Эритроциты барана

Метод розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана является наиболее простым и самым распространенным [c.105]

Произвести учет результатов метода розеткообразования лимфоцитов с эритроцитами барана для количественной оценки содержания в крови Т-лимфоцитов. [c.105]

Эритроциты барана используют в виде 3%-й взвеси в ИХН. [c.71]

Реакция связывания комплемента (РСК) относится к сложным серологическим реакциям. Для ее проведения необходимы 5 ингредиентов, а именно АГ, АТ и комплемент (первая система), эритроциты барана и гемолитическая сыворотка (вторая система). Специфическое взаимодействие АГ и АТ сопровождается адсорбцией (связыванием) комплемента. Поскольку процесс связывания комплемента не проявляется визуально, Ж. Борде и О.Жангу предложили использовать в качестве индикатора гемолитическую систему (эритроциты барана + гемолитическая сыворотка), которая показывает, фиксирован ли комплемент комплексом АГ-АТ. Если АГ и АТ соответствуют друг другу, т. е. образовался иммунный комплекс, то комплемент связывается этим комплексом и гемолиза не происходит. Если АТ не соответствует АГ, то комплекс не образуется и комплемент, оставаясь свободным, соединяется со второй системой и вызывает гемолиз (см. цв. вклейку, рис. 15). [c.70]

Метод ЕАС-розеток. Один из простых методов количественного учета В-лимфоцитов крови человека. В этом случае тест розеткообразования ставят, как и в случае Е-розеток, но с эритроцитами барана, предварительно инкубированными последовательно с антиэритроцитарными антителами, а затем с комплементом. Такие эритроциты присоединяются избирательно к клеткам, несущим рецепторы для комплемента, в том числе к В-лимфоцитам. У здоровых людей В-лимфоциты (ЕЛС-розетки) составляют 15—25% от общего числа лимфоцитов. [c.106]

Число Г-лимфоцитов в периферической крови определяют, используя реакцию розеткообразования Е-РОК (эритроциты барана образуют с Г-лимфоцитами спонтанные розетки) субпопуляции Г-лимфоцитов — с помощью реакции розеткообразования ЕА-РОК. На мембране Г-хелпера имеется рецептор к / -фрагменту [gM, а на мембране Г-супрессора — рецептор к /с-фрагменту IgG, поэтому Г-хелперы образуют розетки с эритроцитами, покрытыми антиэритроцитарными АТ класса IgM, а супрессоры образуют розетки с эритроцитами, покрытыми антиэритроцитарными АТ класса IgG. [c.91]

Для постановки РСК требуется точное определение количественных соотношений всех ингредиентов, участвующих в реакции исследуемой сыворотки, антигена, комплемента, гемолитической сыворотки кролика и эритроцитов барана. Поэтому постановке основного опыта предшествуют титрование гемолитической сыворотки и выбор ее рабочего разведения, титрование комплемента и выбор его рабочей дозы, титрование других ингредиентов. [c.119]

Взвесь эритроцитов барана получают из дефибринированной крови барана, отмывая эритроциты изотоническим раствором хлорида натрия до полной бесцветности и прозрачности надосадочной жидкости, и готовят из них 3 % взвесь в изотоническом растворе хлорида натрия. [c.121]

Гемолитическую сыворотку для РСК получают путем иммунизации кроликов суспензией эритроцитов барана. [c.71]

Кроликов иммунизируют путем введения им в вену уха 50 %-й взвеси отмытых эритроцитов барана (по 1 мл 4 —6 раз через день). Через 7 дней [c.71]

Хроматографию проводят в указанном выше стерильном буфере со скоростью до 90 мл/час. Собирают активные фракции (восстановление способности лимфоцитов к розеткообразованию трипсинизированных эритроцитов барана в присутствии фактора переноса) — это и есть ЛТФ. [c.594]

Гемолитическая система состоит из смешанных в равных объемах гемолитической сыворотки (взятой в тройном титре) и 3%-й взвеси эритроцитов барана. Для сенсибилизации эритроцитов гемолизинами смесь выдерживают в термостате при 37 °С в течение 30 мин. [c.72]

И Гемолитическая система (гемолитическая сыворотка в тройном титре + 3%-я взвесь эритроцитов барана) 1,0 1,0 1,0 [c.73]

Влияние кооперативного эффекта на интеисивность иммунного ответа оказывается существенным в том случае, когда популяции клеток, участвующих в распознавании данного антигена, малы. Это можно отчетливо проследить в опытах с облученными мышами [9], которым одновременно с антигеном (эритроцитами барана) вводили различные количества лимфоцитов от животных той же линии. (При облучении погибают не только все лимфоциты, но и кроветворные клетки, так что у животных полностью отсутствует собственная иммунная реакция.) Через четыре дня в селезенке реципиента определяли количество клеток, образующих антитела к эритроцитам барана (АОК). Построив зависимость числа АОК М от числа введенных лимфоцитов N , авторы нашли, что при малых значениях Ый (<2 10 ) М растет пропорционально N, а при больших зависимость М. (Л/о) становится линейной (рис. 5.3). Действительно, в нижней области концентраций обнаружен кооперативный эффект, который как бы исчезает при повышении дозы введенных лимфоцитов. [c.107]

D2 Т-клеточный антиген, являющийся рецепторной молекулой для эритроцитов барана (ЭБ), называемый еще Т11-антиген и LFA-2. Молекула его имеет ММ 46-50 кДа, и важно подчеркнуть его 1 значимость в Т-клеточном созревании, поскольку антитела против одного эпитопа (см) могут индуцировать клеточную пролиферацию. [c.568]

Подготовка исследуемой на антитела сыворотки для разрушения гемолизинов сыворотку в объеме 1—0,5 мл инактивируют при -Ьбе С в течение 30 мин в аппарате для инактивации сывороток или водяной бане, затем разводят физиологическим раствором 1 2 и 3 раза адсорбируют осадком отмытых эритроцитов барана. Для этого на 1 мл разведенной сыворотки добавляют 1 каплю осадка, перемешивают и инкубируют в течение 20 мин при комнатной температуре. После инкубации эритроциты осаждают центрифугированием при 1500 об/мин в течение 5—7 мин, сыворотку переносят в чистую пробирку и снова добавляют 1 каплю осадка эритроцитов. [c.218]

Реакция непрямой пассивной) гемагглютинации. Наиболее высокой адсорбционной способностью обладают эритроциты. Реакция с использованием эритроцитов называется непрямой, или пассивной, гемагглютинацией (РИГА, или РИГА). Для постановки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавливают впрок, обрабатывая формалином или пгютаральдегидом. Адсорбционная емкость эритроцитов уг(еличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома. [c.61]

Подбор рабочей дозы гаптена осуществляют путем отдельного титрования его разведений с гемолитической системой (контроль на цитотоксическое действие химического соединения на эритроциты барана) и с комплементом (контроль на антикомплементарность аллергена). [c.242]

Влияние эстифана нри его четырехкратном внутрибрюшинном введении до иммунизации на гуморальный и клеточный иммунный ответ мышей на эритроциты барана [c.399]

Реакция специфического розеткообразоваыия. Розетки — характерные образования, возникающие in vitro в результате прилипания эритроцитов к поверхности иммунокомпетентных клеток. Розеткообразование может происходить спонтанно, поскольку Т-лим-фоциты человека содержат рецепторы к эритроцитам барана. Спонтанное розеткообразование здоровых людей составляет 52 — 53 % и служит показателем функционального состояния Т-лимфоци-тов. Этот феномен воспроизводится также и в том случае, если используют эритроциты, на которых фиксированы соответствующие аллергены. [c.87]

Влияние эстифана нри различных схемах его перорального нрименения на показатели гуморального иммунного ответа мышей СВА на эритроциты барана [c.400]

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритро-цитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обладающие высокой адсорбирзтощей актихшостью. [c.61]

Для испытания гемолитической способности исследуемую культуру засевают на 1% пептонную воду и после суточной инкубации к последней стерильно добавляют 2% отмытых эритроцитов барана. После этого ее дополнительно выдерживают 48 часов при 37°С. Типичные культуры холерногц вибриона не дают гемолиза., , . [c.167]

Реакция пассивной гемагглютинации по Бойдену позволяет выявлять агглютинины к растворимым аллергенам и гаптенам вследствие введения в реагирующую систему эритроцитов, соединенных с антигеном. Процесс соединения антигена с эритроцитами называют сенсибилизацией, а полученный таким образом искусственный корпускулярный антиген — сенсибилизированными эритроцитами. В РПГА используют эритроциты барана или человеческие О группы крови. В первом случае исследуемую сыворотку предварительно освобождают от гетерофильных антител к форсмановскому антигену поверхности бараньих эритроцитов. Эта реакция уже более 20 лет широко используется в исследовательских и прикладных целях благодаря своей чувствительности, позволяющей определять 0,003 — 0,006 мкг N антител в [c.215]

Приготовление эритроцитарного диагностикума для РПГА с водорастворимыми промышленными химическими аллергенами по Л. Н. Черноусовой танизирование эритроцитов барана осуществляется по С. Г. Барлоговой для сенсибилизации к 5 мл 1% взвеси та-низированных эритроцитов на физиологическом растворе добавляют 0,02—0,08 мл водного раствора аллергена, перемешивают и инкубируют в течение 30 мин при +37°С. Затем сенсибилизированные эритроциты осаждают центрифугированием при 1500 об/мин в течение 5—7 мин, однократно отмывают разводящей жидкостью (0.2% раствор желатина на физиологическом растворе). [c.217]

РНГА удобно ставить в планшетах для титрования, используя для разведения материала микротитратор Такачи. Исследуемые сыворотки прогревают 30 мин при 56 °С для инактивации комплемента. Для адсорбции неспецифических гемагглютининов к сывороткам добавляют 50%-ю взвесь формалинизированных или свежих отмытых эритроцитов барана из расчета 0,1 мл взвеси на [c.62]

Гемолитическую систему готовят ех tempore путем смешивания гемолитической сыворотки в рабочем титре, который, как и в классическом варианте, в 3 раза ниже титра сыворотки, с осадком отмытых свежих эритроцитов барана до получения 3% взвеси. Для этого разведенную физиологическим раствором, согласно инструкции на этикетке, сухую гемолитическую сыворотку дополнительно разводят в 3 раза и на каждый миллилитр такого разведения добавляют 0,03 мл осадка эритроцитов. Хранить эритроциты даже в, консерванте Алсевера более 3—5 дней не рекомендуется. [c.242]

Помимо нарушений гемопоэтической активности селезенки, развивающихся в результате описанных выше повреждений, при нейтронном облучении изменяется и ее иммунная функция, что проявляется в снижении продукции гуморальных антител при иммунизации мышей эритроцитами барана. При количественной оценке такого угнетения антителогенеза учитывалось образование антител определенным числом облученных клеток селезенки, которые вводили смертельно облученной мыши той же генетической линии, что и донор ОБЭ нейтронов деления по этому показателю составила 4—5 (Gottlieb, Gengozian, 1970). По данным, полученным с помощью другой методики, — по оценке выработки антител клетками селезенки в культуре, — ОБЭ нейтронов близкой энергии оказалась существенно люньше — 2.3+0.2. Однако и эта [c.96]

Таким образом, мы получили асимптотически оба участка зависимости М (Л/о) — квадратичный и линейный, наблюдаемые в эксперименте (см. рис. 5.3). По конечному участку экспериментальной крйвой можно вычислить величину т] — долю клеток-предшественников к эритроцитам барана в первоначальной популяции лимфоцитов. № формулы (5.8) получаем рт)=10 и, если считать, что в селезенке находится примерно 10% АОК, т] 10 . [c.108]

На рис. 5.3 сплошной линией проведена теоретическая кривая, построенная по формуле (5.6), константы в которой подобраны из асимптотических представлений. Кривая проходит близко к экспериментальным точкам во всем диапазоне использовавшихся доз N . Отметим, что начальный, квадратичный, участок кривой действительно соответствует очень малому количеству иммуннокомпетентных клеток в селезенке мыши такого же порядка число специфических Т-хелперов к эритроцитам барана Го- [c.108]

Постановка РПГА из инактивированной и истощенной эритроцитами барана исследуемой сыворотки готовят 2 ряда двойных раз-ведений, начиная с 1 2, на разводящей жидкости (0,2% раствор желатина на физиологическом растворе). При постановке реакции в пробирках разведения делают в объеме 0,5 мл, а при микрометоде — в объеме 0,05 мл. В первый (основной) ряд добавляют сенсибилизированные эритроциты, а во второй (контрольный) — танизи-рованные или обработанные глутаровым альдегидом эритроциты, взвешенные в разводящей жидкости в том же объеме, что и сенсибилизированные. При пробирочном варианте эритроциты добавляют пастеровской пипеткой по 1 капле, при микрометоде—по 0,025 мл. Кроме этого контроля, проверяющего полноту истощения сыворотки, ставят еще два контроля на спонтанную агглютинацию для первого к объему разводящей жидкости (0,5 или 0,05 мл в зависимости от методики) добавляют контрольные, а для второго — сенсибилизированные эритроциты (по 1 капле или 0,025 мл в зависимости от методики). Инкубируют при комнатной температуре при постановке в пробирках в течение 18 ч, при микрометодике — в течение IV2—2 ч. [c.218]

Серодиагностика пневмонии, вызванной миконлазмой. Осуществляется постановкой РСК с диагностикумом, приготовленным из микоплазмы пневмонии, или РПГА, в которой используют эритроциты барана с адсорбированным на них микоплазменным антигеном. Диагностическое значение имеет нарастание титра антител в 4 раза и более в парных сыворотках крови, взятых от больного на 7—8-й день и в Конце 2-й недели болезни. Высокий титр антител, выявленный в этих реакциях при однократном исследовании, не является доказательством наличия болезни, так как положи- [c.155]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология