Хлоропласты получение

Для проверки идентичности состава вещества хлоропластов, выделяемого фракционированием, с веществом неповрежденных хлоропластов Менке [90] получил путем центрифугирования небольшую порцию, содержащую всего 1—2% от общего материала хдо-ропластов и состоящую целиком из целых хлоропластов или крупных их осколков. В этой фракции он нашел 48% белков и 37% липоидов, а фракция хлоропластов, полученная высаливанием, содержала 56°/о белков и 32 0 липоидов. [c.369]

В веществе хлоропластов, полученном осаждением [c.373]

Рис. 7.12. Тилакоиды хлоропласта, полученные методом замораживания—скалывания. Видна поверхность скола мембран. Обратите внимание на частицы, покрывающие поверхность мембран - это фотосистемы. Частицы ФС1 меньше частиц ФСН.

Все эти мутации обычно наследуются только по материнской линии, т.е. от родителя /п/+. Это связано со сложным биогенезом хлоропласта зигот, в результате которого сохраняется только ДНК хлоропласта, полученная от родителя mt . Такое правило имеет исключение, на котором строится весь рекомбинационный анализ хлоропластной группы сцепления иногда спонтанно (не чаще чем [c.231]

Рис. 7.18. Сокращение индукционного периода в хлоропластах в результате предварительного освещения листьев, из которых оии были получены (ср. с рис. 7.8 и 7.10). кривая Г. СОг-зависимое выделение Ог хлоропластами, полученными из листьев шпината, которые перед этим освещались 30 мин белым, светом (2000 фут-свечей). Кривая II то же, что и /, но для хлоропластов, которые были выделены одновременно из неосвещенных листьев. Все листья собирали после пребывания в темноте в течение 12 ч и смешивали перед экстракцией [7].

Мертвые или раздробленные клетки, теряя способность к полному фотосинтезу, сохраняют все же слабую способность к выделению кислорода на свету (без соответствующего поглощения двуокиси углерода). Это отметили Габерландт [2] и Юарт [3], наблюдавшие, что изолированные хлоропласты (полученные при растирании листьев с водой) выделяют небольшое количество кислорода на свету. Подобные же наблюдения с порошками из высушенных листьев произвел в 1904 г. Молиш [9]. Вопрос оставался в прежнем положении, пока Молиш [22] вновь не вернулся к нему через 20 лет — в 1925 г. Он подтвердил выделение кислорода листьями, высушивавшимися в течение трех или четырех дней при 30—35 и иногда по нескольку недель хранившимися в эксикаторе. Некоторые из листьев выделяли кислород после нагревания до 84° в течение 5 час. Для получения кислорода сухие листья измельчались в порошок под водой и полученная масса освещалась без фильтрования. Листья, убитые замораживанием, также выделяли кислород на свету. [c.66]

Граник растирал листья в 0,5 М растворе глюкозы. Он получил вещество хлоропластов, состоящее из целых и распавшихся на части хлоропластов. Менке [92], дроизводивший растирание под водой, получил небольшую порцию, состоящую из бодее иди менее неноврежденных хлоропластов (см. табл. 49). Он не сомневается, что вещество хлоропластов, полученное коагуляцией, содержит все составные части хлоропластов вместе с 15% цитоплазмы. Момг мертс [93], и Бот [113] утверждают, что они подучали препараты, целиком состоявшие из свободных гранул. Однако в этих фракциях, содержащих, как предполагалось, чистые гранулы, концентрация хлорофилла не превышает, а иногда и ниже концентрации хлорофилла в веществе хлоропластов в целом. Это показывает, что при фракционировании не происходит разделения гранул и стромы [106] . [c.370]

Менке [84] экстрагировал хлорофилл из препаратов хлоропластов, полученных из листьев шпината (см. т. I, стр. 369), и нашел, что после этого остается кирпично-красный остаток. Суспензия этого остатка в воде дала полосы поглощения у 490 и 540 мц, т. е. гораздо дальше к красной области, чем полосы каротиноидов в спектре живых зеленых растений (470 и 490 мц, как приведено выше для листьев Fatsia и клеток hlorella). Смачивание эфиром ведет к изменению цвета и сдвигу полос поглощения на места, обычные для каротиноидов в растворах (442 и 472 мц). [c.114]

На ультратонких срезах хлоропластов (фото 13 — 16) ламеллы выглядят гладкими. Однако при изучении препаратов ламелл изолированных хлоропластов, полученных методом напыления, обнаруживается повторяющаяся регулярная структура внутренней поверхности мембраны. Эту структуру впервые наблюдал Стейнман [33]. Исследования, проведенные в Калифорнийском университете [26], позволили предположить, что эти регулярные структуры представляют собой, по-видимому, морфологическое выражение физиологической фотосинтетической единицы, предложенной Эмерсоном и Арнольдом [10, И]. Эти единицы получили название квантосом. [c.79]

Большой интерес представляют работы последних лет, в которнх показано, что при некоторых воздействиях (обработка ультразвуком, детергента ш) можно получать фрагаенты хлоропластов, обогащенные фотосистемой I или И. Так, при фракционированном центрифугировании раплентов хлоропластов, полученных, л воздействии на последние детергента дигитонина, осаждаются йзотицы разных размеров, которые по содержанию питаентов, марганца, меди и других соединений, а также,по фотохимической активности можно отнести к разным фотосистемам. [c.188]

Островская Л.K.. Кочубей С./.г., Рейн -гард Т.А. Спектральное свойства й отохи .шчоская активность Фрагментов хлоропластов, полученных с помощью дигитонина и тритона Х-100. "Ело изика". 1969,т.I i, ВНП. 2, стр. S5-275. [c.287]

Хлоропласты получают с помощью мягкой гомогенизации листьев в изотоническом растворе сахарозы или сорбитола при pH 8,0. Благодаря такому pH компенсируется закисление среды при разрушении вакуолей. После фильтрования через муслин гомогенат центрифугируют при небольших скоростях для отделения обломков клеток. Хлоропласты обычно осаждают центрифугированием при 1000—2000 g в течение 4 мин. Эта процедура позволяет получать хлоропласты с интактными внутренней и наружной мембранами (интактные хлоропласты). Такие хлоропласты способны с высокой скоростью фиксировать СОг, так как в них сохраняется содержимое стромы, однако они редко используются в биоэнергетических исследованиях, поскольку многие субстраты и ингибиторы не проникают через мембрану хлоропласта и не могут достичь мембраны тилакоидов. Исследования функций тилакоидов можно проводить на хлоропластах, полученных в 0,35 М Na l, Б них разрушены наружная и внутренняя мембраны, и они неспособны фиксировать СОг, но здесь тилакои-ды доступны для субстратов и ингибиторов (разрушенные хлоропласты). [c.16]

После регистрации сдвигов pH в отсутствие фосфори-лирующих агентов и после их введения в среду, а также проведения соответствующих расчетов количества поглощенных на свету Н+, величины градиента pH и числа молей синтезированной АТФ целесообразно провести аналогичную работу с препаратами различных фракций хлоропластов, полученных после разделения в градиенте плотности сахарозы. Эти эксперименты позволят сравнить параметры трех различных фракций хлоропластов, получение которых описано в лабораторной работе № 7. Эти фракции отличаются по размерам, целостности мембран и наличию сопутствующих примесей. [c.177]

Таблица 8.4. Кинетические константы транспорта фосфатов в строму хлоропластов, полученные при изучении противообмена при 4 °С в темноте (Fliege et al.. 1978)

Если хлоропласты, полученные из протопластов мезофилла С4-Растений, фракционируют далее в градиенте концентрации сахарозы, то свыше 80% NADP-триозофосфатдегндрогеназы выявляют в зоне интактных хлоропластов, а вся активность ФЕП-карбоксилазы остается в верхней части градиента, во фракции цитозоля. Следовательно, ФЕП-карбоксилаза локализована только в цитозоле клетки. Не исключено, что in vivo этот фермент непрочно связан с наружной частью оболочки хлоропластов. Если к тому же учесть и транспорт метаболитов, то напрашивается вывод о том, что этот фермент должен находиться снаружи от хлоропласта. [c.353]

Для многих целей до сих пор предпочитают использовать шпинат. Это связано, во-первых, с. тем, что в этом растении практически отсутствуют фенольные соединения, которые обычно загрязняют получаемые препараты, и, во-вторых, с тем, что исследованию хлоропластов именно этого растения посвяш,ено. громадное число работ. Еще совсем недавно шпинат был единственным растением (за исключением, пожалуй, молодых листьев гороха), из которого удавалось получать действительно интактные и активные хлоропласты. Для некоторых целей очень удобными оказались растеиия гороха, хотя с каждым годом становится все яснее, что хлоропласты, выделенные из молодых побегов гороха, отличаются по проницаемости от хлоропластов, полученных из взрослых растений шпината. Аврои и др. очеиь широко использовали в своих исследованиях салат ио главным образом для изучения транспорта электронов и фотофосфорилироваиия. Приемы получения протопластов (разд. А.5) позволили выделить хорошие хлоропласты и из миогих других растений. [c.546]

Для того чтобы не происходило зависимого от СО2 выделения О2, в среду добавляют глнцеральдегид, а для разобщения переноса электронов и фосфорилирования и получения максимальной скорости наблюдаемого процесса вносят НН4С1. Наглядно этот метод определения степени интактности изображен на рис. А.1, где приводятся данные для препарата хлоропластов, полученных из протопластов пшеницы. [c.558]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология