нитрофенилфосфат

Рис. 86. Обработка с помощью уравнения (8.26) полной кинетической кривой гидролиза я-нитрофенилфосфата под действием щелочной фосфатазы (Д = 1 час)

Принципиальная идея здесь заключается в том, что ферментный субстрат следует превратить в окрашенный продукт, В случае щелочной фосфатазы обычно используют п-нитрофенилфосфат или аналогичный ароматический фосфат [c.597]

В таблице 5 приведена кинетика накопления п-нитрофенола в реакции гидролиза я-нитрофенилфосфата, катализируемого щелочной фосфатазой [6]. Определить значения т и Кт(кат) ферментативной реакции. [c.173]

При определении активности щелочной фосфатазы в лаборатории используют различные субстраты Р-гли-церофосфат, р-нафтилфосфат, п-нитрофенилфосфат, аде-нозин-5-монофосфат и др. п-Нитрофенилфосфат расщепляется щелочной фосфатазой в три раза быстрее, чем другие субстраты, поэтому чаще используется в лаборатории. , [c.196]

Кинетика накопления п-нитрофенола в реакции гидролиза п-нитрофенилфосфата, катализируемого щелочной фосфатазой. Условия опыта pH 8,0 25°С Ш трис-буфер [SJo = 5,1-10- М [c.174]

Диэтил- -нитрофенилфосфат Нитрит 83 [c.379]

Оптическая плотность для 5 -аминосалициловой кислоты измеряется при 450 нм, для о-фенилендиамина — при 492 нм, для 4-нитрофенилфосфата — при 405 нм. [c.320]

Субстрат — 0,4%-ный раствор п-нитрофенилфосфата натрия в 0,001 моль/л растворе соляной кислоты. Чаще встречающуюся бариевую соль к-нитрофенилфосфата можно перевести в ее натриевую соль. [c.227]

Как примечание к разделу, посвященному синтезу нуклеотидов, необходимо упомянуть простой ферментативный метод. Неочищенная фосфотрансфераза, полученная гомогенизацией проростков пшеницы, использует 4-нитрофенилфосфат в качестве фосфорильного донора для избирательного фосфорилирования 5 -положения нуклеотидов с практически количественным выходом за несколько часов [93]. Реакция может быть проведена в большом масштабе, и нет необходимости защищать другие реакционноспособные группы. [c.171]

Об активности щелочной фосфатазы судят по количеству -нитрофенола, образующегося при гидролизе п-нитрофенилфосфата под действием фермента. [c.196]

При помощи этого метода были идентифицированы различные хлорсодержащие пестициды в качестве фермента использовали фосфатазы, субстратом служил нафтил- или нитрофенилфосфат [119]. [c.87]

Если рассмотреть теперь другую сторону ряда величин Р, то очень малые значения характерны для анионоидных форм и уменьшаются от 0,39 для 0-диалкил-п-нитрофенилфосфатов [77] до 0,15 [c.202]

ДЛЯ п-нитрофенилфосфата [80]. В случае последнего соединения заряженные нуклеофилы обычно мало реакционноспособны, и незаряженные нуклеофилы, такие, как амины и имидазолы, относительно более активны (см. ниже). Для этих случаев найдено доказательство промежуточного образования четвертичного аммониевого основания, которое быстро гидролизуется в соответствующую кислоту. [c.203]

Для щелочной фосфатазы 4-нитрофенилфосфат 10 мг субстрата растворяют в 10 мл буфера, который готовят следующим образом 97 мл диэтаноламина смешивают с 800 мл воды, добавляют 0,2 г NaNs, 0,1 г Mg l2-6H20 и доводят pH до 9,8 с помощью 1 н. раствора НС1 общий объем доводят до 1 л и хранят в темноте при комнатной температуре. [c.319]

Дифенил-2,6-диметил-4-нитрофенилфосфат [c.333]

Влияние концентрации арилсульфатазы на скорость гидролиза п-нитрофенилфосфата до и после диализа препарата фермента [c.123]

Неконкурентное ингибирование вызывается веществами, не имеющими структурного сходства с субстратами и часто связывающимися не с активным центром, а в другом месте молекулы фермента. Степень торможения во многих случаях определяется продолжительностью действия ингибитора на фермент. При данном типе ингибирования благодаря образованию стабильной ковалентной связи фермент часто подвергается полной инактивации, и тогда торможение становится необратимым. Примером необратимого ингибирования является действие йодацетата, ДФФ, а также диэтил-и-нитрофенилфосфата и солей синильной кислоты. Это действие заключается в связывании и выключении функциональных групп или ионов металлов и молекуле фермента. [c.150]

Кинетику гидролиза п-нитрофенилфосфата, катализируемого щелочной фосфатазой, изучали по образованию /г-нитрофе-нола и фосфат-иона (продукты 1 и 2 схемы 7.1 соответственно). Было найдено, что при проведении ферментативной реакции в 1М трис-буфере (1М водный раствор трис-оксиметил-З-аминометана) отношение концентраций продуктов Р1/Р2 в процессе реакции равнялось 2,1. Исходя из предположения, что трис-буфер принимает участие в ферментативной реакции в качестве дополнительного нуклеофильного агента [10], определить отношение констант (см. схему 7.12). [c.153]

Различают три типа К. А-эстеразы, или арилэстеразы, к-рые специфичны в осн. по отношению к эфирам фенолов, не ингибируются диэтил-п-нитрофенилфосфатом (Е-600), гидролизуют его В-эстеразы, или алиэстеразы, гидролизующие эфиры алифатич. спиртов и ингибируемые Е-600 С-эстеразы, к-рые не ингибируются Е-600 и не гидролизуют его. [c.322]

Эти авторы нашли, что реакция имеет общий характер и что фосфаты реагируют с ангидридами и хлорангидридами других кислот. Так, при взаимодействии п-толуолсульфохлорида с дибен-зилфосфатом образуется тетрабензилпирофосфат (С R = С6Н5СН2). Аналогично из ди-м-нитрофенилфосфата и п-нитробензолсульфо-хлорида получен очень реакционноспособный пирофосфат (С [c.111]

Прп определении диэтил-ге-нитрофенилфосфата восстанавливают [79] нитрогруппу этого соединения до аминогруппы кипячением с цинковой пылью в солянокислой среде и полученное аминосоединение после добавления КВг титруют 0,01 М раствором NaNOa потенциометрически (электроды Pt — С). [c.274]

Аналогичным образом общий основной катализ также наблюдается для реакции вторичных аминов с /г-нитрофенилфосфатом [62], несмотря на то что в данном случае реакция протекает у ароматического атома углерода. Хлорангидриды кислот пятивалентного фосфора, цианзамещенные производные фосфорных кислот и пирофосфаты реагируют с -бутиламином с образованием соответствую- [c.198]

Аналогичным образом в реакциях фосфорсодержащих соединений, например, хлорангидрида 0,0-дифенилтио( )осфорной кислоты, скорость хорошо соответствует значениям р/Са кислород- или серусодержащих нуклеофилов [185] (рис. 5-27), несмотря на то что реакция проводилась в /прет-бутаноле. Смысл кривизны на рис. 5-27 неизвестен, хотя для этой среды с низкой диэлектрической проницаемостью большое значение должно иметь существование ионных пар. Высокая скорость реакции фторид-иона с диизопропил-хлорфосфатом [182] (в этаноле) должна быть связана с большим вкладом кулоновского члена в энергию Р—F- связи. Нуклеофильный порядок по отношению к /г-нитрофенилфосфату [186] определяется главным образом электростатическим отталкиванием из-за большего отрицательного заряда на этом эфире например, пиридин в 30 раз более реакционноспособен, чем гидроксил-ион. [c.242]

Электрохимическое восстановление серии нитрофенилфосфатов было изучено Гюликом и Джеске [37]. В серию входили диэтил- [c.341]

Был зарегистрирован спектр ЭПР, свидетельствующий об образовании смеси анион-радикалов нитрофенилфосфата (ХП) и 4,4 -динитродифенила (XIII). Как показано кулонометрией, на 1 моль вещества расходуется 4 фарадея электричества, что согласуется с предложенной схемой. [c.382]

Как видно из приведенных в табл. 14 данных, нафтилфосфат оказался более чувствительным субстратом, чем нитрофенилфосфат. [c.87]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология