Применение мембранных методов крови

Сравнительно новой разновидностью зонального электрофореза является электрофорез на ацетат-целлюлозной мембране [6]. Ацетат-целлюлозная мембрана, по-видимому,— очень хорошая поддерживающая среда, уже нашедшая благодаря ряду достоинств широкое применение. Выше мы отмечали, что приготовление крахмального и агарового гелей—довольно трудоемкая операция, осложняющая метод. В то же время способы предварительной обработки ацетат-целлюлозной мембраны почти так же просты, как и в случае с фильтровальной бумагой. При этом разделение белков происходит лучше и быстрее, а для анализа достаточно 5—1000 мкг белка, растворенного в объеме 0,1—10 мкл. Как белки, так и гликопротеиды очень хорошо окрашиваются на ацетат-целлюлозной мембране, поэтому она является прекрасной поддерживающей средой с точки зрения количественной оценки этих соединений. Электрофорез на ацетат-целлюлозной мембране позволяет получить больше белковых фракций сыворотки крови, чем электрофорез на бумаге, но меньше, чем электрофорез в крахмальном геле. С помощью электрофореза на ацетат-целлюлозной мембране можно определять весьма малые количества индивидуальных белков, благодаря чему он очень подходит для анализа гомогенности выделенного нативного белка. Ацетат-целлюлозные мембраны могут быть использованы также в опытах по иммунодиффузии, что является еще одним достоинством этого метода электрофореза. [c.14]

Для удаления фенолов из плазмы и крови был применен метод экстракции с 41 помощью жидких мембран [261] состава 90% парафинового масла, 5% -00 додеканола и 5% лецитина диспер- О 50 100 ]50 t,миl тированная фаза содержала уридин- [c.241]

Процесс диффузии находит широкое применение в медицине. Так, например, метод диализа, основанный на избирательной диффузии низкомолекулярных веществ через полупроницаемую мембрану вдоль градиента концентрации, используется в клинической практике при создании аппаратов искусственная почка . Частицы ВМС не проходят через полупроницаемую мембрану. Поэтому биологические жидкости, например плазму крови, можно методом диализа очистить от вредных низкомолекулярных веществ — шлаков (мочевины, мочевой кислоты, билирубина, аминов, избытка ионов К и т.д.), накапливающихся при различных заболеваниях (рис. 2.13). При очистке кровь больного, отведенная из вены, поступает в специальные камеры [c.65]

Конечную точку ацидиметрического титрования карбонатов кислотой можно определять потенциометрическим методом. В последнее время применяют ионоселективные электроды. Для определения в крови газов при содержании СО2 более 20 мкг/мл применен электрод, селективный к СО2 [38]. Электрод содержит полимерную мембрану, которая отделяет анализируемый раствор от пленки раствора НаНСОз, заключенной между собственно электродом и чувствительной поверхностью стеклянного электрода. СО2 диффундирует через мембрану. [c.49]

Примененние внутри аортальных насосов-баллончиков является развитием метода использования насосов-контрапуль-саторов — бесклапанных мембранных устройств, присоединяемых к внешней стороне аорты или других крупных артерий и помогающих засасывать и выталкивающих некоторый объем крови, способствуя этим работе левого желудочка сердца. [c.110]

Рис. 5. Применение метода геномной дактилоскопии для сравнения ДНК из нормальной и неопластической тканей. На автографе представлены образцы ДНК, выделенной из периферической крови (В), нормальной слизистой (М) и опухолевой ткани (Т), полученных от трех больных с злокачественными опухолями желудочно-кишечного тракта. ДНК (Ю мкг) была гидролизована Hinll и разделена электрофорезом в 1,0 /о-ном агарозном геле при 2 В/см в течение 48 ч, после чего перенесена на найлоновую мембрану и гибридизо-вана с пробой на основе минисателлита 33.15. У первого пациента в отпечатке опухолевой ДНК наблюдается отклонение от нормы в виде двух новых полос (а, Ь). У второго пациента полоса (с) присутствует в ДНК лейкоцитов периферической крови и в ДНК нормальной слизистой толстой кишки, но отсутствует в ДНК, выделенной из клеток опухоли толстой кишки. У третьего пациента новая полоса (d) появилась в отпечатке ДНК, выделенной из клеток опухоли желудка. Как и ожидалось, отпечатки ДНК нормальных лейкоцитов и ДНК клеток нормальной слизистой не отличаются, В трех случаях появление новой полосы сопровождалось падением интенсивности высокомолекулярной полосы, следовательно, механизм появления новой полосы в субпопуляции опухолевых клеток может заключаться в неравном кроссинговере, приводящем к потере родительским аллелем нескольких копий повтора и, следовательно,

II. Отторжение красителя. К прижизненным красителям, используемым для оценки целостности мембран, относят трипановый синий, эозин V, нафтоловый черный, нигрозин (зеленый), эритрозин В и зеленый прочный. Для оценки жизнеспособности более надежным способом является окрашивание клеточных суспензий, поскольку при окрашивании прикрепленных клеток они могут открепляться от субстрата и теряться. Главным недостатком этого метода является невозможность выявления клеток с нарушенной способностью к размножению. Так, было показано, что клетки, не способные к клонообразованию, характеризуются 100%-ной выживаемостью при тестировании на отторжение красителя [34]. Метод, однако, удалось обновить, и введенные в него технические усовершенствования позволили в какой-то степени разрешить присущие ему проблемы. В методе, предложенном Вейзенталем с сотрудниками [35], выбран 4-дневный период исследований, в течение которого клетки с нарушенной способностью к размножению теряют целостность мембран. Артефакты, связанные с размножением жизнеспособных клеток или лизисом погибших клеток, корректируются путем добавления в суспензию фиксированных утиных эритроцитов в качестве внутреннего стандарта. При сравнении трех методов анализа подсчет клеток, определение жизнеспособных клеток и определение отношения числа жизнеспособных клеток к числу эритроцитов — выявляется повышенная чувствительность последнего метода (рис. 8.5). Этот метод с равным успехом был применен к солидным опухолям, клеткам выпотов и злокачественным клеткам крови. [c.270]

Возможность применения липосом для лекарственной и ферментативной терапии, в генной инженерии основана иа их нетоксичности. Однако взаимодействие липосом с клетками не всегда лишено опасности для последних. Уже многими исследованиями показано, что введение высоких доз липосом способно вызывать гибель животных, эпилептические припадки и некроз тканей мозга, увеличение содержания глюкозы в крови и ткани мозга, нарушение целостности лизосом в клетках печени (только положительно заряженных липосом). В зависимости от состава липосомы могут проявлять токсическое действие в отношении НеЬа клеток, останавливать пролиферацию опухолевых клеток. Помимо токсических свойств чужеродных липидов существуют еще и трудности иммунологического характера, так как часть молекулы фермента, включенного в липосому, может локализоваться на внешнем ее монослое. Эти и другие потенциальные препятствия на пути применения липосом усложняют поиск подходов и методов процессов слияния липосом с ПЛМ и клеточными мембранами. [c.145]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология