Нанесение образца на градиент

Любой из описанных типов ячеек может быть использован для оценки термической стабильности полимера и измерения кинетических характеристик путем измерения выхода летучих продуктов деструкции при заданной температуре и определенной продолжительности нагрева. Важное значение для получения воспроизводимых результатов в методах быстрого нагрева пиролизуемого образца имеют методика нанесения образца на филамент [411, его размер [42], и т. п. Использование ленточного фила-мента [43] улучшает воспроизводимость метода, если образец наносится из раствора на площадь рабочего участка. Температурный градиент на ленточном филаменте изучали путем наблюдения (через микроскоп) за плавлением проб стандартного соединения, помещенного в разных участках ленты. Изменение темнературы на рабочем участке меньше 4° С нри температуре пиролиза 400° С. [c.170]

После нанесения образца включают ток ионы с самой высокой подвижностью движутся к соответствующему электроду первыми. На некотором расстоянии от них следуют самые малоподвижные ионы, а ионы образца, обладающие промежуточной подвижностью, располагаются между ними соответственно их относительным подвижностям. Если подвижности ионов образца очень близки, разрешение можно улучшить путем внесения в исходный образец синтетических амфолитов, называемых ионами-прокладками. Эти ионы по сравнению с ионами образца обладают промежуточной подвижностью и, располагаясь между ними, способствуют разделению последних. Ионы-прокладки сходны с теми, которые применяются при электрофокусировании. Они создают градиент pH между ведущими и замыкающими ионами, способствуя тем самым дополнительному разделению ионов образца по принципу электрофокусирования. Изотахофорез обладает очень высокой разрешающей способностью и применяется как для аналитического, так и для препаративного разделения самых разнообразных веществ. [c.136]

Образец (10 ед.) получен путе.ч гель-фильтровааия на сефадексе. После нанесения образца колонку промывали буферным раствором Б со скоростью подачи 10 мл/ч. Десорбцию проводили в линейном градиенте 50 мл буферного раствора Б — 50 мл буферного [c.22]

При введении образца непосредственно в колонку концентрация компонентов разделяемой смеси в начальном участке колонки чрезвычайно высока. Обычно при этом наступает перегрузка колонки. Чтобы избежать перегрузки и увеличить емкости колонки, используют градиент жидкой фазы. Начальный участок колонки имеет при этом высокое содержание жидкой фазы, в которой может раствориться образец. После установления нормальных концентраций жидкости и пара можно использовать обычное количество жидкой фазы. Таким образом, при удалении от входа в колонку относительное количество жидкой фазы на твердом носителе постепенно уменьшается. В конце колонки относительное количество жидкой фазы даже меньше обычно используемого количества. Уменьшение количества жидкой фазы с расстоянием от входа в колонку может по желанию быть линейным или нелинейным. Локке и Мелоун [33] получили примерно одинаковые эффективности для колонки с градиентом жидкой фазы и обычной колонки, но степень разделения в колонке с градиентом жидкой фазы была лучше. Однако дополнительные осложнения, связанные с трудоемкостью нанесения жидкой фазы, ставят под сомнение выигрыш в степени разделения. [c.93]

Раствор 32 р рр к в 0,1 мл 0,1 М натрийацетатного буфера, pH 5,0, наслаивают на градиент. Чтобы нанести образец на поверхность градиента, а не пробирки, применяют длинную пипетку. Рекомендуется в ходе нанесения использовать какую-нибудь, прочную подставку для руки. Крыщки пробирок покрывают тонким споем высоковакуумной смазки и завинчивают, ротор закрывают крышкой и центрифугируют при 4°С 6 ч при 39 ООО об/мин. [c.234]

С особенной осторожностью следует подходить к регистрации поглощения при разделении методами ВЖХ очень малых количеств белка. При этом либо из-за растворителя, либо из-за примесей может повышаться уровень базовой линии или могут появляться артефактные пики. Результаты определения площади пиков следует корректировать путем вычитания всех возможных компонентов сигнала от растворителя, которые выявляются в тщательно проводимых контрольных экспериментах (например, при предварительных прогонах элюирующих градиентов или при нанесении на колонку только компонентов буфера, в котором содержится образец). Хотя детектирование при 205 нм может быть в 30 раз чувствительнее, чем при 280 нм, реальное превышение чувствительности часто составляет не более 10 раз из-за плохого соотношения сигнала и фона. В этом случае увеличение оптического пути кюветы не дает преимуществ, так как увеличивается и сигнал, и фон. Для того чтобы свести к минимуму эти неблагоприятные эффекты, необходимо использовать растворители и другие ингредиенты максимально возможной чистоты. Кроме того, в тех случаях, когда при разделении идет речь о сигналах, близких к предельной чувствительности детектора, рекомендуется использовать для очистки воды такие системы, как патрон NORGANI . Еще большего уменьшения нежелательных эффектов можно добиться, пропуская растворители перед употреблением через матрицу для обратнофазовой хроматографии. [c.128]

Перед ИЭФ и НЭГрН с поверхности геля отсасывают все растворы н наносят образец, (Одну трубку следует оставить для холостого опыта, чтобы определить конечный градиент pH.) Поверх нанесенных образцов наслаивают по 20 мкл покрывающего буфера, а свободные верхние части трубок и верхнюю камеру заполняют верхним буфером так, чтобы его уровень был на 1 см выше верхнего конца трубок. [c.79]

Как отмечалось выше, при нанесении образца на более плотный раствор без предварительно созданного градиента граница будет разрушаться под действием конвективных токов. Виноград заметил, что если приготовить образец в растворе очень низкой плотности, то вследствие диффузии растворенного вещества, используемого для увеличения плотности более плотного раствора со временем, перепад плотности, генерируемый на поверхности раздела, будет медленно распространяться вдоль центрифужной пробирки, образуя пологий градиент. Под границей, образуемой распространяющимся градиентом, градиент отсутствует и имеет место конвекция. Однако в распространяющемся градиенте и над ним происходит стабилизация, предотвращающая конвекцию. Ясно, что в течение седиментации материала градиент будет двигаться перед ним, поэтому материал постоянно будет находиться в градиенте плотности, что дает возможность нормального хода седиментации. Кроме того, если растворенное вещество в более плотном растворе обладает особо высокой плотностью (для этого чаще всего используют s l), то соль будет также в незначительной степени седиментировать с образованием дополнительного стабилизирующего градиента. Этот метод известен под названием зональной седиментации в самогенерирующемся градиенте плотности. [c.317]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология