Чашечные методы

Метод учета микробов путем их культивирования Метод чашечный (метод пластинок) [c.96]

Наиболее широко распространенный метод определения проницаемости полимерных мембран по отношению к парам — это так называемый чашечный метод Устройство прибора и [c.205]

Чашечный метод. Тест-объектом служат клетки асцитного рака, которые смешивают с теплой агаровой средой (пептон, глюкоза, плазма крови) и разливают в чашки Петри. На застывшую агаровую пластинку, содержащую клетки асцитного рака, накладывают агаровые блочки с выросшим микроорганизмом или диски фильтровальной бумаги, предварительно смоченные культуральной жидкостью или раствором очищенного препарата. Чашки помещают в холодильник на несколько часов для диффузии изучаемых веществ в толщу агара, содержащего асцитные раковые клетки (2 10 клеток в 1 мл). После этого чашки ставят в термостат при 37 °С на несколько часов и затем, вынув из термостата, освобождают от агаровых блочков или дисков фильтровальной [c.163]

Данные табл. 34 показывают, что, пользуясь чашечным методом, вполне возможно вести отбор противораковых веществ на раковых клетках человека, так как взвеси последних, как и клетки асцитного рака, восстанавливают метиленовый синий. [c.164]

Пробирочный метод. Модификацией чашечного метода служит метод испытания противораковой активности антибиотиков в пробирках. Метод состоит в следующем. В стандартные пробирки вносят 0,5 мл испытуемой культуральной жидкости и 0,5 мл взвеси клеток асцитного рака Эрлиха (конечная концентрация клеток 500 тыс./мл), затем добавляют 2 мл расплавленной агаровой среды, содержащей метиленовый синий. В контрольные пробирки вместо испытуемой культуральной жидкости добавляют 0,5 мл среды, на которой выращивают изучаемый организм. После перемешивания пробирки помещают на 3-4 ч в термостат при 36-37 °С. [c.165]

Примечание. Инокулят содержит 180 ООО клеток Е. соН в 1 мл бульона жизнеспособные клетки определялись чашечным методом. [c.255]

Чашечные методы [9—15] адсорбция антител на полисти-рольных чашках (химически неопределенным способом) наиболее часто используются методы двойных антител, т. е. пластиковые чашки, покрытые антителами против мышиных иммуноглобулинов, селективно связывают клетки, предварительно обработанные специфическими моноклональными антителами. [c.247]

Определение количества клеток высевом на плотные питательные среды (чашечный метод Коха). Метод широко применяют для определения численности жизнеспособных клеток в различных естественных субстратах и в лабораторных культурах. В его основе лежит принцип Коха, согласно которому каждая колония является потомством одной клетки. Это позволяет на основании числа колоний, выросших после посева на плотную питательную среду определенного объема исследуемой суспензии, судить об исходном содержании в ней клеток микроорганизмов. Результаты количественного учета микроорганизмов, проведенного методом Коха, часто выражают не в числе клеток, а в услов- ных единицах — так называемых колониеобразующих единицах (КОЕ). [c.122]

Приго-товление разведений. Разведения исходной суспензии готовят, как и для чашечного метода. [c.125]

СРАВНЕНИЕ МЕТОДА МЕМБРАННЫХ ФИЛЬТРОВ С ЧАШЕЧНЫМ МЕТОДОМ [c.248]

Сравнение метода мембранных фильтров с чашечным методом 249 [c.249]

Таблица 9.2, Сравнение результатов подсчета числа жизнеспособных микроорганизмов при использовании чашечных методов и метода мембранных фильтров для нескольких штаммов Е. соИ (согласно данным Брауна [40])

Таблица 9.8. Сравнение гетеротропных бактериальных концентраций, определенных несколькими чашечными методами [241]

MOB, среды и применяемых условий культивирования. В большинстве случаев метод мембранных фильтров используют, когда плотность популяции микроорганизмов мала при этом чашечные методы непригодны, так что какие-либо сравнения проводить затруднительно. Очевидно, при высоких концентрациях клеток чашечные методы много более удобны в работе, чем метод мембранных фильтров, и их следует считать более предпочтительными. [c.250]

ДЛЯ подсчета микроорганизмов, суспендированных в неводных материалах типа нефтяных масел, использовали специальные мембраны из желатины производства фирмы Сарториус [88]. Эти мембраны с размером пор 3 мкм обладают уникальной способностью растворяться в воде. После того как препарат прошел через мембрану, последнюю можно растворить в питательной среде и провести подсчет микроорганизмов чашечным методом на агаре. Преимущество такого метода состоит в том, что можно использовать очень высокую улавливающую способность мембранного фильтра, так что отпадает необходимость в выращивании микроорганизмов на поверхности мембраны. Конечно, это годится только для работы с неводными материалами. (Эти мембранные фильтры можно также использовать для анализа проб воздуха см. гл. 14.) [c.253]

Хотя методы мембранной фильтрации нашли широкое применение в микробиологических исследованиях качества воды (см. гл. 10), их редко применяют в микробиологии пищевых продуктов, если не считать исследовательских работ. За исключением немолочных напитков, для микробиологического контроля пищевых продуктов, предписываемого законодательными учреждениями, рекомендуется использовать более старые чашечные методы равномерного посева и розлива, а также методы инкубации во многих пробирках. С чем это связано [c.262]

При переходе от общепринятого чашечного метода к методу мембранной фильтрации состав питательной среды для подсчета микроорганизмов, как правило, изменяют. Это связано с тем, что матрица мембранного фильтра способна поглощать некоторые компоненты питательной среды и понижать [c.267]

Рис. 3-2. Схема проведения чашечного метода

Число живых клеток. Обычно подсчитывают число колоний, образуемых жизнеспособными клетками в благоприятных для роста условиях. Если пользуются чашечным методом Коха, то равные доли соответственно разбавленной гомогенной суспензии клеток смешивают с расплавленной агаризованной средой (40-45°С) и выливают на чашки Петри. Можно также размазать суспензию по поверхности агара в чашке Петри с помощью (треугольного) шпателя Дри-гальского или же осадить клетки после фильтрования на агаризованную срду или на картонные диски с питательной средой. Во всех случаях после надлежащей инкубации подсчитывают число колоний. Применение чашечного метода Коха, а также различных его модификаций предусматривает подсчет клеток [c.191]

Для этого чаще всего применяют чашечный метод, позволяющий установить, какое именно насекомое, на какой стадии развития погибает от заражения определенным числом инвазионных личинок. Этот метод основывается на применении так называемой инокуляцнонной камеры. Это чашка Петри, на дне которой лежит кружок фильтровальной бумаги, смоченной дистиллированной водой. На бумагу помещают насекомое, тщательно промытое в дистиллированной воде. Можно использовать живых насекомых или усыпленных с помощью СО2. В подготовленную таким образом чашку вносят пипеткой определенное количество суспензии личинок нематод. Зная площадь фильтровальной бумаги и количество используемых нематод, можно легко рассчитать смертельную дозу паразита для одного насекомого или на 1 кв. см площади бумаги. [c.88]

При подсчете микроорганизмов с помощью мембранных фильтров в зависимости от различных условий роста для данной разновидности микробов могут быть получены либо более низкие, либо более высокие, либо те же результаты, что и при подсчете с использованием чашечного метода с агаром. Даубнер и Петер [57] в обстоятельном обзоре замечают, что число микроорганизмов, подсчитанных на мембранах, больше, чем на чашках. Однако Браун [40] показал, что для чистых культур Е. oli метод мембранных фильтров дает постоянно более низкие значения, чем стандартный чашечный метод, и что результаты подсчетов зависят от штамма (табл, 9,2), В этих опытах мембранные фильтры не были токсичными, но затруд- [c.248]

В самом начале, когда только появился метод мембранной фильтрации, было установлено [47, 123], что различные питательные среды, которые хорошо себя зарекомендовали в случае характерных колоний БГКП, посеянных обычными штриховыми методами на чашках с агаром, оказались неудовлетворительными для мембранных фильтров. Как отмечалось в разд. 9.4, одна из главных трудностей состоит в том, что мембранный фильтр поглощает красители и ингибиторы, используемые в дифференциальных средах, делая их, таким образом, неэффективными. Большая работа была проведена многими исследователями, чтобы создать различные подходящие среды для БГКП, и, как было в конце концов показано, наиболее удачной оказалась модифицированная среда Эндо. В табл. 9.1 мы провели сравнение обычной среды Эндо, используемой в чашечном методе, с модифицированной средой М-Эндо, подходящей для метода мембранной фильтрации. [c.275]

Американское общество по испытанию материалов (ASTM) опубликовало стандартный метод оценки мембранных фильтров для выделения ФКП (Стандарт D 3508), которым можно пользоваться в лабораториях, чтобы убедиться, что применяемые мембранные фильтры вполне пригодны для проведения испытаний на ФКП. Согласно этому стандарту, пять разных необработанных водных проб (четыре из загрязненных исто -ников и одна из сточных вод) пропускают через мембранный материал, причем делают пять повторных операций для каждой пробы, а затем проводят инкубацию на агаре M-F при температуре 44,5 °С. Одновременно пробы этой же воды инкубируют чашечным методом равномерного посева при тех же самых условиях. Сравнивая число подсчетов при повторных операциях, полученных методом мембранной фильтрации, с числом подсчетов в чашечном методе, можно определить степень выделения ФКП на испытываемых мембранных фильтрах. Согласно ASTM, этот метод испытаний особенно полезен для выбраковки тех мембран, которые не годятся для теста на ФКП. Этим стандартом следует пользоваться изготовителям мембранных фильтров для контроля качества их продукции он применим также в программах по удостоверению качества мембранных фильтров. Однако до сих пор изготовители мембранных фильтров не указывают в своей технической документации, что их мембраны были подвергнуты испытаниям на соответствие Стандарту D 3508 ASTM, и не приводят данных, касающихся эффективности их мембранных фильтров по выделению ФКП в соответствующих испытаниях. [c.285]

Чашечный метод. Сущность "метода заключается в посеве опредв ленного количества исследуемого субстрата или его разведения в чашки Петри с плотной питательной средой, на. которой после термостатирования (в зависимости от видов организмов) подсчитывают выросшие колонии (рис. 32). [c.328]

Чашечный метод отличается от предыдущих длительностью ана- , но с помощью этого метода можио выявить количество жиз-юсобных клеток. Метод предельных разведений также характе-Уется продолжительностью анализа н, кроме того, большим раз- ом показаний. Но прн этом он позволяет определить микробную [c.333]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология