Выделение бактерий, биологические методы

Методы выделения нуклеиновых кислот. При изучении химического состава и строения нуклеиновых кислот перед исследователем всегда стоит задача выделения их из биологических объектов. В главе 2 было указано, что нуклеиновые кислоты являются составной частью сложных белков — нуклеопротеинов, содержащихся во всех клетках животных, бактерий, вирусов, растений. Нуклеиновые кислоты обладают сильно выраженными кислыми свойствами (обусловлены остатками ортофосфорной кислоты в их составе) и при физиологических значениях pH несут отрицательный заряд. Этим объясняется одно из важных свойств нуклеиновых кислот—способность к взаимодействию по типу ионной связи с основными белками (гистонами), ионами металлов (преимущественно с М "), а также с полиаминами (спермин, спермидин) и путресцином. Поэтому для вьщеления нуклеиновых кислот из комплексов с белками необходимо прежде всего разрушить эти сильные и многочисленные электростатические связи между положительно заряженными молекулами белков и отрицательно заряженными молекулами нуклеиновых кислот. Для этого измельченный путем [c.96]

Шведский ученый Пер-Оке Альбертсон предложил использовать для разделения бактерий, вирусов, фрагментов клеток, мембран, ядер, белков, нуклеиновых кислот и любых других частиц биологического происхождения двухфазные водные растворы полимеров — иолиэтиленгликоля, декстрана и их производных [2, 279, 280]. Фракционирование в двухфазной водной системе основывается на избирательном распределении частиц между этими фазами, аналогичном распределению растворимых веществ. Метод Альбертсона получил широкое распространение и используется во многих биохимических и микробиологических лабораториях, так как позволяет в мягких условиях, без нарушения структурной целостности и изменения нативных свойств осуществлять выделение и очистку лабильных биологических объектов, а также дать определенную информацию о их строении. Реализация этого метода в промышленном масштабе, например, для выделения вирусов или получения чистых ферментов, не встречает, по мнению автора, принципиальных трудностей, однако в очистке воды он не может быть использован. Очевидно, и любая другая модификация экстракции жидкость — жидкость неприменима при микробной очистке промышленных сточных вод и, конечно, такой метод совершенно непригоден для водоподготовки. [c.194]

Выбор того или иного метода для выделения ДНК в каждом конкретном случае определяется природой использованного биологического материала. С подробным описанием методов выделения ДНК из животных и растительных тканей и из бактерий можно познакомиться в другой работе [9]. При работе с микроорганизмами одним из наиболее подходящих является метод Мармура [10]. Он сводится к разрушению клеток, денатурации клеточных остатков и удалению РНК при помощи рибонуклеазы с последующим избирательным осаждением ДНК изопропанолом. С целью предотвращения загрязнения ДНК двувалентными ионами металлов и разрушения ее дезоксирибонуклеазой добавляют хелирующие агенты и додецилсульфат натрия. [c.63]

Для размножения любой бактерии (независимо от целей) необходимо обеспечить подходящее биофизическое окружение и биохимические питательные компоненты. В гл. 6 приведены методы контроля таких биофизических факторов, как pH, температура, подача и удаление кислорода, и другие. В гл. 7 рассмотрены потребности в питательных веществах, состав синтетических и комплексных сред и количественные определения роста бактерий. Умелое обращение с биофизическими, биохимическими и биологическими факторами приобретает особую важность в получении накопительных культур и последующего выделения бактерий в виде чистой культуры (гл. 8). [c.163]

Ha развитие плесени значительное влияние оказывает относительная влажность воздуха и в еще большей степени влагосодержание материала, откуда плесневые грибки черпают питание или воду. Остающиеся на поверхности частицы ПВХ после полимеризации ВХ и выделения полимера примеси, например эмульгаторы, могут явиться первопричиной биологической коррозии ПВХ. Особенно это касается ПВХ, получаемого по эмульсионному (латексному) методу. Неудовлетворительная свето- и термостабилизация ПВХ также может повысить его восприимчивость к воздействию плесневых грибков или бактерий, хотя, по-видимому, этот эффект все же связан не с самим полимером, а с природой и содержанием вводимых в композицию добавок. [c.110]

Применение изотопа М при изучении биологической фиксации атмосферного азота в клубеньках бобовых позволило установить новые положения о механизме этого процесса [9]. Был разр-аботан метод препаративного выделения бактерий из клубеньков бобовых, и это позволило детально изучить распределение меченого азота как в отдельных фракциях и органах высшего растения, так и в клубеньковых бактериях. [c.229]

Лайтхарт с сотр. [413, 414] предлагает при изучении бакте рий, доминирующих в биологических очистных сооружениях, использовать метод нумерической таксономии. Авторы отмечают, что знание основных групп микроорганизмов, участвующих в процессах разложения органических загрязнений, необходимо так же, как информация о возбудителе болезни для постановки правильного диагноза. Только имея эти сведения, оператор может изменить условия в очистном сооружении таким образом, чтобы увеличить число желаемых форм и уменьшить — нежелаемых, например вызывающих вспухание. Исследователи, определив 109 различных признаков у выделенных ими 450 культур бактерий, разделили изоляты на [c.129]

ЛАикробиолог-исследователь при близком соприкосновении с технологией биологической очистки промышленных сточных вод не может не задуматься над тем, что же представляют собой биоценозы, именуемые активным плом или биопленкон Какие компоненты этих ценозов главные и какие второстепенные Результаты наших исследований и литературные данные свидетельствуют о том, что чистые культуры некоторых видов бактерий, выделенные из активных илов или почвы и селекционированные методом ступенчатого улучшающего отбора, значительно превосходят активный ил ио деструктивной биохимической активности, следовательно, для очистки промышленных сточных вод должны привлекаться чистые культуры деструкторов. Они могут быть использованы в биологической очистке для обогащения ими активного ила при работе на обычных очистных сооружениях — аэротенках, либо на локальных установках тииа биофильтр-аэротенк, конструкция которых разработана в отделе микробиологии очистки воды нашего института. [c.230]