Качественная хроматография сахаров на бумаге

Полный гидролиз полисахарида проводят для установления природы и соотношения составляющих его моносахаридных остатков. Качественный анализ гидролизата в настоящее время неизменно выполняют с помощью распределительной хроматографии на бумаге, что требует лишь микроколичеств сахаров и вместе с тем дает возможность идентифицировать присутствующие нейтральные, основные и кислые моносахариды. По хроматографии углеводов существует обширная литература [91, 97, 127, 131, 162]. Было испытано множество систем растворителей и много обнаруживающих реагентов как специфических, так и неспецифических, и составлены таблицы относительных скоростей движения сахаров на бумажных хроматограммах [131]. Для окончательной идентификации определенного сахара не достаточно одного только хроматографического анализа. [c.303]

Количество редуцирующих сахаров в гидролизате полисахарида определяют по восстановлению 2,3,5-трифенилтетразолия хлористого (ТТХ), используя в качестве стандарта раствор D-глюкозы. Качественный моносахаридный состав полисахарида определяют методом хроматографии на бумаге с соответствующими свидетелями. [c.148]

При помощи метода бумажной хроматографии можно не только определить качественный состав раствора сахаров, но и дать приближенную их количественную оценку. Для этого на лист фильтровальной бумаги наносят, в порядке уменьшения концентрации, ряд растворов отдельных сахаров от 20 до 10% (20 17,5 15 12,5 10%) и затем хроматографируют. [c.157]

Качественный анализ сахаров методом хроматографии на бумаге (по В. В. Рачинскому и Е. И. Князятовой). [c.156]

Качественный и количественный анализ смеси продуктов гидролиза — метилированных сахаров. Как уже упоминалось, разделение метилиро- ванных сахаров производится при помощи хроматографии. Хроматография на бумаге используется для разделения метилированных сахаров со свободными полуацетальньщи гидроксилами (например, после метанолиза и последующего кислотного гидролиза). Газожидкостная хроматография может быть использована для анализа мefилгликoзи-дов метилированных сахаров непосредственно после метанолиза. В этом случае легко осуществляется и количественное определение компонентов. О сочетании ГЖХ с масс-спектрометрией в хромато-масс-спектрометрах говорилось в разделе Олигосахариды . [c.69]

Качественные методы, предназначенные для определения наличия интересующих веществ в пробе с помощью хроматографии на бумаге, являются не только экспрессными, но и массовыми, позволяющими анализировать одновременно много проб. При анализе проб, отобранных на различных стадиях технологического процесса, качественный анализ становится полуколичест-венным. Сравнение интенсивностей окрасок пятен на хроматограммах проб, отобранных в различное время, дает возможность судить о скорости увеличения (при гидролизе) или уменьшения (при биохимических процессах) концентрации тех или иных сахаров. В зависимости от содержания редуцирующих веществ в пробе применяют хроматографирование на лопатках из хроматографической бумаги пли на полосках. [c.82]

Нами исследованы полисахариды, выделенные И. Л. Тыдель-ской по методу Фуллера [12] из следующих штаммов стрептококков группы А, группы Д и атипичного штамма, выделенного от больного. Этот штамм по ряду свойств относится к группе Д. Проведен качественный анализ состава сахаров, входящих в полисахариды, выделенные из перечисленных штаммов. Анализ проводили методом хроматографии на бумаге, растворитель пиридин — бутанол — вода (3 2 1,5) [2], проявитель — анилингидрогенфталат [13]. Хроматограммы гидролизатов полисахаридов, выделенных из стрептококков, представлены на рис. 1—3. Во всех полисахаридах был найден гексозамин, определенный по методу Элсона и Моргана. [c.291]

Первое сообщение об использовании ТСХ для изучения сахаров появилось в 1961 г. [404]. В настоящее время этот метод находит широкое применение для идентификации и разделения углеводов всех типов. ТСХ отличают более высокая чувствительность и скорость разделения, чем при хроматографии на бумаге. Прекрасный обзор наиболее важных работ, посвященных различным аспектам применения ТСХ в области химии углеводов, опубликован в 1976 г. [405]. Практические вопросы качественного и количественного анализа, а также препаративного ТСХ-разделения углеводов подробно рассмотрены в трех статьях Уинга и БеМиллера [406]. [c.64]

Таким путем удается добиться и разделения сахаров. Хроматография на бумаге была применена для качественного анализа редуцирующих сахаров в таких разнообразных материалах,. как яблочный сок, яичный белок и кровь [49, 216]. Для локализации положения отдельных сахаров на бумаге был применен аммиачный раствор окиси серебра, хотя в более поздней работе указывается, что флуоресценция, появляющаяся после конденсации редуцирующего сахара с ж-фенилендиамином, дает более надежные результаты. Как силикагель, так и фильтровальная бумага были применены для хроматографического разделения органических кислот, выделенных из фруктов [99, 139]. На этом же принципе основано определение молочной кислоты в молоке и янтарной — в яичных продуктах [60]. Особый интерес для биохимика представляет применение хроматографии на бумаге для разделения пуринов, пиримидинов и нуклеозидов из гидролизата нуклеиновой кислоты [134]. Удалось улучшить метод определения витамина В в рыбьих жирах и продуктах облучения эргостерина, основанный на измерении характерной абсорбции в ультрафиолетовом свете или интенсивности окраски производных с треххлористой сурьмой точность определения была значительно повышена после хроматографического удаления примесей, мешающих определению [79, 95]. [c.164]

Определение моносахаридного состава проводится анализом продуктов кислотного гидролиза или. чаще, мета-нолиза сахарида. Состав продуктов кислотного гидролизата анализируется с помощью хроматографии или электрофореза на бумаге. Нередко используется коммерческий углеводный анализатор, разделение осуществляется на ионообменных смолах методом распределительной хроматографии в водно-спиртовой смеси или в виде боратных комплексов сахаров. Скорость гидролиза гликозидных связей, образованных остатками нейтральных, амино- и дезокси-сахаров, различна. Легче всего отщепляются остатки сиаловых (N-ацетилнейраминовой, N-гликолилнейраминовой) кислот, труднее всего расщепляются свяэи, образованные остатками амино-сахаров и уроновых кислот. Фуранозиды гидролизуются значительно быстрее пиранозидов. В итоге при гидролизе олигосахарида может иметь место неполное расщепление связей или кислотная деструкция образующихся моносахаридов, что искажает результаты анализа. Лучшие результаты дает метанолиз в присутствии газообразного хлористого водорода (1.7 н. H l, 80 С, 18 ч) — в этом случае образуются метилгликозиды, устойчивые к кислотной деструкции. Качественный и количественный состав продуктов метанолиза определяется методом газожидкостной хроматографии в виде триметилсилильных или трифторацетильных производных. [c.463]

Сахара (Fis her und Doerfel, 1954). Одномерная нисходящая хроматография на ватманской фильтровальной бумаге № 1 (длиной 55 см) служит средством для качественного и количественного определения углеводов. Поскольку разделение осуществляется при одностороннем цикле, на один и тот же лист моншо нанести большое количество образцов и синтетических стандартов. Бумагу помещают в резервуар для хроматограмм и в течение 2 ч она приходит в равновесие с паровой фазой растворителя. Растворите.пь состоит из этилацетата, пиридина и воды в соотношении 40 11 6 (по объему). Разделение сахаров завершается через 16—18 ч при комнатной температуре. (25° С). Лист высушивают в вытяжном шкафу в течение 30 мин. [c.27]