Полисахариды, удаление из белковых растворов

Обессоливание растворов. С помощью колонки, заполненной сефадексом G-25, можно проводить обессоливание растворов высокомолекулярных соединений. Фракции высокомолекулярных соединений элюируются с внешним объемом колонки, в то время как фракции, содержащие низкомолекулярные соединения, распределяются между подвижной и неподвижной фазами и поэтому движутся с меньшей скоростью. Обессоливание — более быстрый и эффективный метод, чем диализ, и используется, в частности, для удаления фенола из растворов нуклеиновых кислот, сульфата аммония из растворов белков, а также для отделения моносахаридов от полисахаридов и аминокислот от белков. [c.100]

Однако при ферментативных воздействиях всегда приходится учитывать, что препарат фермента может обладать неизвестной активностью, способной изменить выделяемый полисахарид. Удаление белка после ферментативной обработки достигается обычно одним из методов денатурирования. К ним относятся нагревание, действие щелочи , хлороформа с амиловым спиртом (особенно распространеньый метод ), трифтортрихлорэтана , трихлоруксусной кислоты фссфоЕольфрамовой кислоты и т. д. Кроме того, используется избирательная сорбция белков на геле фосфата кальция , бентоните или каолине . Зти же методы, конечно, могут применяться и для удаления неферменткых белков, загрязняющих растворы полисахаридов. [c.486]

Деиротеинизацию осуществляют рядом способов. Наиболее рас-фостранено удаление белков с помощью довольно мягкого метода Севага, основанного на обработке раствора полисахаридов, содержащего белок, хлороформом с добавлением бутанола либо пен-ганола, что приводит к денатурации белка. Иногда примесь белка удаляют, растворяя полисахарид в 5—10%-ном растворе трихлор-уксусной кислоты и отделяя коагулирующий в этих условиях бе-ло к. В последнее время для этих целей применяют различные ферментативные препараты — протеазы. [c.46]

Примесь белков удаляется при помощи трихлоруксусной кислоты (ТХУ) полисахарид растворяют в 5—10%-ной ТХУ, отделяют белковый коагулят центрифугированием, а затем из раствора осаждают полисахарид спиртом. Иногда такие переосаждения полисахарида из раствора в ТХУ повторяют. Метод хорош для освобождения от белков, но не безразличен для полисахарида, вызывая некоторую деполимеризацию (см.с. 109). Более щадящим является метод Севага при обработке раствора полисахарида хлороформом с амиловым спиртом белок собирается на поверхности раздела хлороформ— водный раствор. Пользуются и рядом других реагентов и методов для удаления белков фосфорновольфрамовой кислотой, нагреванием, действием протеолитических ферментов, сорбцией белков на каолине и других сорбентах. [c.55]

Одним из самых мягких приемов удаления белков из раствора полисахарида является метод, введенный Севагом [1]. Белки денатурируются при встряхивании с хлороформом и образуют голь, остающийся после центрифугирования на границе раздела вода — хлороформ. Чтобы облегчить денатурацию, часто вместо воды лучше использовать буфер с pH 4—5 и всегда необходимо прибавлять небольшие количества и-бутанола или к-пентанола. [c.261]

Получение хондроитин-4-сульфата в крупных масштабах основано на экстракции ткани раствором щелочи, удалении белков и фракционном осаждении смеси полисахаридов спиртом. Первоначально для экстракции полисахарида использовали холодный 2%-ный раствор едкого кали или едкого натра [4, 5]. В методике с более мягкими условиями исполь- <уются растворы нейтральных солей [4, 6], но при этом экстрагируется. [ИШЬ незначительная часть хондроитин-4-сульфата, если хрящ не был предварительно выдержан в течение 4—6 недель ири 0° [7]. Ниже приво- 1ится методика, предусматривающая экстракцию растворами нейтральной соли и слабой щелочи [7]. Удаление белка из раствора достигается осаждением фосфорновольфрамовой кислотой 18], денатурацией амиловым спиртом и хлороформом 151 (см. стр. 261) и адсорбцией на каолине с пред- арительной обработкой формальдегидом [9] или без нее [7]. Последний метод описан ниже. [c.347]

У подвергнутых облучению растворов кислоты, кроме падения вязкости в ходе облучения, обнаруживается дальнейшее снижение вязкости после прекращения облучения. Это явление напоминает поведение белков (стр. 239, 245) и полисахаридов (стр. 211). Тейлор, Гринстейн и Холлендер [124] нашли, что в растворе дезоксирибонуклеиновой кислоты, подвергнутом облучению дозой 56 000 р, происходит дальнейшее снижение вязкости даже через несколько часов после прекращения облучения. Снижение вязкости протекает приблизительно с одинаковой скоростью как при 5°, так и при 25° В необлученном контрольном растворе кислоты наблюдалось вполне определенное, но значительно меньшее снижение вязкости. В этих опытах воздух из растворов дезоксирибонуклеиновой кислоты при облучении не удалялся. Г. Батлер [128] обнаружил одинаково быстрое падение вязкости как в растворах, содержавших кислород, так и в растворах, из которых был удален воздух. Даниэльс, Сколз и Вейсс [130] нашли, что кислород ускоряет последействие,, однако они считают, что последействие имеет место и при отсутствии кислорода. Дж. Батлер и Конвей [131], наоборот, не обнаружили никакого последействия в растворах дезоксирибонуклеиновой кислоты после облучения рентгеновскими лучами дозами 7000 и 20 ООО р в отсутствие кислорода последействие наблюдалось этими авторами только в присутствии кислорода непосредственно в ходе облучения. Поэтому основные явления в области последействия нельзя считать прочно установленными. В настоящее время представляется, что данные Дж. Батлера и Конвея [131] более близки к истинному положению вещей, чем данные Г. Батлера [128] и Вейсса с сотрудниками. Данные последних авторов являются сомнительными ввиду возможного присутствия случайных следов кислорода в системе. [c.255]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология