Мелиттин

Яды таких хорошо известных насекомых, как пчелы и осы, (многими из нас испытанные на себе) представляют собой довольно сложные смеси различных веществ, и в качестве основных активных компонентов также содержат полипептиды. Мелиттин — основной компонент яда пчелы медоносной (его содержание достигает 50%) состоит из 26 аминокислотных остатков. В отличие от предыдущих групп нейротоксинов, его молекула не содержит цистеина вообще. Кроме мелит-тина, следует отметить МСО-пептид (22 аминокислоты) и апамин (18 аминокислот) — молекулы этих полипептидов содержат по 4 цистеиновых остатка, т.е. по два дисульфидных мостика (схема 4.4.4). [c.83]

Каждый из этих полипептидов обладает различной физиологической активностью мелиттин является ионо-фором, вызывает прямой гемолиз тучных клеток, очень эффективный детергент, обладает ганглиоблокирующим действием МСО-пептид дегранулиру-ет тучные клетки, высвобождает гистамин из них, его противовоспалительный эффект в 100 раз превышает действие гидрокортизона апамин действует на Са - и К -зависимые каналы нервной системы, под его действием усиливаются моносинаптические раз-гибательные и полисинаптические сгибательные рефлексы, т е. широта спектра физиологического действия яда пчелы обусловлена разнообразием его полипептидного состава. [c.83]

Среди исследованных в литературе олигопептидов есть несколько сравнительно высокомолекулярных объектов. Самым крупным из них является N-концевой фрагмент мембранного глобулярного белка мелиттина (20 аминокислотных остатков). Впервые его конформационные возможности с помош ью фрагментарного подхода были рассчитаны Шерагой и соавт, [283]. Найденные две низкоэнергетические структуры напоминали друг друга и состояли в основном из 4,5 остатков а-спирали. Похожие конформации фрагмента мелиттина были получены позднее и в работах [284— 286] при использовании других расчетных методов. Результаты теоретического анализа качественно согласуются с данными рентгеноструктурного анализа [287] и ЯМР-спектроскопии [288] о пространственном строении мелиттина в кристалле и растворе. [c.395]

Главным компонентом пчелиного яда является мелиттии — иа его долю приходится 30 — 50% массы высушенного яда. Мелиттин был выделен Э. Хаберманом в Германии, и в этой же лаборатории в 1967 г. была установлена его первичная структура. Молекула токсина содержит 26 аминокислотных остатков, С-концевая карбоксильная группа его амидирована [c.278]

Большое число работ посвящено изучению взаимодействия мелиттина с природными и искусственными мембранами и выяснению конформации токсина, связанного с липидами. Обнаружено, в частности, что мелиттин индуцирует в бислоях ионную проводимость. Характер зависимости этой проводимости от приложенного к мембране потенциала позволил высказать предположение [c.279]

Основные компоненты яда и их характеристика. Прозрачная с желтоватым оттенком жидкость, несколько вязкая, со специфическим ароматическим запахом и горьким вкусом относительная плотность 1,13, реакция кислая. Яд разрушают крепкие кислоты, длительное воздействие солнечных лучей и нагревание в течение 15 мин при температуре +150 °С. При нагревании яда до 100 °С в течение 30 мин разрушаются те компоненты, которые вызывают судороги, а при нагревании в течение 15 мин при той же температуре разрушаются компоненты, вызывающие местное, кожное действие. В состав пчелиного яда входит несколько групп биологически активных веществ. В первую группу входят ферментные белки, среди которых наибольшее значение имеют фосфолипаза А2, гиалуронидаза и кислая фосфатаза. Вторую группу составляют токсические полипептиды мелиттин, содержание которого в цельном яде составляет до 50 %, апамин, МСД-пептид, тертнапин, секапин. Третью группу составляют биогенные амины — гистамин, дофамин, норадреналин. Химический состав яда, содержание в нем мелиттина и гистамина в значительной степени зависят от возраста пчелы. [c.734]

Фрагмент 18-39 АКТГ Фрагмент 1-24 АКТГ Мелиттин Глюкагон -Эндорфин [c.64]

Литчфилд и др. (Lit hfield et al., 1981) разработали чувствительный и быстрый метод определения дигоксина с использованием заключенной в липосомы щелочной фосфатазы и конъюгата уабаин — мелиттин. Уабаин представляет собой аналог дигоксина, а мелиттин — 26-членный литический пептид из пчелиного яда. [c.22]

Литическую активность конъюгата [уабаин—мелиттин] измеряли при 37 °С, добавляя его к 2 мл суспензии липосом в трис-буфере, содержащем 2 мМ -нитрофенилфосфат. По поглощению при 410 нм определяли количество освободившегося фермента и вычисляли концентрацию литического конъюгата. Неожиданно выяснилось, что литическая активность конъюгата [уабаин—мелиттин] несколько выше, чем у мелиттина, хотя уабаин не обладает литическим действием. При выполнении гомогенного иммуноанализа дигоксина инкубировали различные его количества в трис-буфере при 37 С в течение 5 мин с антителами к дигоксину (константа связывания >10 л/моль), конъюгатом [уабаин—мелиттин] и субстратом фермента, а затем добавляли липосомы. [c.124]

Рис. 9 5. Влияние специфических антител на литическую активность конъюгата [определяемое вещество — цитолизин]. Различные количества антител против дигоксина, очищенных иммунологическими методами, инкубировали 5 мин при 37 °С с конъюгатом [уабаин — мелиттин] (20 нм) и затем добавляли липосомы.

Рис. 9-6. Гомогенный иммуноанализ дигоксина с использованием липосом и конъюгата [определяемое вещество — цитолизин]. Различные количества свободного дигоксина инкубировали 5 мин при 37 °С с конъюгатом уабаин — мелиттин] (20 нМ) и антителами (78 нМ). Затем добавляли липосомы и измеряли активность освободившегося фермента, регистрируя поглощение при 410 нм.

Указанных недостатков лишен иммуноанализ на основе цитолизина (рис. 9-4), в котором используют липосомы с одной полостью, образующиеся при удалении детергента диализом. Новый метод не требует ни присоединения лекарственного препарата к липосомам, ни использования комплемента и обеспечивает быстрый лизис везикул. Липосомы, применяемые для анализа по этому методу, при хранении в замороженном виде в атмосфере аргона устойчивы в течение одного года (т. е. непроницаемы для заключенной в них щелочной фосфатазы), нО теряют устойчивость при удалении из их состава холестерола. Как показала электронная микроскопия с негативным окрашиванием, средний размер везикул составляет примерно 0,2 мкм. Добавление к везикулам конъюгата [уабаин—мелиттин (20 нмоль/л) сразу же вызывает полный лизис, но лизиса не происходит в случае предварительной инкубации конъюгата с избытком антител против дигоксина (рис, 9-5). Проводя такую инкубацию в присутствии известных количеств дигоксина, можно построить калибровочную кривую (рис, 9-6). [c.127]

Важное преимущество нового метода состоит в том, что одни и те же липосомы можно использовать с разными конъюгатами [цитолизин—определяемое вещество], в частности с конъюгатами [цитолизин—гаптен]. Действительно, липосомы,. которые применялись в описанных здесь опытах, были использованы также с конъюгатом [биотин—мелиттин] для определе- [c.127]

Асиалогликопротеиновый рецептор из печени и мелиттин, активное начало пчелиного яда, встраиваются в плоскую мембрану, только если на нее подано напряжение более 20 мВ. Мелиттин— короткий полипептид (26 аминокислотных остатков), так что нетрудно представить механизм А ф-зависимого встраивания в мембрану, включающий трансмембранный электрофорез определенных участков этой молекулы. [c.167]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология