Экстракция липидов

Липиды легко подвергаются окислению и гидролитической деградации. Чтобы затормозить эти процессы, экстракцию липидов проводят при комнатной температуре, применяя растворители, из которых предварительно удален кислород. Извлеченные липиды не упаривают досуха и не оставляют в упаренном виде на долгое время, а сразу растворяют. Экстракты липидов следует хранить в плотно закрытой посуде при —20°С и ниже в присутствии инертных газов. Можно применять антиоксиданты, например 2,6-ди-трет-бутил-л-крезол, который в концентрации 0,005% эффективно предотвращает окислительное расщепление ненасыщенных липидов. [c.68]

Фосс-лет и др.). При исследовании указанных методов извлекаются главным образом свободные липиды. Прочносвязанные липиды не экстрагируются как из продуктов растительного, так и животного происхождения. В связи с этим, а также ввиду значительного окисления липидов во время выделения были предприняты поиски более эффективных способов экстракции. Установили, что достаточно полная экстракция липидов может быть осуществлена, если применять смесь полярного растворителя и неполярного или слабополярного. Обычно используемый в качестве полярного компонента спирт ослабляет прочность комплекса липиды — белки, что обеспечивает полноту экстракции неполярным растворителем. Эффективность экстракции в значительной мере зависит от степени разрушения клеточной структуры исследуемых объектов. Используют гидролиз, разрушение в кавитационной мельнице, измельчение продуктов, предварительно замороженных жидким азотом. [c.212]

Экстракция липидов из биологического материала [c.67]

Применение ультразвука и бутаноловой экстракции липидов с последующей экстракцией позволило получить препараты с удель- [c.165]

Липиды выделяют из биомассы экстракцией эфиром. Из 1 т сухого торфа можйо получить 40—50 кг липидов. По физико-химическим свойствам они близки к растительным маслам, которые используют во многих отраслях промышленности для технических нужд. Возможно отобрать такие культуры микроорганизмов и создать условия культивирования, чтобы в биомассе накапливалось меньше липидов (15—30%), но больше белков (30—40%). В этом случае после экстракции липидов получают ценный кормовой препарат — микробный жмых. [c.134]

Экстракция липидов. Печеночную ткань 100 крыс промывают физиологическим раствором, просушивают на фильтровальной бумаге, взвешивают и измельчают ножницами на холоде. Порции по 5 г ткани гомогенизируют в смеси хлороформ-метанол (2 1) в течение 1 — [c.75]

Экстракция липидов. Кровь, взятую из локтевой вены человека, собирают в центрифужную пробирку, содержащую натриевую соль гепарина, перемешивают легким встряхиванием и центрифугируют 15 минут при 1000 g. К 2 мл плазмы добавляют 30 мл метилаля и метанола (4 1, объем/объем). Перемешивают в течение 30 минут при [c.74]

Проблема экстракции липидов сегодня снова является предметом подробных исследований. Приводимые ниже, проверенные в течение многих лет стандартные методы после создания ХТС были во многих лабораториях проверены методом Шталя. Теперь известно, что эти методы приводят к ошибочным результатам и имеют ряд других недостатков [103, 129]. До настоящего времени, однако, не опубликовано лучших прописей. [c.145]

Экстракция липидов из мозговой ткани. В небольшую коническую колбу с притертой пробкой помещают 300—400 мг мозговой ткани. Ткань растирают стеклянной палочкой и заливают 25 мл свежеприготовленной смеси хлороформа и метилового спирта (2 1). Содержимое колбы энергично встряхивают в течение 3—5 мин и оставляют на 10 мин при комнатной температуре. Затем фильтруют через маленький бумажный складчатый фильтр в фарфоровую чашку и упаривают досуха на бане при температуре не выше 80°С. Осадок растворяют в [c.72]

Экстракция липидов из тканей, их очистка и выделение. Навеска ткани (мозга 200—250 мг, пеЧени 300— 400 мг) помещается в мерную колбу на 25 мл с притертой проб- кой, в которую предварительно наливается свеже приготовленная смесь метанола и хлороформа (1 2). Содержимое колбы энергично перемешивае гся в течение 5 мин., доводится хлороформно- [c.81]

Наиболее распространенным методом экстракции липидов является метод Фолча. Экстракцию проводят смесью хлороформ—метанол (2 1) из расчета 20 частей экстрагирующей смеси на одну часть ткани. Метод позволяет выделить 90—95% всех клеточных липидов. Смеси растворителей, содержащие спирт, экстрагируют также нелипидные вещества (сахара, аминокислоты, соли и т. д.) Для удаления нели-пидных примесей экстракт липидов промывают водон или слабыми солевыми растворами. Однако это приводит к частичной потере кислых липидов. Очистку экстракта можно провести также гель-фильтрацией на сефадексе. [c.68]

Получение масла из мякоти плодов. Процесс сводится к сушке жома (жмыха), измельчению и извлечению из него масла. Для этой цели жмых измельчают в дробилке и подвергают сушке на паровой конвейерной сушилке типа ПКС-10 при 75° в течение 1—1,5 ч до влажности 6—7%. Выход сухого жмыха составляет 7,5—9,0% к массе свежего сырья. Состав сухого жмыха (в %) масла е плодовой мякоти — 15—27, каротина — 12—16 мг%, семян — 45—55%, влажность 4,0—7,0. Процесс экстракции масла из жмыха осуществляют в настоящее время по методу В. Казанцева и А. Охина в батарее из 22 диффузоров подсолнечным или кунжутным маслом при 50— 65° С. Полный оборот батареи 24 ч. Отбор масла из головного диффузора происходит каждые 1,0—1,5 ч. Из хвостового диффузора соответственно выгружают жмых с масличностью 45—50%. В специальном шнековом прессе (экспеллере) отжимают масло из жмыха. Недостатками данного метода диффузии являются потери каротина достигают 20—22%, получаемое масло содержит 15—20% подсолнечного, высокое кислотное число масла, достигающее 10,0—15,0. В связи с этим возник вопрос о применении органического растворителя для экстракции липидов облепихи. В результате проведенных исследований процесса экстракций с различными растворителями (петролейный эфир, дихлорэтан, бензол и хлористый метилен) наиболее эффективным является хлористый метилен (дихлорметан, СН2С12). Последний имеет низкую температуру кипения (41—42°), плотность при 20° С 1336 кг/м , малотоксичен. При экстракции этим растворителем может быть получен высокий выход масла (95%) и каротина (97%) [21]. По-видимому, Экстракция масла из жмыха хлористым метиленом будет наиболее эффективна. Необходимо лишь отработать вопрос полного удаления растворителя из готового продукта. [c.376]

Когда хлоропласты пропитываются глицерином, отрицательное двойное преломление, обусловленное пластинчатой структурой, исчезает вследствие выравнивания показателей преломления пластин и промежутков. Вместо этого появляется положительное двойное преломление, являющееся собственным двойным лучепреломлением правильно расположенных анизотропных молекул. Менке и Фрей-Вис-слинг приписывают его определенному расположению вытянутых липоидных молекул. Сухое вещество хлоропластов проявляет положительное двойное преломление, но экстракция липидов эфиром делает его отрицательным. Таким образом, у живых клеток отрицательное структурное двойное преломление превосходит положительное собственное двойное преломление липоидов в сухих хлоропластах появляются обратные отношения, вследствие нарушения пластинчатой структуры. [c.367]

Для экстракции липидов и углеводородов ткань мозга крыс гомогенизировали с помощью аппарата Политрон 5 раз по 30 с в системе гексан изопропанол (3 2) из расчета 25 мл смеси на 1 г мозга [352]. Пробы помещали в пробирки с притертыми пробками и периодически встряхивали на протяжении нескольких часов. После фильтрации проб сухой остаток с фильтра дополнительно экстрагировали системой хлороформ метанол (7 1) с последующей фильт- [c.115]

При экстракции липидов принимают во внимание то, что они способны не только к гидрофобным взаимодействиям, но и к образованию водородных, электростатических и ковалентных связей (сложно-эфирнь х, амидных, гликозидных). Относительно неполярные растворители (хлороформ, бензол, диэтиловый эфир) разрушают комплексы, образованные гидрофобными взаимодействиями в жировой ткани, хи-ломикроны, комплексы альбумина с жирными кислотами. Полярные растворители (этанол, метанол) разрушают водородные и электростатические связи. Их применяют в смеси со слабополярными растворителями при экстракции липидов из плазматических мембран, митохондрий, эндоплазматического ретикулума. Липиды, находящиеся в комплексах, образованных ковалентными связями, растворителями не экстрагируются. Их можно выделить только после гидролиза ком- [c.67]

РЗ. Затем из осадка удаляют липиды, про.мывая фильтр при 40—45° по два раза 70%-ным этанолом и смесью этанол — серный эфир (1 1) и один раз серным эфиром. При анализе некоторых тканей для экстракции липидов целесообразно применять обработку хлороформом. Эта процедура в основном рекомендуется для удаления липидов, содержащих значительное количество сфингомиелинов [2, 3]. [c.140]

В тканях ганглиозиды ассоциированы с белками, поэтому во всех обычных методиках их выделения используются сильно полярные растворители чаще всего применяют смесь хлороформ — метанол [3]. В качестве растворителя был также предложен тетрагидрофуран [4], однако он не нашел широкого ирименения. Ранние методы выделения были основаны на фракционировании липидов при экстракции тканей растворителями с возрастающей полярностью. С появлением распределительного метода [5] старые методы были забыты. Первая стадия распределительного метода включает исчерпывающую экстракцию липидов из ткани смесью хлороформ — метанол. При диализе полученного экстракта против воды (процедура распределения) ганглиозиды переходят в верхний водный слой, в то время как основная масса других липидов остается в нижнем хлороформном слое. В модифицированном варианте распределения вместо воды используется слабый солевой раствор. [c.349]

Экстракция липидов из тканей [c.131]

Элюцию парафинов с колонок проводили высушенным и перегнанным гексаном. Элюат упаривали и наносили на взвешенные стекла для рентгенографического анализа. Массу осадка определяли по разнице масс стекол с осадком и без осадка. В том случае, когда парафин вьщеляли из специализированных мембран мозга (миелин, синаггтосомът), пользовались методикой выделения мембран с помогцью дифференциального цевгтрифугирования в градиенте сахарозы с последующей экстракцией липидов по М. Кейтсу [54] и дополнительной экстракцией липидов и углеводородов в системе гек-сан изопропанол (3 2) [352]. [c.116]

В середине 60-к годов химия мембранных белков только зарождалась и делались первые попытки нейти подходы к разработке методов их выделения и характеристики. Выло известно, что мембраны различного происхождения содержат разное коли-че1Тво белка (от 20 до 75"/ от сухой массы). Многие мембрано-связаиные белки обладают ферментативной активностью. В ряде случаев экстракция липидов из мембраны приводила к полной утрате или к значительному снижению фермен тативнон активности. Иногда активность удавалось восстановить после обратного добавления липидов. Более детально изучать мембранные белки было затруднительно оин плохо растворялись как в воде, твк и в органических растворителях. [c.584]

Процесс получения липидов на гидролизатах верхового торфа малой степени разложения включает несколько основных операций получение гидролизата торфа, отдувка фурфурола и нейтрализация гидролизата до pH 5,5-6,0, введение в гидролизат минеральных источников питания, выращивание дрожжей - продуцентов липидов, отделение биомассы и экстракция из нее липидов. Следовательно, весь процесс аналогичен процессу пол> чения кормовых дрожжей, за исключением дополнительных операций, связанных с извлечением липидов. Система растворителей, применяемая для этой цели, идснткчка используемым б масложировой промышленности. Оставшаяся после экстракции липидов биомасса биошрот может быть использована в кормлении сельскохозяйственных животных. [c.73]

Филлипс и Приветт [36] описали новый метод количественной экстракции липидов из ткани мозга смесью хлороформ — метанол, который исключает этап вторичной очистки липидного экстракта с помощью хроматографии на декстра-новых гелях или промывку водой органического экстракта. Нелипидные вещества, которые обычно загрязняют метанольно-хлороформный экстракт, предварительно экстрагируют разбавленной 0,25%-нон уксусной кислотой. В результате последующей экстракции обработанной таким образом ткани 40 объемами смеси хлороформ — [c.132]

Выделение животных липидов. Подробное описание методов экстракции липидов из человеческого и животного организмов дано Сперри [121] и Энтен-маном [19]. Следует рекомендовать изучение этих работ, в особенности критического исследования Энтенмана. [c.146]

Экстракция липидов по Фольху, Асколи, Леееу, Миту и ле Барону [21]. Этот метод дает особенно хорошие выходы в случае таких сложных липидов, как протеолипиды и ганглиозиды, которые не могут быть выделены полностью методом Блура. [c.147]

Митохондриальные фосфолипиды характеризуются особенно высокой степенью ненасыщенности в сердечной мышце на каждый атом фосфоли-нидного фосфора приходится в среднем 3,2 двойной связи. Эта ненасыщен-ность, видимо, имеет определенное функциональное значение, так как каталитическая активность любого из четырех комплексов при экстракции липидов жировыми растворителями резко снижается, а при добавлении ненасыщенных фосфолипидов (например, липидов из митохондрий, лецитина из яиц, мяса и сои или же синтетического о леи л лецитина) снова восстанавливается. При этом чем больше степень ненасыщенности добавляемых липидов, тем резче выражен их активирующий эффект. Роль фосфолипидов, по-видимому, двояка 1) они стабилизируют активные конформации белков дыхательной цепи, как каждого в отдельности, так и их комплексов, и 2) они способствуют взаимодействию активных белков с другими важнейшими компонентами — коферментом Q, факторами, необходимыми для окислительного фосфорилирования, а также со структурными белками. [c.392]

Экстракция липидов. Концентрат экстрагируют 3X100 мл смесью петролейного и диэтилового эфиров (1 1, объем/объем). [c.73]

Хара и Радин [25] описали другую методику, не требующую применения хлороформа. Ее преимущество заключается в том, что в отличие от метода Блая и Дайера она позволяет заменить стадию фильтрования центрифугированием. Для экстракции липидов используется смесь гексана и изопропанола, а вещества нелипидной природы удаляются промыванием экстракта водным раствором сульфата натрия. Экстракт липидов можно фракционировать на колонках с силикагелем, используя гексан, изопропанол и водные смеси. [c.309]

Процесс ферментации проводится в дрожжерастильных аппаратах различной конструкции, обычно устанавливаемых вне здайий. Для неключепкя гагрязнений атмосферного воздуха на выходе из ферментаторов воздух проходит обеспложивающие фильтры. Выделение дрожжей из дрожжевой бражки осуществляется на флотаторах, сепараторах с последующими операциями упаривания и сушки для получения товарных дрожжей. Для выделения липидов из дрожжей дополнительно вводится операция экстракции липидов. Эти операции проводятся в основных производственных зданиях. [c.424]

Сточные воды после экстракции липидов представляют собой взболтанную эмульсию хлопьевидных взвешенных веществ. Они мутные, отличаются резким запахом сероводорода и бензина, pH 5,0—6,0, окисляе-мость высокая —до 15 000 мг Ог/л, БПКз достигает 12 ООО мл/л. Содержание жиров в виде взвесей или эмульсии составляет 400—700 мг/л. Стоки сильно загрязнены органическими веществами, быстро загнивают. [c.430]

Потери при экстракции липидов. Робертс и др. [1] установили, что около 17% белка Es heri hia oli растворяется в теплом этаноле. Однако, как они показали, при низких значениях pH этанолом экстрагируется значительно большее количество белка. В описанной здесь методике перед экстракцией теплым этанолом фильтры промывают этанолом на холоду для удаления остаточных количеств кислоты. Нри определении радиоактивности белков А. aerogenes по этой методике потерь белка не наблюдалось. [c.143]

Известно, что в клетках различных организмов основная часть липидов присутствует в виде комплексов с белками — липопротеидов, которые разрушаются в процессе экстракции липидов различными органическими растворителями [петролейный эфир, хлороформ, диэтиловый эфир или смесь растворителей различной полярности, например хлороформ— метиловый спирт (2 1), этиловый спирт — диэтиловый эфир (3 2)]. При экстракции необходимо учитывать факторы, которые могут влиять на изменение структуры липидов температура, свет, кислород воздуха, действие липолитических ферментов и другие. Липиды способны растворять многие нелипидные компоненты (углеводы, аминокислоты, пептиды, мочевину и другие), а также образовывать с ними комплексы, что загрязняет липидные экстракты. Удаление этих примесей достигается промыванием липидного экстракта водой и насыщенными растворами минеральных солей или хроматографированием на колонках с различными адсорбентами. [c.187]

Применимость методов экстракции липидов для газо-жидкостной хроматографии. (Анализ метиловых эфиров жирных к-т ткани печени НФ ПЭГС на газхроме Р т-ра 180°.) [c.186]

Результатом действия линолитических ферментов, высвобождающихся после гибели клеток 41, 42] или их разрушения замораживанием [43], является повышение количества свободных жирных кислот и лизофосфолипидов в экстракте ткани. Замораживание и размельчение ткани при температуре сухого льда [41, 44], по-видимому, снижают скорость липолиза и образования свободных жирных кислот. Тем не менее предложенная Филлипсом и Приветтом [40] обработка растительных тканей разбавленной уксусной кислотой может оказаться весьма полезной и при экстракции липидов из животных тканей. [c.133]

Экстракция липидов из ткани мозга. В колбочку с притертой пробкой вносят 0,5 г ткани мозга, крторую растирают стеклянной палочкой, добавляя 25 мл смеси хлороформ—спирт. Через 10 мин гомогенат фильтруют через бумажный фильтр, а экстракт упаривают досуха под тягой при температуре не выше 80 °С. Остаток растворяют в 1 мл хлороформа в пробирке с притертой пробкой. [c.473]

Для проверки полноты экстракции липидов рекомендуется повторное экстрагирование. Для этого остаток ткани на фильтре обрабатьшается дополнительно 5 мл хлороформ-метаноловой смеси. Обычно при повторной экстракции в хлороформ-метаноловой смеси не удается обнаружить присутствие липидов. Как правило, уже при первом экстрагировании происходит полное извлечение липидов. [c.82]

Поли-р-гидроксибутират хотя и является липидом, однако не экстрагируется из бактериальных клеток растворителями, обычно используемыми для экстракции липидов. По методике, описанной Лоу и Слепеки [27], поли-р-гидроксибутират экстрагируется горячим хлороформом из клеток, предварительно обработанных гипохлоритом для удаления мешающих веществ. В результате гидролиза образуется р-гидроксимасляная кислота, которая в концентрированной серной кислоте дегидратируется и превращается в кротоновую кислоту. Кротоновая кислота поглощает УФ-свет с максимумом оптической плотности при 235 нм, обусловленном двойной связью. [c.322]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология