Хроматография ганглиозидов

Количественное определение глюкозы и галактозы в ганглиозидах методом газожидкостной хроматографии. (НФ SE-52 на [c.138]

Колоночную хроматографию ганглиозидов проводят на сорбентах различного типа, таких, как кремневая кислота, флорисил и целлюлоза 7, 8]. Как правило, зоны фракций значительно перекрываются. Однако методом тех удается достичь отличного разделения небольших количеств смеси [1, 9, 10]. В последние пять лет для разделения ганглиозидов мы с успехом используем обе эти процедуры. Разделение проводится на колонках с теми же сорбентами и в тех же самых или близких по составу системах растворителей, которые дают хорошее разделение ганглиозидов на пластинках для ТСХ. Смеси пропиловый спирт — вода, которые нашли применение для разделения ганглиозидов методом ТСХ, в случае колоночной хроматографии малопригодны, так как ганглиозиды в них малорастворимы. Поэтому мы остановились на смеси хлороформ— метанол — вода с добавкой (или без нее) аммиака. Мы использовали самые различные методики колоночной хроматографии и самые различные системы растворителей, но не смогли достичь удовлетворительного разделения всех главных ганглиозидов, содержащихся в неочищенном препарате ганглиозидов мозга. Поэтому предварительное хроматографическое разделение проводилось с целью получения оптимального выхода ганглиозидов Gmi и Gnia (см. табл. 86.1). [c.352]

В обобщающей работе, опубликованной в 1960 г., Кун и сотруд-Аики описали выделение с помощью хроматографии двух кристаллических ганглиозидов 61 и Ог. Из 350 кг мозга крупного рогатого скота было получено около 60 г 61 и 45 г Ог. Позднее (1961) из того же источника были выделены ганглиозиды Оз и ( 4. Ганглиозид Ог (т. пл. 190 °С), движущийся при хроматографировании быстрее других, содержит 2 моль галактозы и по 1 моль стеариновой кислоты, сфингозина, глюкозы, Ы-ацетилглюкозамина и Ы-ацетилнейраминовой кислоты (называемой такл<е лактаминовой кислотой, поскольку она входит в состав олигосахарида, выделенного из молока и имеющего сходное строение с углеводной частью ганглиозида). Способ связи моносахаридных остатков друг с другом был частично установлен на основании результатов исчерпывающего метилирования иодистым метилом в присутствии окиси и гидроокиси бария в диметилформамиде, а также на основе результатов гидролиза и частичного ацетолиза. [c.637]

В дальнейшем химия липидов развивалась медленно, что было связано с трудностями выделения и очистки индивидуальных липидов не случайно наука о липидах получила в это время название сНт 1егсНет1е ( грязная химия ). Лишь начиная с 50-х годов нашего века, после появления методов хроматографии, липидная химия сумела перейти к идентификации и выяснению строения многочисленных липидных веществ. В частности, в 1960—1964 гг. в лабораториях Р. Куна и Э. Кленка была полностью установлена структура четырех основных ганглиозидов мозга С ,, Ср а. Сщь, Ст1ь (открыты ганглиозиды были еще в конце 30-х годов Э. Кленком при изучении мозга больных сфинголипидозами). Новейший период химии липидов связан с исследованием биологических мембран. [c.515]

Аффинная хроматография токсина из Vibrio holerae, меченого 1, на агарозе с присоединенным фетуином или на ганглиозид — диаминопропиламиноагарозе [45] показана на р ис. 6.15. Агароза с присоединенными ганглиозидами может быть использована также для очистки других токсических белков, таких, как ботулин или столбнячный токсин, который, как известно, также образует прочные комплексы со свободными ганглиозидами. [c.134]

Методом хроматографии в тонком слое силикагеля из смеси ганглиозидов мозга возможно выделить хроматографически однородный ган-глиозид О в системе н-пропанол — вода (7 3) с последующей очисткой медленной фракции на колонке с целлюлозой элюцией системой н-бу-танол — пиридин — вода (3 1 1). [c.94]

Приветт и др. [303] обобщили литературу, посвященную методам количественного анализа липидов, а также денситометрии обугленных хроматограмм [304]. Куксис [305] опубликовал обзор работ по количественному анализу липидов посредством сочетания ТСХ и ГХ. Максу и Кварлесу [306] принадлежит обзор методов анализа ганглиозидов. Раузер и др. [307] опубликовали обзор по применению колоночной и тонкослойной хроматографии для количественного анализа смесей полярных липидов. [c.103]

Определение углеводов в гликолипидах и ганглиозидах с помощью газовой хроматографии. (Определение глюкозы, галактозы, га-лактозамина и сиалевой к-ты.) [c.139]

НЫХ В результате хроматографии на ОЕАЕ-сефадексе. Колонку с ятробидсом перед нанесением промывали сначала смесью хлороформ — метанол — 2,5 М раствор аммиака (3 6 1), а затем смесью хлороформ — метанол — вода (3 6 1) для удаления примесей. Элюирование проводили в два этапа сначала смесью хлороформ — метанол (17 3) элюировали сульфатиды, затем смесью хлороформ — метанол (1 2)—чистые ганглиозиды. [c.161]

Полле и др. [682] описали метод микроанализа липидов мозга, основанный на двумерной ТСХ, с использованием многократного элюирования. Первичный экстракт липидов сначала подвергали тех в системе хлороформ — метанол — вода (35 15 2), что позволяло разделить липиды на фракции, содержащие соединения различных классов. Однако исключение составляли фосфатидилхолины, фосфатидилсеринь и фосфатидилинозиты, образующие одну фракцию. Это же относится и к смеси ганглиозидов и протеолипидов, которые также составляют одну фракцию. Последующая хроматография во втором направлении в двух элюирующих системах хлороформ — метанол (1 4), а затем хлороформ — метанол (2 1) и, наконец, повторная хроматография в первом направлении в системе хлороформ — метанол (2 1) позволяла разделить остальные компоненты. Разделенные зоны на хроматограмме окрашивали иодом и проводили количественную опенку с помощью химических методов. Такое определение можно проводить, не превращая фосфат в неорганический фосфор [683, 684]. Широко практикуется карбонизация липидов с последующей денситометрией [681, 685, 686], однако методы требуют стандартизации [687, 688]. [c.205]

При ТСХ олигосахаридов со степенью полимеризации больше 4 также используют непропитанный силикагель. Ковачевич и Ричардс [446] продемонстрировали возможность разделения ряда изомальтодекстринов и олигосахаридов, имеющих единичные ответвления, присоединенные а-(1(—> 3)-связями ка-(1—>-6)-связанным D-глюканам (степень полимеризации до 9—10), с помощью ТСХ в проточном варианте в системе пропанол-1 — нитрометан — вода (5 2 3) за 19 ч при 30 °С. Для анализа смеси мальтодекстринов со степенью полимеризации до 16 на пластинках для ВЭТСХ (температура 40—60 °С) требуется менее 2 ч (хроматографические системы содержат ацетон, этанол, изопропанол и воду). Очевидно, что в настоящее время хроматография на таких пластинках, которую с успехом использовали для анализа ганглиозидов мозга [448, 449], является наиболее эффективным методом ТСХ-разделения высших олигосахаридов, постепенно вытесняющим более старые методы, включая ТСХ на кизельгуре и целлюлозе. Некоторые системы для ТСХ перечислены в табл. 7.7, которая содержит также данные о значениях / 01с и Rf. [c.70]

Концентрации / -глюкозамина, составляющие 1—10 мМ, вызывают торможение роста и обратимые повреждения в С6 глиомах рис. 3, см. вклейку неопубликованные данные). Спустя 6 ч после добавления 10 мМ глюкозамина к культурам клеток наблюдаются значительные изменения метаболизма гликопротеидов и липидов. Синтез гликопротеидов ингибируется, возможно, на уровне образования долихололигосахаридов, поскольку Н-глюкозамин медленнее включается во фракцию полярных липидов, экстрагированных смесью хлороформ метанол вода (1 1 0,3 по объему S. L Friedman, неопубликованные эксперименты). Н-глюкозамин включался в нейтральные гликолипиды и ганглиозиды в обработанных и не обработанных препаратом клетках. Состав меченых липидов, как показали данные тонкослойной хроматографии, был изменен в [c.111]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология