Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Методы установления положения меченого

Таблицам предпосылается краткое теоретическое введение, а в заключение этой части приводится литературный материал по методам установления положения меченого элемента в органической молекуле. Таблицам предпосылается <a href="/info/656297">краткое теоретическое введение</a>, а в заключение этой части приводится литературный материал по методам установления положения меченого элемента в органической молекуле.

    Методы установления положения меченого элемента в органической молекуле [c.137]

    Расщепление кислот по Гофману и Курциусу представляет собой один из наиболее безупречных методов установления положения меченых атомов углерода в кислотах и их производных. [c.468]

    В некоторых случаях достаточно самого факта более или менее эффективного включения предшественника, меченного С или Н, в конечный продукт превращения. В более общем случае, однако, желательно или даже необходимо определить распределение метки в молекуле продукта реакции. Например, классическим доказательством поликетидной гипотезы явилось выяснение того факта, что метка из [1- С]- или [2- С] ацетата располагается в чередующихся атомах углерода [2, И]. Именно относительная трудность установления распределения метки в наибольшей степени ограничивает сферу применения радиоизотопного метода. Определение положения меченых атомов в молекуле предполагает расщепление последней с помощью химических реакций, характеризующихся гарантированной специфичностью и высоким выходом, до все более и более мелких фрагментов — в идеале до одноуглеродных молекул типа СОг или метиламина [109]. Большое значение при этом имеет чистота реагентов и продуктов деградации. Реакции, конечно, могут проводиться только последовательно, и даже самому искусному экспериментатору при самой скрупулезной работе часто необходимо значительно большее количество вещества, чем может быть получено в биосинтетическом эксперименте. [c.472]

    Наиболее универсальными и быстрыми методами контроля чистоты меченых соединений являются распределительная хроматография на бумаге [161] и в тонких слоях [162]. Эти методы позволяют не только установить факт наличия примесей, но и выяснить их природу. Известно, что идентификация примесей с помощью метода бумажной хроматографии основана на специфи- ческих качественных реакциях искомого вещества и установлении по ним положения пика этого вещества на хроматограмме. Роль характерных реакций может выполнять радиоактивность соответствующих продуктов. Тогда положение веществ, выражаемое величиной Rf, устанавливается путем наблюдений за радиоактивностью отдельных участков хроматограммы. [c.91]

    Весьма оригинальной модификацией методики Воля является способ, предложенный Вейгандом 136]. Он заключается в том, что оксим аль-формы углевода взаимодействует с 2,4-динитрофторбен-золом. Продуктами реакции являются 2,4-динитрофенол, НСЫ и низший сахар. Таким способом из оксима О-глюкозы получена О-арабиноза с выходом 61 %, а из О-галактозы—О-ликсоза. Метод использован для деградации глюкозы с целью установления положения меченых атомов [37]. [c.37]


    Использование изотопов в изучении биогенеза. Установление структуры семейств природных веществ создало основу для нредиоложения о том, какие типы синтетических переходов совершаются посредством ферментативных систем в организмах. Исследование взаимосвязей, существующих между структурами различных соединений, подчас заставляет предполагать, что одно соединение является промежуточным в биогенетическом синтезе более сложного вещества. В этом разделе приводится пример экспериментального подхода к проблеме биогенеза. Ранее сделанное разумное предположение, что аминокислоты — предшественники алкалоидов в метаболизме растений, в последнее время было доказано путем использования молекул, содержащих изотопы углерода, азота, кислорода или водорода. Метод включает следующие операции 1) синтез определенной аминокислоты с помощью изотопов, занимающих известное нололгепие в молекуле 2) метаболизм меченой молекулы в растении 3) изоляция данного алкалоида 4) определение содержания изотопа в алкалоиде и деструкция молекулы с тем, чтобы показать положения меченого атома в молекуле. Принципы использования этого метода будут показаны на нримере их прилон ения к биогенезу никотина. [c.553]

    С помощью метода меченых атомов был установлен также механизм изомерных превращений монометилнафталинов. Оказалось, что при изомеризации 1-метилнафталина-1-С над алюмосиликатным катализатором при 320° метильная группа перемещается главным образом (на 94,5%) в положение 2 [246]. [c.31]

    Ядерный магнитный резонанс выгодно применять для установления структуры сложных органических соединений и изучения сложных реакциоиных смесей. Этот метод дает огромную экономию труда и времени при изучении различных молекулярных перегруппировок при работе с соединениями, меченными изотопом С , можно установить положение С з в. молекуле непосредственно, не проводя многостадийных деструкций. [c.759]

    Теперь точно так же поступают с тремя другими наборами фрагментов, полученными в результате специфического выщепления соответственно остатков G, А и Т из исходного олигонуклеотида (рис. 1). На схеме мы видим, что меченые фрагменты, полученные при выщеплении остатков G, движутся со скоростью, соответствующей олигонуклеотидам длиной в 5 и 9 нуклеотидных звеньев таким образом, остатки 6 и 10 в исходном олигонуклеотиде должны быть G. Из третьего набора фрагментов, полученного удалением А, следует, что в положениях 2, 5 и 9 были остатки А четвертый набор фрагментов, полученный выщеплением остатка Т, указывает на присутствие остатков Т в положениях 3 и 8. В нижней части рис. 1 дана нуклеотидная последовательность, установленная с помошью этой простой процедуры и некоторых рассуждений. Этим методом часто быстрее чем за 2 дня может быть определена нуклеотидная последовательность олигонуклеотидов, содержащих 200 и даже большее число остатков. [c.889]

    Механизм этой реакции, обладающей отличительными признаками нуклеофильного замещения, был недавно установлен при помощи метода радиоактивных индикаторов. Было показано, что хлорбензол, меченный радиоактивным углеродом С " по углероду, к которому присоединен галоген, при действии ЫаЫНг в жидком аммиаке дает смесь равных частей анилина, меченного в положении 1, и анилина, меченного в положении 2. Этот результат позволяет предположить для названий реакции механизм, соответствующий схеме 2) и включающий промежуточное образование ацетиленового соединения особого типа (V), называемого дегидробензолом . Электронная структура дегидробензолов еще мало известна, но ясно, что они образуются в результате реакции отщепления  [c.187]

    Первый эксперимент с применением метода центрифугирования в градиенте плотности [461] особенно наглядно продемонстрировал значение этого метода. В этом эксперименте бактерии выращивались на среде, богатой № , и поэтому дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) организмов, меченных изотопом тяжелого азота, обладала несколько большей плотностью, чем обычная ДНК. Через определенное время бактерии переносили в среду с обычным распределением изотопа азота и методом центрифугирования в градиенте плотности анализировали изменения плотности ДНК, выделенной из ряда последовательных генераций клеток. На основе предположения Уотсона и Крика [30] было принято, что редупликация ДНК во время деления клеток включает разделение двух цепей двойной спирали (см. стр. 130), причем каждая цепь служит матрицей для синтеза дополняющей ее цепи. Если этот механизм достоверен, то вторая генерация клеток, происходящих от клеток, меченных N , должна содержать ДНК, в которой изотопом тяжелого азота мечена одна из цепей каждой двойной спирали. В последующих генерациях должно возрастать количество ДНК с обычным распределением изотопов азота, однако при этом сохраняется также некоторое количество наполовину меченной ДНК. В любой данный момент времени в растворе должны присутствовать молекулы ДНК только с тремя четко определенными плотностями и никаких компонентов с промежуточной плотностью обнаруживаться не должно. Это предположение было полностью подтверждено данными по ультрацентрифугированию в градиенте плотности (рис. 55), и поэтому механизм редупликации ДНК, который раньше был лишь плодом смелых теоретических представлений, можно считать в настоящее время окончательно установленным. В относительно короткое время после этого классического эксперимента метод центрифугирования в градиенте плотности различными путями способствовал развитию биохимических исследований. Можно привести несколько примеров, иллюстрирующих это положение. Методом меченых атомов, подобным описанному выше, было установлено, что некоторая часть рибонуклеиновой кислоты (РНК) переходит в последующие генерации клеток в нативной форме [468]. Было найдено, что плотность ДНК является линейной функцией содержания гуанина и цитозина в различных микроорганизмах, и, таким образом, ДНК, выделенная из какого-либо вещества, образует в градиенте плотности полосу с характерным расположением [469, 470]. На диаграмме градиента плотности ДНК, полученной из тканей высших организмов, периодически обнаруживаются сателлит-ные полосы [471], которые могут быть обусловлены симбиозными организмами или другими, еще неизвестными причинами. Типичный пример этого эффекта изображен на рис. 56, который, между прочим, наглядно свидетельствует также о чувствительности метода обнаружения малых [c.165]



Смотреть страницы где упоминается термин Методы установления положения меченого: [c.236]   
Изотопы в органической химии (1961) -- [ c.0 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

меченый



© 2024 chem21.info Реклама на сайте