Диизопропилфторфосфат ДПФ

Обычным реагентом является диизопропилфторфосфат (ДПФ) [c.714]

ПРОНАЗА, смесь частично очищенных протеолитич ферментов из микробов 31гер1отусе5 gri.seus, содержащая нейтр. и щел. протеиназы (см. Протеолитгтеские ферменты), а также протеиназы, близкие по характеру действия химотрипсину и карбоксипептидазам. Мол. м. компонентов 16 000—20 ООО. Обладает широкой субстратно специфичностью, при pH 7—8 гидролизует в казеине и альбумине 80—85% пептидных связей. Активность разл. комнонентов П. подавляется хелатами, диизопропилфторфосфатом, хлоркетонами. Активизируется Са +, Со +, Мп +, Примен. при исследовании строения белков ПРОПАЗИН. триазин [c.480]

Если препарат карбоксипептидазы уже освобожден от примеси эндопептидаз, обработку диизопропилфторфосфатом следует опустить. В этом случае кристаллы карбоксипептидазы А (5 мг) суспендируют в [c.155]

Если на химотрипсин воздействовали диизопропилфторфосфатом, меченным то P оказывался прочно связанным с ферментом ковалентной связью. Дальнейшие эксперименты показали, что при денатурации меченого фермента и последующем его гидролизе кислотой высвобождения Р не происходит. Образующийся радиоактивный фрагмент был [c.107]

Что представляет собой группа —в этом уравнении Опыты с диизопропилфторфосфатом указывают на то, что —0 -группа принадлежит ег-195. Однако этому предположению противоречит очень слабая кислотность —СНгОН-группы. Кроме того, согласно другим данным, роль группы —В выполняет имидазольная группа гистидина. Например, известно, что каталитическая активность химотрипсина при гидролизе сложных эфиров меняется с изменением pH. В то время как кон- [c.108]

Диизопропилфторфосфат Синтетическое вещество 3 10 [c.761]

Г,-промежут, продукты в синтезе инсектицидов, пластификаторов, экстрагентов, огнестойких гидравлич. жидкостей и др. См, также Диизопропилфторфосфат, Метил-дихлорфосфат. [c.493]

Ингибиторы X.- ионы тяжелых металлов, борорг, к-ты, диизопропилфторфосфат и др. [c.263]

В 1949 г. было показано, что один из ядов нервно-паралитического действия, диизопропилфторфосфат (ДФФ), инактирует химотрипсин. [c.107]

Гидроксильная группа боковой цепи серинового остатка атакует молекулу диизопропилфторфосфата у атома фосфора, замещая атом фтора. Заметим, что эта реакция представляет собой реакцию нуклеофильного замещения у атома фосфора (реакция типа 1.В, табл. 7-1), но в этом случае она протекает на ферменте, обычно катализирующем реакцию замещения у атома углерода карбонильной группы. Молекулу диизопропилфторфосфата можно рассматривать как псевдосубстрат (квазисубстрат), который реагирует с ферментом аналогично настоящему субстрату, но который не обеспечивает нормального завершения реакции. [c.107]

Такая же последовательность аминокислот в окружении реакционноспособных остатков серина была вскоре обнаружена в трипсине, тромбине, эластазе и трипсиноподобном ферменте коконазе, используемом тутовым шелкопрядом для освобождения из кокона [27]. Близкая по химической структуре последовательность, содержащая GIu-Ser-Ala, была обнаружена в ацетилхолинэстеразе. Таким образом, существует семейство сериновых пептидаз и эстераз, для которых характерна общая последовательность аминокислот вокруг реакционноспособного серина и способность ингибироваться диизопропилфторфосфатом [28]. [c.108]

Неожиданным явился разрыв связи —ЦиЗОзН.Сер— под действием химотрипсина. В контрольных опытах с химотрипсином, который предварительно инкубировался со специфическим ингибитором — диизопропилфторфосфатом, разрыва [c.203]

Этот фермент может быть выделен из экстрактов поджелудочной железы в чистом виде [128], но до использования для определения последовательности аминокислот его рекомендуется инкубировать с диизопропилфторфосфатом, чтабы инактивировать возможные примеси химотрипсина, трипсина и субтилизина [122, 267, 300]. Основные свойства и специфич-кость действия карбоксипептидазы подробно рассмотрены в ряде работ [228 293]. В Других работах [114, 136, 226, 320] приводятся данные об использовании фермента для определения последовательности аминокислот в белках. Карбоксн-Пептйдаза специфична в отношении С-концевых аминокислот [c.232]

Регуляция путем ингибирования. Ингибирование ферментов может быть необратимым и в этом случае вызывается обычно внешними факторами, например, нагреванием, ядами, денатурирующими агентами. Примеры необратимого ингибирования - действие диизопропилфторфосфата на сериновые ферменты, связывание гидроксильных или тиоловых групп в активном центре ионами тяжелых металлов, например при взаимодействии пдра-хлормеркурибензоата с 8Н-группами остатков цистеина в АЦ фермента. Действие необратимых ингибиторов не регулируется. [c.34]

Хотя доказательства механизма с образованием ацилфермента весьма многочисленны, существует лишь немного четких указаний на то, что центром ацилирования является гидроксильная группа серина, а не, например, азот имидазола. Наиболее четким доказательством обязательного участия серина является, пожалуй, эксперимент, в котором НО-группа удаляется. Это возможно ввиду того, что атом кислорода серина может быть ацилирован и тем самым превращен в хорошую уходящую группу такими неспецифичными реагентами, как диизопропилфторфосфат (см. выше) и то-луол-м-сульфонилфторид. Тозиловый эфир (32), полученный таким способом, отщепляет толуол-м-сульфоновую кислоту при обработке [c.484]

Бекмановская перегруппировка оксимов ацетофенона Декарбонилирование муравьиной кислоты Декарбоксилирование мезитиновой кислоты Гидролиз диизопропилфторфосфата Гидролиз этилвииилового эфира [c.68]

Функциональные группы активного центра химотрипсина идентифицированы с помощью необратимых ингибиторов. Остаток Ser-195 был модифицирован диизопропилфторфосфатом и фенил-метилсульфофторидом, а остаток His-57 — К-тозил-Ь-фенилала-ннл-хлорметилкетоном <см, рнс. 89 и с- 171). Двухстадинность процесса химотрипсинового гидролиза была обнаружена при изучении кинетики гидролиза п-нитрофенилацетата. [c.197]

Смотреть страницы где упоминается термин Диизопропилфторфосфат ДПФ : [c.714] [c.62] [c.145] [c.249] [c.696] [c.155] [c.561] [c.56] [c.352] [c.451] [c.542] [c.594] [c.107] [c.320] [c.234] [c.107] [c.231] [c.286] [c.13] [c.124] [c.422] [c.290] [c.1150] [c.660] [c.145] [c.233]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология