Градиентное элюирование продолжительность

В колоночной хроматографии проводят разделение макроколичеств веществ, при этом пробу в виде раствора отмеряют обычной мерной посудой. Подвижную фазу вводят в верхний конец колонки из резервуара, используя способ нисходящей хроматографии, при которой подвижная фаза движется под действием поля земного притяжения. При небольшой скорости передвижения жидкости в колонке продолжительность анализа сокращают, повышая давление. Обычно непродолжительным считают разделение со скоростью 1—20 мм мин- или 1—10 мл-мин . При проведении градиентного элюирования или при проявлении хроматограммы (см. стр. 344) применяют простую установку, приведенную на рис. 7.9. Она состоит из двух склянок с тубусами. В сосуд А вводят чистый растворитель Ьд, в сосуд Б — растворитель Ьб- При переходе растворителя Ьд в сосуд Б с одновременным переходом подвижной фазы из сосуда Б в разделительную колонку концентрация вещества А в подвижной фазе постоянно возрастает. [c.352]

Выбрав подходящую колонку, проводят градиентное элюирование в таком режиме, чтобы концентрация сильного растворителя изменялась линейно от О до 1001%, а объем растворителя в 10—15 раз превышал Ут- Если все пики выходят в течение не более чем 25% продолжительности градиента, вполне вероятно, что для данной смеси можно подобрать условия изократического элюирования. В противном случае градиентное элюирование необходимо, и дальнейшее улучшение режима производят на основании анализа распределения пиков по хроматограмме [c.121]

Способ элюирования. В ходе разработки методики разделения многокомпонентной смеси необходимо решить вопрос о режиме элюирования. Анализ современных тенденций в жидкостной хроматографии показывает, что градиентное элюирование довольно редко применяют для анализа химических продуктов, но оно необходимо при разделении сложных смесей биологического происхождения. Существенным недостатком градиентного элюирования является то, что возврат к исходному режиму элюирования по окончании разделения требует довольно значительного времени (чаще всего 15—30 мин). При сравнении возможностей.градиентного и изократического элюирования продолжительность приведения колонки в исходное состояние следует суммировать с продолжительностью градиентного разделения. При таком подходе часто оказывается, что лучше провести длительное изократическое разделение, чем незначительно уступающее ему по продолжительности градиентное. [c.320]

Состав элюента в жидкостной хроматографии имеет решающее значение. Проводя элюирование смесями различного состава, можно за короткое время элюировать из колонки в виде острых хорошо разделенных пиков не только легко элюируемые выбранным элюентом соединения, но и те компоненты пробы, которые таким элюентом постоянного состава элюировались бы с трудом. Градиентное элюирование позволяет значительно сократить продолжительность анализа и существенно улучшить его чувствительность. Разумеется, разрешение в большинстве случаев становится хуже. Все эти вопросы подробно обсуждаются в разд. VI.3.4, здесь же мы только рассмотрим, какая аппаратура применяется при градиентном элюировании. [c.57]

Сведения о продолжительности отдельных ступеней градиентного элюирования или о количестве элюента, необходимом для одного шага программы, указать очень трудно, так как при этом необходимо учитывать длину разделительной колонки, или объем пустот в насадке, скорость потока и т. д. Авторы работы [53] показали, что при ступенчатом градиентном элюировании нельзя, удвоив длину колонки (удвоение объема пустот), просто увеличивать вдвое продо ь жительность ступени элюирования. В каждом конкретном случае необходимо определять свои подходящие параметры. При этом можно исходить из эмпирической зависимости [53], согласно которой [c.147]

С помощью ВЭЖХ можно определять [22] вещества, содержащиеся в вулканизованных резинах (вулканизующие агенты, проти-востарители и др.), а также продукты их химического превращения в процессе вулканизации. При анализе метанольного экстракта из резин используют обра1цённую ВЭЖХ, при этом реверсивная фаза работает с метанолом как элюент. Чтобы с помощью этого метода выделять содержащиеся вещества с различной полярностью, необходимо градиентное изменение состава элюента. При этом хроматографическое разделение начинается с относительно высокой доли водного буферного раствора, обладающего слабой элюентной способностью, чтобы отделить ранее вымытые полярные компоненты. Повышая содержание метанола и соответственно элюирующую способность элюента, можно выделить неполярные составляющие экстракта в зависимости от продолжительности анализа. Например, вначале содержание метанола в элюенте - 60% об., затем в первые 10 мин его содержание равномерно возрастает до 80%, а в последующие 30 мин - до 90%. В большинстве выпускаемых приборов имеется устройство для градиентного элюирования. [c.89]

Градиентное элюирование в ВЭЖХ позволяет существенно уменьшить продолжительность и повысить селективность анализа Авторы работ [3, 4] исследовали пригодность этого етода для микро-ВЭЖХ [3, 4] Хотя микронасосы, позволяю-Щие осуществить градиентное элюирование, выпускаются се- [c.47]

Майер и Фрейлинг [55 ] установили, что аналитическое разделение иттрия, тербия, европия и самария легче осуществить в лактат-ном растворе, чем в цитратном (см. также [22, 62]). Катионный обмен в лактатных растворах изучали также другие авторы [2, 12, 28, 62, 69, 70, 98, 104]. Чтобы сократить продолжительность элюирования, Нервик [61] применил метод градиентного элюирования лактатными растворами с непрерывно повышающейся величиной pH. Разделение следовых количеств радиоактивных элементов происходит лучше, чем разделение миллиграммовых количеств. Метод градиентного элюирования оказался более совершенным по сравнению с другими ранее известными методами разделения смесей редкоземельных элементов, не содержащих носителя. В. К. Преображенский, А. В. Калямин и О. М. Лилова [68] также применили метод градиентного элюирования и добились успешного и [c.322]

При хроматографическом анализе выгоднее всего использовать элюенты постоянного состава. Однако если разделяемая смесь содержит вещества с близкой полярностью и с значительно различающейся полярностью, то при изократном элюировании хроматографический анализ может быть слишком продолжительным, даже если используют оптимальную подвижную фазу. В этом случае рекомендуется градиентное элюирование, т. е. состав подвижной фазы постепенно изменяют — ступенчато или непрерывно. Градиент может быть линейным в зависимости от различия в полярности разделяемых веществ может быть, однако, выгоднее, если концентрация компонента с более высокой элюционной способностью возрастает быстрее в начале или, наоборот, в конце разделительного процесса. Градиентное элюирование связано с некоторыми трудностями, и при оптимизации разделительного процесса к ней, как правило, прибегают после того, как были исчерпаны другие возможности. С больпшми затруднениями при градиентном элюировании встречаются при использовании рефрактометрического детектирования. Все компоненты, составляющие подвижную фа- [c.251]

М раствора азотнокислого серебра и еще 4 раза водой. Органический слой отделяют и упаривают в вакууме до сиропообразного состояния. Примесь 2,6-лутидина удаляют либо продолжительной сушкой остатка в вакууме, либо хроматографией на колонке (7—8X18—25 см) с нейтральной окисью алюминия (III степень активности) при градиентном элюировании (четыреххлористый углерод— -хлороформ ). Выход 45—50%, [а]о + 24° (с 0,33 в хлороформе). [c.363]

Метод ВЭЖХ допускает градиентное элюирование, что позволяет сократить продолжительность анализа и улучшить разделение (см., например, рис. И). Гради- [c.38]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология