Суспензии клеток нз различных тканей

Определение поглощения света в растворах или других гомогенных средах является хорошо известной операцией, результаты которой допускают простое, основанное на законе Бэра истолкование и выражаются в молекулярных коэффициентах поглощения, называемых также коэффициентами экстинкции (попытки придать различный смысл этим терминам не имели успеха на практике). Экспериментальное определение поглощательной способности растений является менее простым, и часто точный смысл результатов проблематичен. Измерения световой энергии, поглощенной листьями, водорослями или суспензиями клеток, осложняются рассеянием, которое имеет местр не только в тканях, но даже и в суспензиях отдельных клеток, потому что размеры клеток ( 10- см) больше, чем длина волны видимого света ( 5- 10 см). Выражение результатов в терминах констант поглощения пигментов усложняется не только рассеянием света на границах фаз, но и неоднородным распределением пигментов в клетках и тканях, а также смещением и деформацией полос поглощения вследствие адсорбции и образования комплексов. Пусть, например, мы измерили энергию / пучка света, падающего на растительный объект (лист, слоевище или суспензию клеток), и энергию Г пучка, выходящего из этого объекта, приняв меры к тому, чтобы суммировать выходящий пучок по всем направлениям, с учетом не только света, проходящего вперед (Г), но и отраженного назад (/ ) это позволит избежать грубых ошибок, которые может внести рассеяние. [c.81]

В последнее время проведено много работ по проводимости в биологических системах (отдельные клетки, клеточные суспензии и 1 летки тканей) при применении токов различной частоты (от 500 до 10 000 000) периодов в секунду. Вообще с возрастанием частоты сопротивление в биологических системах падает. Чтобы понять кажущееся падение сопротивления биологических систем с возрастанием частоты, необходимо качестввкнХ разобрать поведение переменного тока в различных цепях. Если конденсатор соединить последовательно с источником постоянного тока, то возникает мгновенный ток, заряжающий конденсатор. Однако, после того как конденсатор заряжен, ток в идеальном конденсаторе [c.187]

Первый этап выделения клеток одного типа из ткани, содержащей различные их типы, состоит в превращении ткани в суспензию отдельных клеток. Это достигается разрушением внеклеточного матрикса и межклеточных контактов, удерживающих клетки. Обычно самый высокий выход жизнеспособных клеток получают из эмбриональных гканей или гканей новорожденных. В этом случае процедура разделения [c.201]

Культуры каллюса начинают свой рост из растительной ткани, и такой тип культуры используется для поддержания материала. Культуры каллюса обычно поддерживаются на поверхности твердой агаровой среды. По этой причине различные участки каллюса оказываются в различных условиях окружающей среды поэтому в большинстве случаев для биохимических исследований используются диспергированные клетки каллюса, растущие в суспензии. При возвращении на твердую среду клетки претерпевают определенную последовательность клеточных делений, приводящих к появлению адвентивных эмбрионов (Reinert et al., 1977). [c.17]

Среди современных приемов исследования особое место занимают методы культуры клеток и тканей. Разработан комплекс экспериментальных методов, позволяющих поддерживать рост и размножение растительных клеток, изолированных из растений и помещенных для выращивания на специальные стерильные питательные среды. В этих условиях клетки утрачивают признаки, характерные для той ткани, из которой они были взяты, и в дальнейшем ведут себя как независимые одно-клеточные организмы. При выращивании на твердой питательной среде размножающиеся клетки формируют видимые простым глазом колонии (культура ткани, или каллюс), а при выращивании в жидкой пиtaтeльнoй среде возникает суспензия, состоящая из одиночных клеток и различных по числу клеток агрегатов (культура клеток). Это состояние неорганизованного роста и размножения клеток можно поддерживать в течение [c.9]

I. Кратковременные культуры (4—24 ч). Кратковременное поддержание клеток в суспензии для анализа чувствительности к препаратам возможно для клеток из любого источника. Если клетки получены из биопсийного материала опухоли человека, то тест-система имеет ряд теоретических преимуществ способность к росту не является лимитирующим фактором, поскольку рост в этой системе не требуется разрастание клеток стромы и клональный отбор сведены к минимуму, так что результаты могут быть получены быстро, что особенно важно, если испытание проводится с клиническими целями. Метод получил широкое использование в ФРГ при изучении чувствительности к ряду химиотерапевтических препаратов различных типов опухолей [13, 14]. Модифицированный метод с использованием либо клеток, либо фрагментов тканей был применен Силвестрини с сотрудниками [10] также для различных типов опухолей. В обоих вариантах исследовали включение нуклеотидов, меченных тритием, в ДНК или РНК. Ограничения этого метода заключаются главным образом в короткой продолжительности опыта это исключает возможность длительного воздействия лекарственных средств в течение одного или нескольких клеточных циклов. Следовательно, этим методом нельзя исследовать обратимость действия лекарства и остаточную цитотоксичность, что существенно ограничивает круг исследуемых препаратов. Было показано, что при использовании этой тест-системы получаются ложно-отрицательные результаты действия адриамици-на [14], хотя имелись сообщения об успешном применении системы при анализе действия других лекарств с иными механизмами действия [10]. [c.260]

В качестве осмотически активных веществ обычно используют различные, сахара , глюкозу, сахарозу, маннит и сорбит. Маннит применяют чаще, чем сорбит, так как он обладает слабой проникающей способностью в клетки, проникновение в клетки сорбита сопровождается и проникновением ферментов. Применяется также смесь сорбита и маннита. Использование в ферментных системах растворов глюкозы и са.харозы создает условия, близкие к условиям культивирования клеток, хотя эти сахара активно проникают через мембрану. Для некоторых видов тканей применение сахаров не дает хороших результатов. В этом случае используют в качестве осмотических стабилизаторов солевые растворы, хотя известно, что соли обладают большей проникающей способностью, чем сахара, и снижают активность некоторых гидролитических ферментов. Растворы макро- и микросолей часто берут за основу, к которой добавляют другие осмотически активные вещества. Это смягчает процесс выделения протопластов, особенно если он длителен, и приближает его к условиям культивирования ткани в суспензии. Неправильный выбор осмотического агента может привести к разрыву плазмалеммы либо вызвать спонтанное слияние протопластов и образование многоядерных клеток оптимальными для выделения протопластов являются 0.3 до 0.7 М растворы. [c.168]

Первый этап выделения клеток одного типа из ткани, содержащей различные их типы, состоит в превращении ткани в суспензию отдельных клеток. Это достигается разрушением внеклеточного матрикса и межклеточных контактов, удерживающих клетки. Обычно самый высокий выход жизнеспособных клеток получают из эмбриональньк тканей или тканей новорожденных. В этом случае процедура разделения клеток включает обработку ткани протеолитическими ферментами (такими, как трипсин и коллагеназа) и соединениями, связывающими (или хелатирующими) (такими, как этилендиаминтетрауксусная кислота - ЭДТА), определяющими адгезию клеток. Затем, подвергнув ткани мягкому механическому разрушению, их разделяют на отдельные клетки. [c.201]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология