Подготовка ионитов для хроматографии на колонках

Динамический метод. Это наиболее часто применяемый метод ионного обмена. Ионообменную колонку заполняют ионитом так же, как в хроматографии. При заполнении колонки ионитом важно не допускать попадания воздуха в слой ионита. При работе с промышленными марками ионитов следует провести предварительную подготовку их для анализа [c.377]

Подготовка исследуемого материала. Раствор белка, наносимый на колонку, должен иметь тот же состав и те же значения pH и ионной силы, что и исходный буферный раствор, которым уравновешен ионообменник. Образец переводят в исходный буферный раствор, подвергая его предварительно диализу или гель-хроматографии. Если объем пробы, предназначенный для ионообменной хроматографии, невелик, образец можно развести исходным буферным раствором. Нерастворимые компоненты удаляют центрифугированием или фильтрованием. Если [c.110]

Подготовка колонок. Колонки промывают водным раствором хлороводородной кислоты с объемной долей 0,5%, отмывают дистиллированной водой от хлорид-ионов, промывают ацетоном и сушат в токе сухого воздуха, а затем при 200°С. Подготовленной фазой заполняют колонки, устанавливают их в хроматограф и, не подсоединяя к детектору, кондиционируют при температуре на 20°С выше рабочей в течение 8 ч. [c.71]

Ионную хроматографию применяли также для определения катионов и анионов в образцах отложений при исследовании загрязнения атмосферы тепловыми электростанциями [11]. Для анализа катионов необходима незначительная предварительная подготовка образцов. Натрий, аммоний и калий успешно анализировали в концентрациях 0,02—0,2 млн . Определение следовых (на уровне 1 млрд" ) количеств калия и натрия в воде с погрешностью менее 10% осуществили Надалин и Фулмер [12]. Такую точность анализа образцов воды, питающей котлы, обеспечили с помощью концентрирующей колонки. [c.159]

Подготовка колонки. Для анионообменной хроматографии белков обычно применяют ДЭАЭ-сефадекс А-50. 1,0 г ионообменника суспендируют в дистиллированной воде и оставляют на 1 ч, после чего надосадочную жидкость вместе с медленно оседающими мелкими частичками декантируют. Затем ионообменник отмывают от ионов С1" 0,5 М NaOH. Избыток щелочи отмывают дистиллированной водой и продолжают дальнейшее отмывание кислотой. В связи с тем, что белки сыворотки крови обычно фракционируют в фосфатном буферном растворе, в качестве кислого отмывающего раствора применяют 0,1 М фосфорную кислоту. Избыток кислоты в свою очередь отмывают дистиллированной водой, а затем ионообменник отмывают стартовым буферным раствором до тех пор, пока не наступит равновесие. Проще всего отмывание вести фильтрованием на воронке Бюхнера, поскольку при этом удобно не только отмывать, но и анализировать промывную жидкость. [c.216]

Свойства синтетических ионитов целиком заеисят от числа и типа фиксированных ионов, а также от строения матрицы, точнее от количества поперечных связей в ней. Важнейшим условием успешного разделения веществ при помощи ионообменной хроматографии является правильный выбор ионообменника, его подготовка, а также определение условий проведения анализа, особенно размеров колонки. [c.351]

Изучение экстракции урана(1У) и (У1) производили методом колоночной распределительной хроматографии с обращенной фазой с использованием в качестве носителя неподвижной фазы порошка фторопласта-4. Экстрагентом служила неразбавленная Д2ЭШС,, имеющая удельный вес 0,967. Подготовка колонки и методика работы изложены в предыдущих сообщениях [6,7], Изучение экстракции урана(1У) и, (У1) из хлорнокислых, солянокислых, сернокислых, фосфорнокислых растворов осуществляли следующим образом на подготовленную к работе хроматографическую колонку наносили определенное и постоянное для всей серии опытов количество урана(1У) или (У1) - около 200 мкг. Затем пропускали через нее раствор кислоты определенной концентрации до полного элюирования сорбированных ионов. В случае высоких значений коэффициентов распределения элюирование вели до появления ионов урана в элюате. Строили выходные кривые, по которым определяли значение свободного объема, соответствущего максимальному выходу урана. Расчет коэффициентов распределения производили по формуле [c.150]

Ионообменная хроматография заключается в ионном обмене между полимером, заполнившим колонку, и заряженным белком, пропускаемым через колонку. Различают два типа ионообменников. Катионообменник — КМ-целлюлоза — это полимер целлюлозы, к которой по ОН-группе пришита карбоксиметильная группа. Подготовка смолы к работе — пропускание через нее 0,5М NaOH. В результате образуется солевая форма с катионами N3+. Затем пропускаем через колонку катионы белка. Они вытесняют На и занимают его место. Прочность связи (электростатической) зависит от величины положительного заряда, т.е. числа ионизированных ННз" -групп. Анионообменник — ОЕЛЕ-целлюлоза. Предварительная обработка анионообменника щелочью или кислотой приводит к образованию солевой формы. Ионы С1 или ОН" обмениваются на анионы белка. В случае ионного обмена прочность связи белка с ионитом определяется величиной заряда белка. Для разделения кислых и нейтральных белков используют анионообменники, для разделения основных белков — катионообменники. Элюцию осуществляют 1) буферными растворами с изменяющимися значениями pH (возрастающими или убывающими) при этом белки разделяются в соответствии с их зарядами, т.е. отходят от заряженной группы ионита в Р1 2) буферным раствором того же значения pH, но содержащим катионы (анионы) с большим сродством к ионообменнику (вытеснение по величине заряда). [c.51]