Получение срезов

Низкая симметрия кристаллов виннокислого калия создает широкую возможность (из-за большого числа упругих постоянных) получения срезов с низким температурным коэффициентом частоты (см. рис. 20.25). [c.339]

Полученные срезы выдерживались в смеси этанол — вода — глицерин (1 1 1) и после промывки их водой разделялись под микроскопом с помощью микроманипулятора на отдельные ткани и группы клеток. Выделенные образцы (в количестве 0,004— [c.326]

Получение срезов и изломов [c.284]

В последних исследованиях [200] были усовершенствованы методика получения срезов при низких температурах, методы монтажа и переноса образца и режим анализа, так что рутинным образом можно было изготавливать срезы множества тканей, которые остаются замороженными в гидратированном состоянии после 3—4 ч пребывания в микроскопе. При такой процедуре маленькие кусочки ткани помещаются на конце медных брусков и быстро охлаждаются в жидком фреоне-12. Изготовление срезов производится в диапазоне температур, используемых в новом устройстве для изготовления срезов при низких температурах, установленном на микротоме, в котором большая камера для нарезки охлаждается поступающим в камеру непрерывным потоком газообразного сухого азота. Температура газа, а следовательно, и температура ножа и образца могут контролироваться пропусканием азота через изолированный резистор. Непрерывный направленный поток сухого азота предотвращает любое образование льда в камере нарезки. [c.306]

Для приготовления образца каучука, нерастворимого, но хорошо набухающего в том или ином растворителе, можно применить метод расплющивания набухшего образца между пластинками, прозрачными в ИК области. Растворитель, в котором производится набухание, либо полностью испаряется, либо его поглощение компенсируется поглощением растворителя в кювете сравнения. Набуханию подвергают либо мелкую крошку каучука, либо тонкий срез, полученный на микротоме. В последнем случае кусочек каучука замораживают, поливая его жидким азотом. Размер полученного среза должен быть не меньше размера изображения источника света на образце в спектрометре. Если не удается получить срез достаточно большой площади, удобно применить микроскоп-приставку - совокупность двух оптических систем, смонтированных в одном корпусе. Каждая система (одна - для образца, другая - для сравнения) состоит из двух объективов, расположенных один под другим и способных к независимому перемещению для фокусировки. Один из объективов дает уменьшенное изображение источника света, одновременно фокусируя его на образец. После прохождения образца изображение увеличивается до первоначальной величины и направляется на входную щель. [c.218]

Время получения среза, мин.................. 2. .. 6 [c.163]

Этот метод относится к прямым методам исследования. Сущность этого метода -заключается в получении срезов исследуемого образца толщиной не более 2000 А, которые непосредственно исследуют в электронном микроскопе. [c.181]

Для получения срезов препаратов, не обладающих достаточной прочностью (например, биологических) или пористых тел их предварительно укрепляют, заливая смесью и. бутил- и [c.118]

Однако сам факт препарирования для получения срезов толщиной менее 10 А может привести к частичному разрушению исходной поликристаллической структуры. Кроме того, весьма трудно сохранить нужную температуру в срезе после его получения. [c.66]

Увеличение светового микроскопа лежит в пределах 10 —4-10 , а разрешение составляет (при применении иммерсии) до 0,5 мкм, поэтому метод удобен для исследования поликристаллов. Оптимальная толщина образцов при наблюдении в проходящем свете 2—50 мкм (в зависимости от прозрачности и двойного лучепреломления образца), и для исследования пригодны только пленки или тонкие срезы. Техника получения срезов практически такая же, как для электронного микроскопа, но благодаря большей толщине среза значительно лучше сохраняется исходная морфология образца. [c.68]

Для получения срезов и сколов пользуются также быстрым замораживанием студней его стараются провести в таких условиях, в которых растворитель переходил бы в стеклообразное состояние, не кристаллизуясь. После скалывания образца с поверхности скола испаряют часть растворителя в замороженном состоянии и снимают с вытравленной таким образом поверхности реплику, которая и изучается с помощью электрон- [c.102]

Для построения подобных кривых разработана методика получения тонких срезов с поверхности поперечных шлифов блока так, чтобы длина среза была равна радиусу поперечного сечения. Полученный срез фотографируется последовательно на несколько десятков кадров, из которых затем собирается панорама структуры в [c.219]

Образующиеся при работе микротома срезы поступают в ванночку, наполненную водным раствором спирта. При правильной работе в бинокулярный микроскоп можно наблюдать продвижение сплошно ленты из срезов после каждого акта резания. Полученные срезы желательно рассматривать в электронном микроскопе без поддерживающей пленки во избежание потери разрешения. Это достигается либо помещением среза прямо на сеточку-объектодержатель, либо на микросетку из коллодия, приготовление которой описано ранее. Срезы непористых препаратов пригодны для исследования сразу после получения. В отношении пористых препаратов могут быть различные случаи. Если препарат содержит элементы с большим атомным номером, что обеспечивает высокую контрастность изображения, то нет необходимости удалять продукт полимеризации из пор в срезах и последние также пригодны для [c.118]

Для приготовления образца каучука нерастворимого, но хорошо набухающего в том или ином растворителе, можно применить метод расплющивания набухшего образца между пластинками, прозрачными в инфракрасной области. Набуханию подвергают либо мелкую крошку каучука, либо тонкий срез, полученный на микротоме. Для получения среза на микротоме небольшой кусочек каучука замораживают, поливая его жидким азотом. Размер полученного среза должен быть не меньше размера изображения источника света на образце в инфракрасном спектрометре. Растворитель, в котором производилось набухание, либо полностью испаряется, либо поглощение его компенсируется поглощением растворителя в кювете сравнения. [c.8]

Для электронно-микроскопических исследований сначала вырезали рабочие части растянутых образцов, затем из них с помощью ультрамикротома УМТ-2 приготавливались срезы толщиной 300 А в продольном и поперечном направлениях. Полученные срезы помещались [c.133]

Рис. 4.11. Схема ручного микротома для получения срезов с волокон [657].

Для получения тонких срезов препаратов, пригодных для электронномикроскопического исследования, используют ультрамикротом, с помощью которого удается получать срезы биологических объектов толщиной до 200 А (5]. Однако в то время как аморфные полимеры, используемые в качестве заливочного материала для биологических объектов, дают прекрасные тонкие срезы, получение срезов кристаллизующихся полимеров сопровождается значительными трудностями. Эти трудности определяются механическими свойствами такого типа полимеров, и поэтому в литературе отсутствуют какие-либо данные об использовании ультрамикротома в этой области. [c.234]

Получение срезов при помощи пластинки часто рекомендуют для учебных целей или для идентификации. Требуемое оборудование несложно и легко осваивается [221, 269]. Первоначально в этом методе использовали латунную пластинку толщиной 0,5 мм, имеющую форму предметного стекла размером 25 X 75 мм. В центре пластинки просверлено отверстие диаметром 0,75 мм. Сложенный вдвое пучок волокон при помощи нитки протягивают через это отверстие, как показано на рис. 4. Пучок должен входить [c.250]

Р н с. 5. Пластинки для получения срезов волокон. [c.252]

При получении срезов полимерных образцов, устойчивых к используемым растворителям, целлоидин дает лучшие результаты, хотя его применение и требует много времени. При получении срезов тканей и волокон использовали матрицу из полиметилметакрилата, содержаш,его около 20% пластификатора. В некоторых случаях это приводит к более высоким результатам, но пластифицированный акрилат чрезвычайно тверд и получаемые срезы очень хрупки, что затрудняет их выпрямление. Спустя некоторое время было найдено, что можно использовать поли-н-бутилметакрилат при приготовлении срезов кожи [179], а при небольших добавках полиметилметакрилата (до 20%) получается матрица сополимера, пригодная для получения срезов многих синтетических полимерных веществ. [c.256]

Микротом Rei hert Oiff U2 (Австрия) позволяет получать срезы толщиной 0,1—20 мкм (и менее) и площадью от 4 до 25 мм . Получаемые срезы могут быть объектами исследования в электронном и световом микроскопах. Микротом имеет устройство для охлаждения объектов до —150 С и получения срезов с замороженных образцов. [c.142]

Внутреннее содержимое может быть обнаружено в большей или меньшей степени на любой стадии процесса препарирования даже в микроскопе с помощью микродиссекции. Однако большинство биологических тканей являются очень мягкими, и более общепринято получение срезов и изломов после стабилизации и обезвоживания. [c.231]

До недавнего времени обычные способы определения толщины срезов приводили к сильно различающимся результатам, в некоторых работах считалось возможным получение очень тонких срезов —толщиной вплоть до 60 А [152]. В ряде работ авторы без достаточных к тому оснований полагали, что ими были получены и исследованы срезы толщиной 100—200 А. Проведенные в последнее время тщательные измерения толщины срезов интерференционным методом показали, что в действительности приходится работать со значительно более толстыми срезами [175, 176]. В указанных работах были получены вполне согласующиеся данные относительно толщины срезов. Особенно тонкие срезы, которые, плавая на поверхности жидкости, представляются серыми в отраженном свете, имеют толщину обычно более 300 А. Наиболее часто применяемые на практике срезы с серебряным блеском обладают толщиной в пределах 500—800 А, а с золотым блеском — более 1000 А. При резании пластических препаратов происходит деформация срезов —сжатие их па 30—50%, которое можно впоследствии устранить [176]. Физические проблемы, возникающие при получении срезов (пригодность ножа и препарата, способ установки ножа, величина поверхности среза, скорость подачи, толщина среза) критически рассмотрены Зитте [177]. [c.120]

Большинство исследователей, к сожалению, к этому вопросу редко обращаются заново, хотя разрешающая способность электронных микроскопов достигла предела (2 А), а при препарировании возможно напылять бесструктурные конденсаты [ 2], использовать негативное контрастирование [9] весьма совершенной стала техника микротомирования, вплоть до возможного получения срезов с замороженных препаратов и т. д. [c.88]

Характер поперечных связей в вулканизованных каучуках, в том числе и наполненных, изучался Студебекером и Неборсом [427]. В основу методики работы одного из этих авторов было положено использование тонких срезов вулканизованного каучука. Перед вулканизацией каучук экстрагировали хлороформом и раствором хлористого водорода в эфире. При получении срезов образец каучука вплавляли в парафин. Микросрезы каучука, предварительно набухшие в н-гексане, обрабатывали раствором литийалюминийгидрида в тетрагидрофуране. Было показано, что в этих условиях после гидролиза протекают следующие реакций [c.227]

Для определения распределения белка внутри гранул носителя готовят тонкие срезы носителя с прикрепленным ферментом, принимая меры предосторожности против нарушения структуры матрицы. Для этого гранулы носителя включают в 20 /о-ную желатину. Частицы геля выдерживают 5 ч при 37 °С в растворе желатины, затем смесь переносят в подходящий для этих целей небольшой контейнер и оставляют на несколько часов в холодильнике. Желатиновые блоки замерзают, их режут микротомом на образцы толщиной 10 мкм. Полученные срезы наносят на предметные стекла и покрывают тонкими покровными стеклами для предохранения от высыхания. С помощью флуоресцентного спектрофотометра записывают спектры поглощения и излучения флуоресцеинизотиоцианата меченной флуоресцеином аминопептидазы, как свободной, так и связанной с агарозным или декстрановым носителем. [c.255]

Микрофотометрическое исследование проводят как на фиксированных (белки, НК), так и нефикспрованных (липиды и ферменты) препаратах. Для НК более достоверные количественные данные могут быть получены при фиксации растительного материала смесью Карнуа или Беккера. Заливку в парафин, изготовление блоков и получение срезов проводят согласно общепринятой гистологической технике. [c.134]

После фиксации нейтральным формалином объекты промывают в проточной воде в течение 24 часов, затем проводят через спирты возрастающей концентрации до абсолютного спирта (25, 50, 75, 96, 100%-ный по 2—4 часа в каждом). После этого обрабатывают в промежуточных средах и заливают в парафиновые блоки. Заливка объектов в парафин, получение срезов и приготовление препаратов проводится обычным путем. Депарафинированные ксилолом срезы окрашивают пиронином Ж в строго одинаковых условиях. [c.165]

Обзоры работ по свойствам привитых целлюлозных волокон [199—201] свидетельствуют о большом интересе, особенно к вопросам структуры этих соединений и влияния структуры целлюлозы на прививку. Для исследования влияния структуры использовали электронную микрофотографию [214, 215]. Бе-лявцева [216] разработала специальные методы получения срезов для этой цели. Сиракаси [217], Хсинг-Мао Чу [218] и Хо [219] применяли метод рентгенографии для изучения изменений конфигурации и тонкой структуры привитых волокон. Аналогичные исследования в области целлюлозных волокон Балабаева [220, 222] и Жбанков [221] проводили с помощью инфракрасной спектроскопии. [c.207]

Для исследования углеродных материалов широкое применение получил метод реплик и отчасти псевдореплик [49, 52]. При этом, как и в случае оптической микроскопии, возникает проблема получения среза хорошего качества для снятия с него реплики. Для выявления элементов структуры материала за счет их избирательного испарения, растворения, окрашивания и т. д. шлифы подвергают химическому, электрохимическому травлению растворами или с помощью электрического тока, а также окислению кислородом воздуха и обработке в солевых растворах при высоких температурах, нагреванию в вакууме и катодному травлению [51]. Из-за высокой стойкости углеродных материалов из указанных методов наиболее перспективен метод катодного травления, разработанный Г. В. Спиваком с сотр. (1953 г.) для выявления структуры различных материалов (стекло, керамика, металлы, сплавы). [c.29]

Подготовленный для резания блок полимера помещают в держатель образцов микротома. Держатель образцов закрепляют в гнезде гониометрического устройства с помощью зажимного винта. Стеклянный нож закрепляют в держателе ножа так, чтобы передняя грань ножа была бы расположена вертикально к плоскости основания прибора. Затем, освободив зажимной винт держателя ножа и поворачивая его, устанавливают нож так, чтобы его передняя грань составляла с вертикалью угол 3—4°, а лезвие ножа располагалось параллельно одной из граней пирамиды. Нож подают к объекту винтом микроподачи на расстояние, едва различимое глазом в бинокуляр (при совмещении нож и пирамида фокусируются в одной плоскости). Медленно вращая микроподачу, производят срез. Полученный срез осторожно снимают препаратор-ной иглой и помещают между двумя предметными стеклами. Для распрямления среза на предметные стекла ставят груз весом 4,9 Н (500 гс) и выдерживают в течение 1 ч. После этого распрямленный срез обрабатывают контрастирующей жидкостью Кг (Нд14), закрывают покровным стеклом и помещают на предметный столик микроскопа для исследования. Толщина срезов не должна превышать 2—3 мкм. [c.69]

На микротоме салазочного типа предпочтительно получать срезы с вулканизованных резин. Тонкие срезы (менее 5 мк) лучше получаются с применением стеклянных ножей полученным срезам нужно дать немного набухнуть в растворителе (ксилол, керосин), чтобы их легче было перенести на предметное стекло микроскопа. Для распределения и выравнивания срезов применяется тонкая кисточка из верблюжьего волоса. Срезы невулканизованных резин набухают очень неравномерно, поэтому обращаться с ними труднее. Однако срезы толщиной 10—50 мк можно переносить без набухания. Такие толстые срезы можно получить при помощи стальных ножей, при этом уменьшается волнистость и срезы меньше слипаются. [c.174]

Кончая наш небольщой экскурс в историю создания ультрамикротома — прибора для получения срезов, пригодных для рассматривания в электронном микроскопе, следует сказать, что мы не упомянулн многих ученых и изобретателей, приложивщих свои знания для решения этой проблемы. Только дружные усилия этих энтузиастов электронной микроскопии могли привести к тому, чго ныне биологи имеют возможность порезать отдельную клетку и рассмотреть детали ее строения. [c.152]

Для подготовки образцов мягкой резины к ИК-анализу применяют в основном следующие методы 1) растворение резины в подходящем растворителе или смеси растворителей [75, 76, 361а, 43-5, 695] 2) пиролиз резины 3) получение срезов на микротоме [c.380]

В системе, пигментированной несколькими пигментами, флокуляция одного из компонентов обнаруживается по изменению цвета. Это один из наиболее широко распространенных методов измерения флокуляции хроматических пигментов в смеси с белыми пигментами. Однако необходимо гарантировать отсутствие фладинга, который также может привести к изменению цвета на поверхности пленки. Другим методом, который может быть использован для систем с несколькими пигментами, является микроскопическое наблюдение флокулятов цветных пигментов в тонких срезах сухой пленки, полученных с помощью микротома Возраст пленки влияет на легкость получения среза, но техника работы проста и позволяет устранить ошибки из-за расслаивания и фладинга. Таким образом, существует ряд методов, позволяющих оценить стабильность дисперсий или способность к флокуляции, начиная от более строгих исследований в разбавленных суспензиях до методов, удобных для использования в практических красочных системах. [c.159]

Введение. Буассона [1, 2] показал, что проявление поверхностей бромида серебра, полученных срезом плавленых масс и полировкой при помощи мягкой ткани, смоченной раствором цианида калия, слабощелочным раствором гидрохинона дает пятна серебра, ограниченные линиями пересечения поверхности плоскостями (111) решетки бромида серебра. Буассона представил в наше распоряжение образцы бромида серебра для рентгеноструктурного исследования природы и ориентировки этого восстановленного серебра относительно бромида серебра. По причинам, которые с тех пор стали очевидными, эти опыты не дали однозначных результатов, и нам никогда не удавалось получить диффрак-ционные максимумы, которые можно было бы приписать восстановленному серебру. Тем не менее эти опыты продолжались в течение долгото времени, и когда появилась необходимость в новых образцах, то в лаборатории методами Стокбаргера и Киропулоса были получены монокристаллы хлорида и бромида серебра, которые нарезали и полировали механическим способом. Было установлено, что эта весьма трудоемкая методика абсолютно неэффективна почти невозможно было приготовить образцы с воспроизводимыми свойствами, и, кроме того, эти образцы нельзя было достаточно удовлетворительно исследовать под микроскопом в проходящем свете. [c.461]

Джоллиф [119] усовершенствовал описанный выше метод получения срезов, заменив металлическую пластинку матовой саженаиолненной ацетатной пленкой толщиной 0,4 мм. Из этой черной пленки нарезают прямоугольники размером 25 х 75 мм, в каждом из которых пробивают три параллельных ряда отверстий по 12 отверстий в каждом ряду. Один ряд расположен посредине прямоугольника, а другие — на расстоянии 6 мм выше и ниже от него. Через о,дно из отверстий иголкой протягивают пучок волокон достаточной толщины для плотного заполнения отверстия, после чего волокна разравнивают легким перемещением их то в одну, то в другую сторону. Затем пучок обрезают с обеих сторон вровень с поверхностью пленки. После этого пленку приклеивают лейкопластырем к предметному стеклу микроскопа размером 25 >с 75 мм и срезы перед рассмотрением накрывают сухим покровным стеклом. [c.251]

Вивиани 1250] впервые описал остроумный метод получения срезов при помощи корковой пробки, хотя Луниак (150] приписывает первоначальное предложение Натузиусу. Впоследствии Герцог [98] усовершенствовал и дополнил этот метод. Обычно мелкозернистую корковую пробку прокалывают цилиндрической иглой. Через полученное отверстие вышивальным крючком или иглой для швейной машины протягивают петлю из прочной [c.252]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология