Клеточная мембрана очистка

Клеточные стенки у большинства микроорганизмов составляют 10—30% сухого веса клетки [Станиславский, 1971 ]. После очистки от остатков цитоплазмы и цитоплазматической мембраны их количество составляет всего 2—3%. Для водородных бактерий эта величина, по нашим данным, равна 5—7%, что, возможно, связано с их недостаточной очисткой от остатков цитоплазматической мембраны. [c.92]

Созревание аденовирусов происходит в ядрах зараженных клеток. Вирусы этой группы выходят в цитоплазму и культуральную среду, разрушая клетки. Таким образом, как правило, большая часть вируса (до 90%) ассоциирована с клеткой, и эффективность высвобождения вируса из ядерного и клеточного материала зависит от степени разрушения ядерных мембран. В клетках, зараженных вирусом, ядерные мембраны довольно хрупкие, поэтому на поздних стадиях инфекции вирус легко переходит в цитоплазму. Существует множество методов разрушения клеток. Выбор того или иного метода для каждого конкретного случая зависит от количества и природы клеток, подлежащих экстракции. Предлагаемый нами метод удобен для очистки аденовируса 5 типа [11]. [c.263]

Размеры частиц, с которыми мы имеем дело при мембранной фильтрации, имеют чрезвычайно широкие пределы (рис. 2.2). Например, размеры некоторых из самых больших микробных клеток более 10 мкм, а таких биологических объектов, как частицы пыльцы, более 100 мкм. Ближе к нижней границе этой шкалы находятся частицы клеточного уровня — отдельные бактерии имеют размер менее 0,3 мкм. Мембраны нередко используются также в вирусологии (см. гл. 12), и тут мы имеем дело с частицами еще меньших размеров — порядка 10 нм. Для удаления частиц из воздуха также применяются мембраны. В загрязненном воздухе находится множество вредных частиц, и даже чистый воздух содержит различные частицы. Фильтрационную очистку воздуха мы рассмотрим в гл. 14. [c.22]

Клеточные мембраны после выделения из клеток и тщательной очистки остаются связанными с рибосомами и ДНК, представляя собой мембранополирибосомо-ДНКовые агрегаты [c.103]

Энзимотерапия — использование ферментов и метаболитов в качестве лечебных средств 1) заместительная терапия — желудочный сок, пепсин и др. 2) очистка ран, воздействие на избыточно разрастающуюся соединительную ткань (гиалуронидаза, протеина-зы, нуклеазы и др.) 3) ингибирование протеолитической активности с помощью трасилола и др. 4) иммобилизация ферментов с твердым носителем или заключение их в полимерную капсулу. При введении в кровь такие ферменты не разрушаются, а, накопившись в патологическом очаге (например, в случае тромбообразования), оказывают эффект. Наиболее эффективны капсулы, из липидов — липосомы. Ферменты внутри липосом транспортируются через клеточные мембраны и оказывают действие в клетке. [c.78]

Клеточные рецепторы принадлежат к числу мембранных белков. Участок молекулы рецептора, пронизывающий цитоплазматическую мембрану, построен из неполярных аминокислот, в силу чего между (П1м и липидныуп компонентами мембраны осуществляются гидрофобные взаимодепствия. Помимо них рецепторные белки образуют в ряде случаев ковалентные сложноэфирные связи с остатками фосфорной кислоты фосфолипидов мембраны (рис. 1). Тесная связь рецепторного белка с клеточной мембраной диктует необходимость использования для выделения рецепторов солюбилизирующих мембрану детергентов. С целью дополнительной очистки в ряде случаев прибегают к удалению из препаратов рецепторных белков ковалентно присоединенных к ним комг-оиентов клеточной мембраны. [c.8]

Хотя сами по себе вирионы пикорнавирусов не содержат липидов, в клеточных фракциях они часто связаны с мембранами, и для разрушения этой связи обычно применяют детергент в концентрации 17о. Если не удалить клеточные мембраны, то на следующих стадиях очистки не удается освободить вирус от примесей. Использовались самые разные детергенты, начиная с мягкого неионного детергента нонидета Р-40 (N1 -40) и кончая ДД -Na или саркозилом. По-видимому, наиболее разумно использовать мягкие детергенты, так как пустые капсиды и вирионы некоторых вирусов (например, определенных штаммов полиовируса типа 3) могут разрушаться более сильно действующими агентами. Мы, как правило, используем 1%-ный НР-40. [c.59]

Для того чтобы лучше изучить механизм действия PTR, необходимо иметь этот белок в достаточном количестве. Все известные клеточные системы экспрессии in vitro не обеспечивали его эффективного синтеза. Возможно, это связано с аккумуляцией PTR в мембранах трансфицированных клеток. Решить эту проблему можно было бы постоянным удалением плазматических мембран из хозяйских клеток. В такой системе гетерологичный трансмембранный белок связывался бы с отдельными фрагментами плазматической мембраны, что значительно облегчало бы его концентрирование и очистку. Аналогичный механизм используется клетками молочной железы для образования глобул жира в период вскармливания. Жировые капельки инкапсулируются в плазматической мембране и в таком виде секретируются в молоко. [c.432]

Поскольку н Т-, н В-лимфоциты встречаются во всех периферических лимфоидных тканях, нужно было найти удобные методы, которые позволяли бы различать н разделять эти два типа клеток,-только после этого можно было изучать их индивидуальные свойства. К счастью, различительными маркерами могут служить многочисленные белки плазматической мембраны, характерные только для Т- нли только для В-клеток. Один нз наиболее часто используемых шркеров-гликопротеин Thy-], который у мышей имеется на Т-, но не на В-лимфоцитах поэтому антитела к Thy-1 можно использовать для удаления нли очистки Т-клеток из смешанной популящ1н лимфоцитов мыши. Использование антигенных маркеров клеточной поверхности для различения и разделения Т- и В-клеток революционизировало клеточную иммунологию и сыграло важную роль в быстром прогрессе этой области знания в последние годы. У экспериментальных животных и у человека находят все больше и больше новых маркеров, характерных для функционально различных субпопуляций Т- и В-лимфоцитов. [c.11]

Выбор того или иного метода выделения антигенов клеточной поверхности определяется несколькими соображениями. Одно из них — это доступность клеток или тканей в качестве источника антигена. Культуры клеточных линий представляют собой постоянный и очень однородный источник антигенов. Мо лекулы, с которыми специфически реагируют поликлональные и моноклональные антитела, как правило, относятся к интегральным мембранным гликопротендам, поэтому первым этапом очистки этих молекул должно быть выделение мембран. Уже этот этап дает примерно 50-кратиую очистку поверхностных антигенов, так как мембраны содержат около 1% всех белков клеткн. [c.54]

Поверхность клетки играет решающую роль в осуществлении определенных клеточных функций, включая иммунный ответ. Но, несмотря на это, наши знания о структурной организации биологических мембран и о механизме биохимических реакций, которые в них протекают, к сожалению, очень скудны. Для накопления информации в этой области мы должны прежде всего разделить мембраны на определенные субъединицы. При фракционировании мембранных белков и гликопротендов обычными биохимическими методами возникали трудности из-за того, что приходится одновременно очищать много разных белков, имеющих сходные молекулярные размеры или заряд. Применение моноспецифических сывороток для очистки антигенов клеточной поверхности помогает обойти эти препятствия, однако сложность получения таких сывороток ограничивает возможности их использования. [c.68]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология