарид в 5—10%-ном растворе трихлор-уксусной кислоты и отделяя коагулирующий в этих условиях бе-ло к. В последнее время для этих целей применяют различные ферментативные препараты — протеазы. [c.46]

Летонов и Рейнгольд [61, 62] производили определение по интенсивной окраске, образующейся при взаимодействии Р-нафтохинон-4-сульфоната натрия с бензидином в присутствии буферной смеси борат натрия — гидроокись натрия при добавлении ацетона для подавления окраски от самого реагента. При анализе сыворотки крови и мочи рекомендуется применять ацетат уранила для удаления белков и ионов фосфата последние также осаждаются бензидином и вызывают ошибки. [c.325]

Лорант [93] осаждал сульфат бензидина из плазмы или сыворотки после удаления белка, растворял осадок в горячей воде, добавлял буферный раствор и п-диметиламино-бензальдегид. Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют с синим светофильтром. К промытым осадкам сульфата бензидина прибавляют раствор гуммиарабика (обработанного бромом для устранения восстановителей с последующим удалением его избытка), затем добавляют их к раствору фосфорномолибденовольфрамовой кислоты и измеряют оптическую плотность синих растворов [69, 71—73]. [c.325]

Образующуюся при гликолизе молочную кислоту после удаления белков и углеводов превращают горячей серной кислотой в уксусный альдегид. Последний обнаруживают по цветной реакции с вератролом (красное окрашивание). [c.154]

Принцип метода состоит в том, что к гомогенату ткани добавляют Na 104 до конечной концентрации 1 М. Это вызывает диссоциацию ДНП на ДНК и белок. После удаления белков смесью хлороформа с изоамиловым спиртом РНК разрушается РНК-азой, а ДНК осаждается изопропанолом [27]. [c.58]

Для удаления белка из биологических образцов были использованы четыре метода, основанные на применении сульфо-салициловой кислоты, пикриновой кислоты, ультрафильтрации и центрифугирования [6, 76, 137—140]. По методу удаления белка с помощью сульфосалициловой кислоты супернатант можно наносить на колонку. При использовании пикриновой кислоты ее избыток можно удалить экстракцией с помощью анионообменной смолы или путем добавления небольших порций этой смолы к супернатанту и последующего фильтрования или декантации с осадка смолы. [c.39]

С печенью, в ряде случаев удоОно предварительно отделить цитоплазму от ядер и использовать только цитоплазму. Это можно осуществить путем экстрагирования гомогенизированной ткани 0,14 М раствором Na l, приводящего к отделению цитоплазматических рибонуклеопротендов от содержащего ДНК ядерного материала. Рибонуклеонротеид осаждают затем из экстракта при pH 4,5 и вновь растворяют его в растворе бикарбоната натрия. Продолжительное встряхивание с несколькими последовательно сменяемыми порциями хлороформа, содержащего небольшое количество октилового спирта, приводит к удалению белка нуклеиновую кислоту, остающуюся в водном растворе, осаждают в виде натриевой соли при добавлении спирта. Можно поступить и иначе вызвать спиртом денатурацию рибонуклеопротеида и экстрагировать нуклеиновую кислоту 10%-ным раствором хлористого натрия, из которого затем осадить ее добавлением двух объемов спирта [1—4]. Примерно аналогичный метод существует и для выделения РНК из животных тканей [5]. В этом случае нуклеиновую кислоту осаждают из раствора солянокислого гуанидина, в котором белок нерастворим для удаления белка можно использовать также додецилсульфат натрия [6, 7]. [c.40]

Полипептиды. Часть полипептидов поступает в кровь из кишечника при переваривании белков (стр. 328) другая часть является промежуточными продуктами распада белков тканей. Определение полипептидов, как и аминокислот, в плазме или сыворотке производится после удаления белков. Освобождение плазмы или сыворотки от белков достигается осаждением их трихлоруксусной кислотой, фосфорновольфрамовой кислотой и др. (стр. 23). В зависимости от способа удаления белков получаются различные числа, характеризующие содернсанпе полипептидов в плазме или сыворотке. Обычное содержание азота полипептидов составляет в норме от 0,1 до 3 мг%. [c.479]

В современных методиках выделения ДНК (обзоры — см. ) основной стадией является обычно экстракция биологического материала фенолом 9. При этом ДНК после разделения слоев переходит в водный слой или остается в виде осадка в интерфазе, а большая часть белка денатурирует и переходит в фенольный слой. Для удаления белка из препаратов ДНК используют также обработку детергентами смесью хлороформ — изоамиловый (или октиловый) спирт а также инкубацию с протеолитическими ферментами, например с проназой РНК отделяют от ДНК фракционным осаждением спиртом и обработкой препарата рибонуклеа-зами. Большая часть полисахаридов обычно удаляется при фракционном осаждении этанолом или изопропанолом в некоторых случаях приходится применять дополнительную очистку (экстракция метилцеллозольвом, фракционирование цетавлоновых солей, электрофорез). [c.29]

Примесь белков удаляется при помощи трихлоруксусной кислоты (ТХУ) полисахарид растворяют в 5—10%-ной ТХУ, отделяют белковый коагулят центрифугированием, а затем из раствора осаждают полисахарид спиртом. Иногда такие переосаждения полисахарида из раствора в ТХУ повторяют. Метод хорош для освобождения от белков, но не безразличен для полисахарида, вызывая некоторую деполимеризацию (см.с. 109). Более щадящим является метод Севага при обработке раствора полисахарида хлороформом с амиловым спиртом белок собирается на поверхности раздела хлороформ— водный раствор. Пользуются и рядом других реагентов и методов для удаления белков фосфорновольфрамовой кислотой, нагреванием, действием протеолитических ферментов, сорбцией белков на каолине и других сорбентах. [c.55]

Опытную пробу инкубировали в течение 15 мин. при 37°. Контролем служила параллельно инкубируемая проба, но без добавления АТФ. Активность глюкокиназы определяли по разнице содержания глюкозы в опытной и контрольной пробах после их инкубации. Полученную величину относили к 10 мг белка экстракта. Глюкозу определяли по Хагедорну-Иенсену после удаления белка кадмиевым способом. Фруктозу определяли по Роэ [И], белок — биуретовым способом [12]. [c.191]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология