Антитела бараньи

В 60-х годах были достигнуты важные успехи, открывшие новые пути изучения В-клеток. Первым из ннх была разработка метода локального гемолиза, который позволил идентифицировать и подсчитывать индивидуальные В-клетки, вырабатывающие антитела к определенному антигену. В простейшем варианте этого метода берут лимфоциты (обычно из селезенки) у животного, иммунизированного бараньими эритроцитами (БЭ). Их помещают затем в агар вместе с избытком Ю. В результате на чашке получается газон из иммобилизованных БЭ с вкраплением лимфоцитов. В этих условиях клетки не могут передвигаться, но любые выделяемые В-клеткой антитела будут диффундировать и покрывать поверхность всех БЭ, находящихся поблизости. Такие покрытые антителами эритроциты можно лизировать, добавив комплемент (разд. 17.5). Таким образом, присутствие каждой выделяющей антитела клетки обнаруживается по прозрачному пятну ( бляшке ) в темном слое БЭ. Аналогичный метод можно использовать для подсчета клеток, вырабатывающих антитела к другим антигенам, таким как белки или полисахариды, если присоединить эти антигены к поверхности бараньих эритроцитов. [c.20]

В данном случае наилучшие результаты удается получить при многократных инъекциях небольших доз антигенов (бактерий, клеток и т. п.). Троекратное введение шпорцевым лягушкам (массой до 30 г) 5-10 бараньих эритроцитов приводит к такому же хорошему ответу, как одноразовая инъекция 1 10 клеток. Титры антител в сыворотках крови достигают максимума обычно через 4 нед. [c.488]

Специфически очищенные бараньи антитела к IgG мыши, около 2,0 мг/мл [c.47]

Конъюгация антител анти-арс с бараньими эритроцитами [c.174]

Бараньи эритроциты, нагруженные антителами анти-арс (ант,и-арс-БЭ) (см. разд. 1П, Г, 3). [c.180]

Сравнительное определение числа клеток, образующих антитела (ло данным локального гемолиза) в костномозговой ткани различной локализации у мышей при первичном ответе на липополисахарид и при вторичном ответе на бараньи эритроциты [c.281]

КЛОНИРОВАНИЕ ОПУХОЛЕВЫХ ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТОК В МЯГКОМ АГАРЕ. ВЫЯВЛЕНИЕ ГИБРИДНЫХ КЛОНОВ, ОБРАЗУЮЩИХ АНТИТЕЛА К БАРАНЬИМ ЭРИТРОЦИТАМ (БЭ) [c.407]

ФХ—фитохром no — пероксидаза КАФ — кроличья антисыворотка к фитохрому БАС — баранья антисыворотка к иммуноглобулину кролика КАП — кроличьи антитела к пероксидазе. [c.308]

Иногда клетки окрашивают либо непрямым методом, обрабатывая сначала кроличьей антисывороткой к мышиным ji-цепям и затем выявляя ее антитела бараньей антисывороткой к кроличьему Ig, меченной ТРИТЦ, либо окрашивают непосредственно при помощи меченной ФИТЦ козьей антисыворотки к мышиным у или ji-цепям. [c.307]

Весьма чувствительным методом серологической диагностики туляремии является РНГА. Она может быть положительной уже в конце первой — начале второй недели заболевания. В качестве антигена используют туляремийный эритроцитарный диагностикум (бараньи эритроциты, нагруженные туляремийным антигеном). У больных туляремией титры антител в этой реакции могут составлять 1 1280— 1 2560 и выше. [c.124]

РОНГА проводят с бараньими эритроцитами, на поверхности которых фиксированы противооспенные антитела (антительный диагностикум). Антиген, находящийся в исследуемом материале, взаимодействует с антителами на поверхности эритроцитов, что приводит к агглютинации эритроцитов. [c.287]

Реакция пассивной гемагглютинации по Бойдену позволяет выявлять агглютинины к растворимым аллергенам и гаптенам вследствие введения в реагирующую систему эритроцитов, соединенных с антигеном. Процесс соединения антигена с эритроцитами называют сенсибилизацией, а полученный таким образом искусственный корпускулярный антиген — сенсибилизированными эритроцитами. В РПГА используют эритроциты барана или человеческие О группы крови. В первом случае исследуемую сыворотку предварительно освобождают от гетерофильных антител к форсмановскому антигену поверхности бараньих эритроцитов. Эта реакция уже более 20 лет широко используется в исследовательских и прикладных целях благодаря своей чувствительности, позволяющей определять 0,003 — 0,006 мкг N антител в [c.215]

Из лабораторных животных чаще всего берут для иммунизации кроликов, морских свинок или мышей в зависимости от количества имеющегося антигена, доступности животного и т. д. Возможность использования группы лабораторных животных позволяет решить проблему отбора из них наиболее иммунореактив-ных. Иммунизировать удобнее самцов, так как у них иммуноген-ный ответ менее подвержен влиянию гормональных циклов. Для получения антител против вирусов эффективными оказались куры, у которых антитела накапливаются в яйцах. Большие количества антисывороток получают иммунизацией крупных. животных козлов, баранов, ослов, лошадей. [c.149]

П. Моноклональные мышиные антитела к антигенам клеточной поверхности добавляют к экстракту мембраи, солюбилизированных с помощью Ф-40 (примерно 25 мкл асцитной жидкости иа мембраны, выделенные из 10 клеток), и инкубируют 30 мин при комнатной температуре. Затем добавляют оптимальное (по данным предварительного титрования) количество кроличьих илн бараньих антител к иммуноглобулинам мыши и смесь инкубируют 16 ч при 4 С для осаждения иммунных комплексов. Иммунные преципитаты отмывают дважды 0,5%-ным раствором ЫР-40 в ЗФР н один раз 0,5%-ным раствором ЫР-40 [c.63]

При одинаковой специфичности и степени флуорохромирования реагенты, приготовленные из кроличьих и козьих антисывороток, могут сильно различаться по окрашивающим свойствам. Дело в том, что иммуноглобулины кролика теряют свою активность при молярном соотношении больше 2 или 3, в то время как бараньи или козьи антитела сохраняют способность к окрашиванию даже после интенсивного флуорохромирования (до 5—7 молекул флуоресцеина иа молекулу IgG). [c.172]

Для выявления какого-либо поверхностного клеточного антигена нужно иметь специфичные к нему антитела и метод, позволяющий подсчитать, какое число клеток в данной популяции связывает эти антитела. Приготовление антисывороток к поверхностным клеточным антигенам подробно описано в гл. 13. Существуют два основных способа выявления клеток, несущих такие антигены. Один из них состоит в том, что антисыворотку обрабатывают флуорохромом, и в результате этого соответствующие клетки флуоресцируют в ультрафиолете (см. гл. 9). Вместо этого можно обрабатывать клеточную популяцию антисывороткой и комплементом при этом клетки, связавшие антитела, погибают, и их можно обнаружить с помощью витального красителя, например трипанового синего. В настоящей главе описан метод определения поверхностных клеточных антигенов, в котором клетки, связавшие антитела, выявляются с помощью особым образом обработанных бараньих эритроцитов (БЭ). Преимущество этого метода состоит в том, что, обладая высокой чувствительностью, он позволяет достаточно быстро исследовать большое число клеток антитела при этом используются в немодифи- [c.273]

Метод включает обработку клеточной популяции антисывороткой к искомому поверхностному антигену, а затем индикацию клеток, связавших антитела, с помощью бараньих эритроцитов. Если лимфоидная клетка имеет на своей поверхности соответствующий антиген, эритроциты скапливаются вокруг нее и образуется легко различимая под микроскопом розетка. Клетки, ие содержащие искомого антигена, не связывают антитела и поэтому не привлекают индикаторные БЭ. Для приготовления индикаторных БЭ их нагружают стафилококковым белком А. Это белок с мол. весом 42 000, который входит в состав клеточной стенки Staphylo o us aureus и специфически связывает F -фраг-мент иммуноглобулинов класса G некоторых видов животных (Sjoquist et al., 1972). [c.274]

В центральные лунки триад. Крайние лунки заполняют неразве-денными антиаллотипическими сыворотками. Эти сыворотки не должны содержать перекрестно-реагирующих антител. Так, например, для исследования клеток гетерозиготного кролика Ы, Ь6 следует использовать антисыворотки к Ь4 и Ь6, полученные при иммунизации кролика с аллотипом Ь9. Антисыворотки инактивируют прогреванием (56°С, 30 мин) и истощают бараньими эритроцитами. [c.352]

Вторичное образование антител к бараньим эритроцитам in vitro лимфоцитами периферической крови (ЛПК) кролика обычно хорошо воспроизводится. До 5-го дня поеле иммунизации животного выраженный ответ наблюдается редко. Затем число АОК медленно нарастает, достигая максимума между 10-м и 20-м днями. Это максимальное число АОК может поддерживаться в течение нескольких дней и даже недель. [c.353]

Меченные радиоизотопом надосадочные жидкости всех гибридных культур анализировали с помощью электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия и методом изоэлектрофокусирования. Двадцать культур гибридных клеток продолжали секретировать миеломный IgG, который синтезировала родительская миелома, одиннадцать культур — дополнительный IgM, две культуры — дополнительные молекулы IgG и две — только дополнительные легкие цепи шесть — не секретировали дополнительных Ig-цепей. Один из синтезируемых гибридами IgM и один IgG2b вызывали гемолиз бараньих эритроцитов. Антител к ТНФ-группе не было обнаружено. [c.405]

АЛС — антилимфоцитарная сыворотка АОК — клетка, образующая антитела БА — белок А стафилококка БДБ — быс-диазотированный бензидин БдУ — 5 -бромдезоксиуридии Бис — N. М -метиленбисакриламид Бицин — М,М-бис(2-гидроксиэтил)-глицин БСА — бычий сывороточный альбумин БЭ — бараньи эритроциты БФС — бромфеноловый синий ГАЕ — гемагглютинирующая единица вируса ГАТ — среда для культуры клеток, содержащая гипоксантин, аминоптерин и тимидин ГЛТ — сополимер Ь-Глу Ь-Лиз Ь-Тир в соотношении 62 34 4 ГСИ — М-гидроксисукцинимид [c.468]

При краткосрочном культивировании клеток перитонеального экссудата мышей на среде, содержащей карбокси-метилцеллюлозу, бараньи эритроциты и комплемент, можно наблюдать образование зон гемолиза. В течение 24 часов выявляется около 3000 бляшек гемолиза на 10 эксплантированных клеток, причем бляшки появляются уже через 15 минут инкубации in vitro. Показано, что гемолиз эритроцитов в этой системе осуществляется под действием специфических антител, которые синтезируются de novo (Bussard а. oth., 1970). [c.125]

Были сделаны попытки установить местоположение фитохрома в клетке. Наиболее прямой подход состоит в использоваиии иммуиоцитохимйческих методик. Для этого сначала получают кроличьи антитела против чистого фитохрома и обрабатывают ими срезы растительных тканей. Молекулы кроличьих антител взаимодействуют с молекулами фитохрома, находящегося в клетке. Затем срез обрабатывают бараньей антисывороткой к кроличьим антителам, что приводит к образованию кроличьего аитипероксидазио-пероксидазного комплекса, так что каждая молекула фитохрома метится ферментом пероксидазой, локализацию которого можно определить гистохимическими методами (рис. 8.7). Таким путем было установлено, что фитохром в форме Рк не имеет строгой локализации в клетке и может находиться в митохондриях и пластидах, а также в цитоплазме, ио не в ядрах или вакуолях. Одиако, перейдя в форму Р дк в [c.307]

Изучение влияния московской воды, обработанной высокотемпературным способом, на показатели иммунореактивности у мышей позволило установить преимущественное нарушение функции В-звена иммунной системы, выражавшееся в снижении титра антител к бараньим эритроцитам и подавлении индуцированной В-клеточным митогеном бласттрансформации лимфоцитов. Кроме того, име>ю место угнетение спонтанного пролиферативного ответа, что возможно связано с более выраженной функциональной активностью супрессорных клеток. [c.248]

Смотреть страницы где упоминается термин Антитела бараньи: [c.55] [c.229] [c.248] [c.249] [c.464] [c.46] [c.47] [c.67] [c.173] [c.180] [c.283] [c.285] [c.237] [c.266] [c.296] [c.352] [c.354] [c.405] [c.120] [c.123] [c.229]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология