Субклеточные фракции

Рис. 2. Кинетика включения Н-лизина и 1 С-оротовой кислоты в субклеточные фракции коры головного мозга крыс.

Первоначально представляли, что синтез белка могут катализировать те же протеолитические ферменты, которые вызывают и его гидролиз, но путем обратимости химической реакции. Однако оказалось, что синтетические и катаболические реакции протекают не только различными путями, но даже в разных субклеточных фракциях. Не подтвердилась также гипотеза о предварительном синтезе коротких пептидов с последующим их объединением в одну полипептидную цепь. Более правильным оказалось предположение, что для синтеза белка требуются источники энергии, наличие активированных свободных аминокислот и нескольких типов клеточных нуклеиновых кислот. [c.509]

Связывание же молекулярного азота на бесклеточных препаратах, а также при помощи субклеточных фракций позволило непосредственно изучать природу и действие конкретных ферментных систем процесса. [c.117]

V. ЛОКАЛИЗАЦИЯ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ АКТИВНОСТЕЙ В ОТДЕЛЬНЫХ СУБКЛЕТОЧНЫХ ФРАКЦИЯХ [c.13]

Все попытки выяснить пути биосинтеза этилена, предпринятые в опытах с грибами, целыми плодами, тканями плодов и субклеточными фракциями, несмотря на большой объем проделанной работы, окончились неудачей, хотя полученные данные позволили отбросить многие варианты возможных путей биосинтеза. Однако в процессе этой работы были выявлены некоторые интересные биохимические закономерности. [c.392]

Общий фонд протеина печени можно охарактеризовать с помощью средней удельной активности протеина , которая определяется суммированием удельных активностей протеина в отдельных субклеточных фракциях с учетом его доли в отдельной фракции по отношению к общему содержанию в печени. По мнению авторов [И], этот метод находит свое подтверж дение в том, что общие активности отдельных фракций изменяются параллельно, несмотря на большое различие их абсолютных величин. [c.231]

Биохимические метйды, используемые в стандартизации и контроле качества лекарств. Для стандартизации и контроля качества лекарств используют три группы методов. 1. Физические методы — спектрофотометрия, флюоресцентный анализ, масс-спектрометрия и др. 2. Химические методы неорганического, коллоидного и органического анализа состава лекарств и их метаболитов. Эти группы физико-химических методов позволяют установить структуру вещества и лишь сделать предположение о его биологической активности. 3. Биохимические исследования с использованием субклеточных фракций, клеток, тканей, органов и организмов позволяют оценить биологическую активность лекарств. Применение биохимических методов обеспечивает стандартизацию лекарств и контроль качества на этапах производства и хранения. Широкое распространение получило использование свойства специфического взаимодействия белков в системах фермент—субстрат , лекарство—рецептор , антиген-антитело . На основе этого фундаментального свойства белков созданы специфичные и высокоточные методы радиоиммунно-го, иммуноферментного, хемилюминесцентного анализа, аффинной хроматографии и др. [c.478]

Работа выполнена на субклеточных фракциях головного мозга кроликов. Субклеточные фракции микросом, миелина и синаптосом получены с помощью метода дифференциального центрифугирования в градиенте плотности сахарозы (Белик и др., 1969). Первоначально были использованы водные растворы следующих ПАВ тритон Х-100, трис-дезоксихолат (дезоксихолевая кислота, нейтрализованная 1 М раствором трис до нейтральной реакции по бромтимоловому синему), додецилсульфат натрия и дигитонин. В ходе работы по определению ККМ оказалось желательным исследовать влияние ряда других ПАВ дезоксихолата натрия, октил-сульфата натрия, а также провести сравнение двух препаратов дигитонина. [c.119]

Активация Mg2+, Ка+-, К+-АТФазы (%) под действием ПАВ в различных субклеточных фракциях [c.122]

Число колоний величина относительная. Число облученных колоний, к которым добавляли субклеточные фракции, корректировали относительно 100 облученных колоний, к которым фракции не добавляли. [c.206]

Высокую активность ззз гистоауторадиографически установили р1гке1 и соавт. (1963) в ЖКТ, легких, надпочечниках и коже крыс в период от 5 до 30 мин после внутрибрюшинного введения меченого цистамина в дозе 100 мг/кг. Моп(1оу1 и соавт. (1962) определяли 8-цистамин в растворимых белках и субклеточных структурах большинства органов крыс после внутривенного введения протектора. Высказано предположение, что степень защиты отдельных тканей связана с концентрацией цистамина в их субклеточных структурах. Уже через 5 мин после внутривенного введения цистамина и АЭТ Владимиров (1967) обнаруживал их присутствие в митохондриях клеток селезенки и печени мышей. Тотальное гамма-облучение мышей (6 Гр) не влияло на распределение цистамина в субклеточных структурах. Через 30 мин после внутрибрюшинного введения цистамина мышам и крысам его внутриклеточное распределение у этих видов животных существенно не отличалось. Увеличение дозы цистамина у мышей приводит к повышению его содержания во всех субклеточных фракциях селезенки и печени, особенно в ядрах клеток [Владимиров, 1968]. Довольно быстро, в течение 5 мин, [c.45]

При изучении изозимного состава ферментов в тканевых экстрактах или в суспензиях субклеточных фракций, представляющих собой сложную смесь многих ферментов, необходимо ставить соответствующие контрольные пробы, в которых из инкубационной смеси, используемой для проявления активности определенных ферментов, исключаются субстраты. [c.338]

Нейротоксин из змеиного яда. Меняет характер освобождения нейромедиатора из окончаний двигательных нервов млекопитающих ингибирует накопление Са " в субклеточных фракциях мозга [BBR 58, 475 (1974)]. Обладает активностью Са -зависимой фосфолипазы Aj [PNAS 73, 178(1976)]. Чрезвычайно токсичен Работа требует соблюдения особых мер предосторожности. Для мыщей ЛДзо (подкожно) 89 мкг/кг. [c.243]

Фракционирование клеток в солевом растворе осложняется тенденцией гранул образовывать скопления и осаждаться в виде комков, а не в виде отдельных частиц. Это нежелательное явление можно предотвратить, измельчая клетки в 0,88 М растворе сахарозы, в котором митохондрии сохраняют палочковидное строение и способность к суправитальному окрашиванию янусом зеленым В. Однако при указанной концентрации сахарозы среда становится настолько вязкой и плотной, что для осаяедения субклеточных фракций приходится использовать чрезвычайно высокие скорости центрифугирования. Поэтому в современных исследованиях в качестве среды для измельчения клеток используют 0,25 М раствор сахарозы, в котором не происходит агрегации гранул и легко выделяется фракция митохондрий. Последние при этом обладают теми я е биохимическими свойствами, что и митохондрии, получаемые в 0,88 М растворе сахарозы, хотя они уяге не окрашиваются янусом зеленым В и имеют скорее шаровидную, а не удлиненную форму. При разделении путем дифференциального центрифугирования субклеточных фракций из гомогената в 0,25 М растворе сахарозы, полученного в гомогенизаторе Поттера — Эльвейема, удаление ядер и клеточных обломков, включая [c.130]

Токсическое действие. Обладает широким спектром токсического действия с многообразными клиническими проявлениями. В крови В. специфически связывается с иммуноглобулинами, заметно снижая их содержание. Проникновение металлического В. через мембраны объясняют образованием специфического растворимого комплекса с белками. В. связывается негистонными белками клеточных ядер и кумулирует в клетках без образования морфологически обособленных включений. Соли В. угнетают амино- и карбоксипептидазы. Проникая через плацентарный барьер, В. оказывает эмбриотропное действие преодолевая гематоэнцефалический барьер, вызывает энцефалопатию. Поражения ЦНС, вызываемые В., как и алюминием, объединяют в группу миоклонических энцефалопатий . При этом возрастает концентрация В. в липидах мозга, мозжечке и таламусе, особенно в субклеточных фракциях однако прямой зависимости между выраженностью мозговых нарушений и уровнем концентрации В. в крови не обнаружено. Среди реже встречающихся токсикологических проявлений действия В. и его соединений указывают на возможность поражения суставов, костной ткани, аллергозов, крово-течений, агранулоцитоза, пластической анемии. К числу характерных симптомов инток- [c.434]

Необходимая стадия прн выделении большинства Б.— механич, разрушение клеток и экстракция требуемого Б. Иногда экстракции предшествует фракционирование содержимого клетки но субклеточным фракциям с помощью препаративного ультрацентрифугиро-вания. Известны также методики выделения, согласно к-рым механич. разрушения клеток не происходит. Такие методики применяют обычно для выделения внеклеточных Б. (напр., протеолитич. ферментов, гормонов, белков, гликопротеидов и липопротеидов плазмы крови, гликопротеидов соединительной ткани). Именно этот класс Б. наиболее доступен. [c.129]

Через разные промежутки времени после инъекции они извлекали печень, гомогенизировали ее, фракционировали путем центрифугирования (разд. 13.16) и проверяли затем полученные субклеточные фракции на наличие в них радиоактивного белка. Если после введения меченых аминокислот проходили часы или дни, то меченые белки обнаруживали во всех внутриклеточных фракциях. Если же печень извлекали и фракционировали всего через несколько минут после инъекции меченых аминокислот, то новообразо-ва нный меченый белок обнаруживали [c.927]

Установлено, что липиды нормальных тканей и опухолей не отличаются по качественному составу, т. е. не существует липидов, специфичных для опухоли, как полагали ранее. Однако отмечено существенное различие во внутриклеточном распределении фосфолипидов в опухолевых и нормальных тканях. В субклеточных фракциях опухолей нарушается специфическое распределение фосфолипидов, характерное для нормальных тканей их состав выравнивается и становится близким к фосфолипидному составу клетки в целом, т. е. происходит дедифференцировка мембран. Причиной ее, по-видимому, является нарушение биосинтеза лиоидов и, возможно, связанные с ним изменения скоростей обмена отдельными фосфолипидами между мембранными структурами. Кроме того, наблюдается появление фосфолипидов с необычным распределением жирных кислот. Со структурой биологических мембран и, следовательно, косвенно с присутствующими в них липидами связывают действие анестетиков, лекарственных препаратов. Однако неизвестно, выполняют ли липиды при этом пассивную или активную роль. [c.382]

Первые классические опыты по разделению субклеточных фракций были осуществлены Бенсли [93] и Клодом [94—96]. Разрушенную в солевом растворе ткань печени они разделили на ядерную фракцию, фракцию крупных гранул, включающих митохондрии, фракцию мелких гранул, названных Клодом микросомами, и надо-садочную фракцию, свободную от седиментирующего материала. [c.130]

Задача изучения биогенеза этилена должна была бы упроститься, если бы удалось получить субклеточные фракции плода, способные осуществлять синтез этилена. Известно несколько сообщений, в которых утверждается, что такие препараты удалось получить и что удалось синтезировать этилен из специфических предшественников. Мей [69], однако, показал, что большинство этих работ ошибочно. Чандре и Спенсеру [30] все же удалось получить субклеточные фракции, которые действительно продуцировали этилен. Согласно их методу. [c.393]

Часовникова О.Б., Полякова Н.Е., Митрофанов Д.В. - Исследование биологических эффектов 2,3,7,8-тетрахлордибензо--п-диоксина на моделях субклеточных фракций печени крыс. [c.6]

При изучении кинетики (рис. 2) включения меченых предшественников в опытах in vivo в белки и РНК субклеточных фракций коры мозга крыс нами установлено следующее 1) имеет место перераспределение ядерного и цитоплазматического синтеза белка и РНК в течение 64 час. после интрацеребральной инъекции 2) профиль включения Н-лизина в белки синаптических структур имеет двухфазный характер (первый пик — спустя 1 час после введения изотопа, второй — спустя 2—3 суток), что соответствует приведенным выше литературным данным о наличии локального синтеза и быстрого аксотока 3) включение С-оротата в РНК синаптических структур происходит лишь через 64 часа после инъекции 4) обновляемость белков НО значительно меньше обновляе-мости белков рибосом, цитоплазматической фракции и ядер мозга крыс [c.44]

Включеш1е Н-лизина в белки и С-оротовой кислоты в РНК субклеточных фракций из ткани коры больших полушарий мозга крыс через 2 часа после серии [c.46]

При исследовании содержания цереброзидов в субклеточных фракциях мозга его больше всего выделяют из миелина, затем из фракции микросом, но находят и во всех других фракциях ( uzner, Davison, 1968). [c.51]

Субклеточное распределение ганглиозидов изучалось многими авторами (Wolie, 1961 Ei iiberg et al., 1964 Lapetina et al., 1967), a также в нашей лаборатории (Аврова и др., 1973). Общий вывод, который молшо сделать, состоит в том, что синаптосомы и специально синаптические мембраны особенно обогащены ганглиозидами. Но ганглиозиды находятся и во всех других субклеточных фракциях, особенно в микросомах. [c.57]

Проведенные исследования (Курский, Федоров, 1970) показали, что внутривенно и интрацистернально введенный 5-ОТ вызывал повышение содержания Са " в ткани мозга и некоторое перераспределение его в субклеточных фракциях. Во фракциях синаптосом, миелиновых фрагментов и растворимой содержание этого катиона повышалось, но уменьшалось во фракции микросом и митохондрий. 5-ОТ повышал также внедрение Са в те органы и ткани, с которыми он функционально связан в ткани головного мозга — в 1.8 раза, мышцы сердца — в 3.0, матки — в 2.6, кишечника — в 1.6, седалищного нерва — в 1.8, спинного мозга — в 2.4, почек — в 2 раза и не оказывал влияния на включение Са в ткань печени, селезенки, поджелудочной железы и скелетных мышц. [c.184]

Авторадиографически установлено, что под влиянием 5-ОТ интенсивность включения Са в гипоталамус повышалась в 6 раз, в кору больших полушарий — в 5, в мозжечок — в 3.8, в продолговатый мозг — в 2.7 и таламус — в 2.5 раза. При этом было отмечено несколько иное изменение содержания радиоактивного изотопа в отдельных субклеточных фракциях мозга, чем нерадиоактивного кальция увеличивалось его содержание в митохондриальной, микросомной и растворимой фракциях, но снижалось во фракции синаптосом. Это вызвало необходимость изучить динамику поступления Са в различные субклеточные фракции ткани мозга. Установлено, что под влиянием интрацистернально и внутривенно введенного 5-ОТ интенсивность внедрения Са в ткань мозга достигла максимума не через 30 мин., как у контрольных животных, а уже на 15-й минуте после внутривенного введения a lj. [c.184]

Данные относительно включения Са в субклеточные фракции ткани мозга свидетельствуют о том, что под влиянием внутривенно и интрацистернально введенного 5-ОТ наиболее выраженные изменения наблюдались во фракции ядер с обрывками клеточных мембран и митохондрий в первые 15 минут. Во фракции нервных окончаний максимум внедрения Са был отмечен через 60 и 180 мин. при интрацистернальном и через 60 мин, при внутривенном введении амина. Во фракциях миелиновых фрагментов и растворимой скорость включения Са в этих условиях не изменялась. [c.184]

Из полученных данных (Курский, Федоров, 1971) следует, что 5-ОТ, не влияя на внедрение в митохондриальную и микросомную фракции, стимулировал этот процесс во фракции синаптосом мозга. При инкубации этих субклеточных фракций, нагруженных радиоактивным кальцием, в бескальциевой среде отмечено, что из митохондрий мозга освобождалось около 40% Са, из микросом — 8%, из синаптосом — 10%. В этих условиях под действием 5-ОТ из митохондрий и синаптосом мозга освобождалось соответственно 61 и 4% Са. На высвобождение Са из микросомной фракции мозга 5-ОТ не влиял. В последнее время установлено подобное действие 5-ОТ на освобождение Са из саркоплазма-тического ретикулума гладкой мышцы (Bloomquist, urtis, 1972). Эти данные свидетельствуют, по-видимому, о прямом действии амина на связывание Са синаптосомами мозга, а также на освобождение его из митохондрий и синаптосом мозга. [c.185]

В связи с рассмотрением этих работ возникает вопрос о месте синтеза АХЭ в нервной ткани. Как уже отмечалось, в настоящее время принято считать, что синтез АХЭ происходит только в теле нейрона. В пользу этого свидетельствует и недавнее исследование Остина и Джеймса (Austin, James, 1970). Авторы изучали скорость восстановления активности АХЭ в субклеточных фракциях мозга после отравления крыс ДФФ. Было установлено, что за 28 дней активность АХЭ в микросомах восстановилась на 70%, а в синаптосомах только на 48%. Это дало авторам основание подтвердить высказанную выше концепцию о том, что синтез фермента происходит в теле нейрона, а в синаптическую область АХЭ поступает с током аксоплазмы через аксон. [c.201]

Petrovi , Mileti и Brdar [ж] экспериментировали на L-линии фибробластов мышей. Клетки после облучения засевали и инкубировали для образования колоний. Цель исследования — установить влияние Па выживаемость субклеточных фракций (клеток L-линии), добавляемых после облучения. Готовились гомогенаты и разделялись, насколько возможно, на отдельные фракции, и эти фракции добавлялись к облученным клеткам L-ли-нии. Результаты (табл. 4) не были особенно отчетливыми. В разных экспериментах они не совпадали. Не всегда выявлялся повышающий выживание эффект. Различия, вероятно, были обусловлены длительным и сложным проведением эксперимента. В тех случаях, когда число колоний увеличивалось, наибольшим действием, вызывающим увеличение выживаемости, обладали ядерные фракции, затем митохондрии, при этом также заметно увеличивался и размер колоний. Целые гомогенаты также увеличивали число колоний. Неполное разделение фракций затрудняло решение вопроса о том, какой же компонент обладал указанным эффектом. Однако последующие эксперименты, в которых изологичное ДНК приводило к нарастанию выживаемости, показали, что именно этот фактор, по всей вероятности, и вызывает увеличение числа колоний. [c.205]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология