Фосфолипиды, идентификация

Идентификация фосфолипидов. Проведение цветных реакций в видимом и УФ-свете [c.29]

Для идентификации фосфолипидов, входящих в состав биологических мембран, и выяснения их роли в функциях липидного матрикса применяют щелочной гидролиз, а также специфические фосфолипазы. При мягком щелочном гидролизе фосфолипидов образуются жирные кислоты и замещенные глицерофосфаты. В более сильной щелочной среде образуется 5 -глицеро-3-фосфат. [c.24]

Биохимические методы позволяют разделять, выделять и анализировать в чистом виде липидные и белковые компоненты, изучать их физико-химические свойства в свободном состоянии и в составе надмолекулярных комплексов в условиях воздействия различных внешних факторов (температуры, концентрации водородных ионов и др.), исследовать их время жизни , пути биосинтеза и распада этих компонентов. К ним относят методы выделения (недеструктивные и включаюп] ие разрушение клеток) разделения субклеточных фрагментов (хроматография, электрофорез, центрифугирование, иммуноаффинные методы) идентификации и оценки чистоты субклеточных фракций выделения органелл и мембранных систем экстракции липидов и разделения их по классам количественного определения фосфолипидов исследования трансмембранного распределения липидов солюбилизации мембранных белков, их реконструкции и определения функциональной активности реконструированных мембран, выделения и модификации мембранных белков. [c.202]

Общее содержание фосфолипидов в масле облепихи, определенное по количеству фосфора [14], составляет 1%. Идентификация их произведена хроматографией в тонком слое силикагеля-гипса. Газо-жидкостной хроматографией исследованы жирнокислотный состав фосфолипидов. [c.374]

Приготовление реактивов для идентификации фосфолипидов и галактолипидов [c.44]

Для тонкослойной хроматографии применяют подвижный растворитель хлороформ-метанол-вода (65 25 4) или хлороформ-метанол-уксусная кислота-вода (25 15 4 2) проявляют раствором родамина или йодом. Для идентификации аминофосфатидов (кефалина) хроматограмму опрыскивают раствором нингидрина для холинсодержащих фосфолипидов (лецитина) применяют реактив Драгендорфа [15]. Идентифицированы следующие фосфолипиды [9J лецитин (R — 0,6) и кефалин (Rf —0,32). В качестве метчиков применяли синтетический лецитин и фосфолипиды желтка яйца. [c.374]

Идентификация фосфолипидов по фосфору [c.44]

Приведенные данные свидетельствуют о том, что применение хроматографии на бумаге для идентификации и определения фосфолипидов почвы носит эпизодический характер, вероятно вследствие того, что эти соединения составляют лишь незначительную часть органических фосфорсодержащих компонентов почвы. [c.315]

Дополнительное подтверждение результатов идентификации фосфолипидов можно получить, анализируя свободные основания, образующиеся при кислотном гидролизе. Их определяют по значениям Rf и результатам окрашивания после разделения на бумажных хроматограммах [19, 31]. [c.317]

Идентификация фосфолипидов и выделение их из хлебопекарских дрожжей. Совместно с Н. Богословским и Е. Кузнецовой исследовали фосфолипиды хлебопекарских дрожжей. Фосфолипиды выделяли осаждением ацетоном из раствора липидного остатка дрожжей в хлороформе [8]. Выход фосфолипидов составляет 3,3% от липидного остатка. Для идентификации фосфолипиды хроматографически разделяют в тонком слое кремневой кислоты [23]. Идентификацию производили по характерным цветным реакциям с молибденовой синью [24] и 0,5%-ным раствором нингидрина в 95%-НОМ изопропиловом спирте. [c.429]

Для идентификации фосфолипидов использовали метчики фосфатидную кислоту, фосфатидилэтаноламип, фосфатидилхо-лин, фосфатидилинозит, сфингомиелин. Метчики наносили в две точки, находящиеся на краях тонкослойной пластинки, а исследуемый раствор фосфолипидов — в точки, расположенные в середине хроматограммы. [c.29]

После идентификации фосфолипиды элюировали с пластинки при помощи аспиратора (рис. 27), соединенного с водоструйным насосом. Каждое пятно фосфолипидов, обведенное препароваль- [c.36]

Для качественного и количественного анализа фосфолипидов в настоящее время широко используют тонкослойную хроматографию на силикагеле [3]. При этом применение специфических реагентов, дающих характерное окрашивание для отдельных классов фосфолипидов, помогает осуществить их идентификацию. С помощью ТСХ может быть достигнут количественный анализ фосфолипидов при проведении ден-ситометрических измерений пятен после проявления хроматограммы или путем анализа элюированных веществ на содержание фосфора. [c.270]

Хроматограмму окрашивают парами йода, как описано ниже, для обнаружения пятен фосфолипидов. Ее слегка увлажняют над водяным паром и снимают силикагель в каждом пятне лезвием бритвы. Снятый силикагель переносят в отдельную пастеровскую пипетку с тампоном из стекловолокна в суженном ее конце. По пипетке слегка постукивают до тех пор, пока силикагель не осядет в виде слоя на тампоне из стекловаты. Такую колонку из силикагеля промывают 2 мл смеси хлороформ — метанол (1 1, по объему), а затем 2 мл метанола для элюирования фосфолипидов. Элюаты собирают в пробирки со стеклянными пробками. Каждый фосфолипид разливают поровну в две 15-мл пробирки со стеклянными пробками и в ампулу для лиофилизации и в дальнейшем анализируют. Растворители выпаривают при 37°С в токе азота. Одна пробирка предназначена для анализа на суммарный органический фосфор с целью определения количества каждого присутствующего фосфолипида. Две другие пробы можно подвергнуть кислотному или щелочному гидролизу с последующей идентификацией веществ для установления их возможной структуры. [c.315]

Кислотный гидролиз фосфолипидов и идентификация свободных оснований. В ампулу для лиофилизации, где уже находится фракция очищенных фосфолипидов, полученная в результате разделения с помощью тонкослойной хроматографии (разд. 17.3.4), вносят 2 мл 1 н. НС1. Ампулу запаивают и нагревают при 100 °С в течение 4 ч. Затем ее охлаждают и открывают. Содержимое ампулы переносят в 10-мл пробирку с завинчивающейся пробкой и добавляют к нему 2 мл дважды перегнанного гексана. Перемешивают с помощью встряхивателя Vortex и оставляют на некоторое время для разделения фаз. Удаляют водный слой и лиофилизуют или высушивают его в испарителе. [c.319]

Остаток растворяют в 0,1 мл дистиллированной воды. На хроматографическую бумагу Whatman № 1 наносят отдельно каждую пробу в виде пятна диаметром 10 мм и проводят фракционирование методом нисходящей хроматографии, используя систему растворителей фенол—этанол—уксусная кислота (50 5 6 по объему). В качестве стандартов для хроматографирования и идентификации свободных оснований используют аналогично обработанные известные фосфолипиды или холин, этаноламин, серии и N,N-димeтилэтaнoлaмин [19]. [c.319]

Идентификацию отдельных фракций фосфолипидов проводят по общепринятым методикам (РитрЬгеу, 1969 Флеров, Войнер, [c.95]

После идентификации пятна, сооветствующие отдельным фракциям фосфолипидов, переносят с одной пластинки в виалы для подсчета радиоактивности, а с другой — в пробирки для определения количества фосфолипидов. [c.95]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология