Сыворотка крупного рогатого скота

Сыворотка крупного рогатого скота (3 части сыворотки, мясной бульон с 30% глюкозы) [c.556]

Как известно, для роста и размножения клеток млекопитающих, кроме комплекса аминокислот и витаминов (АВК), в состав среды должна входить сыворотка крупного рогатого скота. Компоненты АВК и сыворотки, только дополняя друг друга, образуют полный набор компонентов, необходимых для синтеза биомассы клеток млекопитающих. При увеличении концентрации аминокислот и витаминов в условиях постоянного содержания сыворотки выход клеток повышался лишь до определенного уровня, причем этот уровень неодинаков при разном содержании сыворотки в питательной среде (рис. 2.31, 2.32). Данный пример показывает, что нельзя связывать запас субстрата в среде с концентрацией одного какого-либо компонента независимо от содержания других. Только увеличивая концентрацию всех без исключения компонентов субстрата, можно ожидать существенного увеличения выхода. На рис. 2.33 показано изменение равновесной концентрации клеток линии Ь и ВНК-21 при пропорциональном увеличении содержания сыворотки и АВК в питательной среде. [c.160]

В табл. 4.4 приведены коэффициенты распределения, а также равновесные концентрации кислорода при 37°С, которые определены экспериментально для глюкозо-солевых растворов и полусинтетической питательной среды ПС, содержащей в своем составе аминокислоты и сыворотку крупного рогатого скота. Концентрация кислорода в растворах, находящихся в равновесии с воздухом, в данном случае определилась электрохимическими датчиками открытого типа, т. е. без защитной полупроницаемой мембраны. [c.268]

Хранение эмбрионов. Применение метода трансплантации эмбрионов потребовало разработки эффективных методов их хранения в период между извлечением и пересадкой. В производственных условиях эмбрионы обычно извлекают утром, а пересаживают в конце дня. Для хранения эмбрионов в течение этого времени используют фосфатный буфер с некоторыми модификациями при добавлении эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота и при комнатной температуре или температуре 37°С. [c.206]

Культивировали клетки па среде 199 Паркера с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота и антибиотиков. [c.28]

III. снижение стоимости (особенно в случае эмбриональной сыворотки крупного рогатого скота) [c.40]

Определение содержания минорных антител. При тестировании антител тех изотипов, которые для данных препаратов являются минорными, например при тестировании IgE в сыворотке человека или IgA в сыворотке крупного рогатого скота,.. [c.223]

Питательные среды. Для культивирования фибробластов используют среду Игла в различных модификациях и сыворотку (крупного рогатого скота, теленка, эмбриона коровы). Вообще фибробласты успешно культивируют и на других средах, однако во всем мире принято для диагностических целей использовать только среду Игла. Мы рекомендуем следующий состав питательной среды [c.256]

Изучение противовирусной активности проводили в НИИ эпидемиологии и микробиологии НАН Белоруси (Минск). Определение токсичности исследуемых соединений и их антивирусной активности проводили в культуре, которая перевивалась с клеток почки зеленой мартышки - BGM в логарифмической фазе роста культуры (третьи сутки ш vitro). В качестве ростовой среды использовали Даль-беко модифицированную среду Игла (ДМЕМ) с 10% эмбриональной сывороткой крупного рогатого скота и добавлением антибиотика гентамнцина в дозе 100 мкг/мл. Противовирусную активность препаратов по отношению к РНК-содержащим вирусам Коксаки БЗ (Nan y), ЕСНО-30, и ДНК-содержащего вируса простого герпеса [c.284]

Колонка (1,3X10 см) со стеклянными шариками диаметром 0,2 мм промыта азотной кислотой н основной средой Игла. Нанесено 7,5 10 клеток, суспендированных в I мл основной среды Игла, содержащей 20% сыворотки крупного рогатого скота, pH 7,1—7,2. Температура 37 °С. Элюирование проводят в градиенте концентрации ЭДТА на фоне основной среды Игла-ь20% сыворотки крупного рогатого скота. [c.319]

I — тироглобулин 2 — v-глобулин (из сыворотки крови человека или крупного рогатого скота) 3 — альбумин из сыворотки крупного рогатого скота (димер) 4 — лактат дегидро-геназы (из сердца свиньи) 5 — гексокиназа (из дрожжей) — спиргговая дегидрогеназа (из печени лошади) 7 — альбумин из сыворотки крови крупного рогатого скота 5 — овальбумин 9 — химотрипсиноген /0 — цитохром С 7/— трипсиновый ингибитор (из бобов сои) J2 — карбоксипептидаза А /3 — фосфоглицеромутаза 14 — глицеролфосфатде-гидрогеназа /5 — креатинкиназа /5 — глицерол-бР-дегидрогеназа (из дрожжей) 17 аспарагиназа /5 — алкогольдегидрогеназа /9 — альдолаза 20 — глюкозоксидаза. [c.131]

Для проверки адекватности разработанной математической модели были также проведены опыты по непрерывному культивированию клеток ВНК-21 в аппарате Нью-Брансвик (Ур= = 8 л). Клетки выращивали на среде ПС, содержащей 10% АВК и 7% сыворотки крупного рогатого скота. Величину pH поддерживали на уровне 7,1 0,1 с помощью автоматической системы регулирования. Полученные зависимости концентрации биомассы во времени представлены на рис. 2.46 и 2.47. [c.178]

Как уже упоминалось выше, культивирование животных клеток проводится на питательных средах, представляющих собой глюкозо-солевой раствор, в который введены аминокислоты и витамины (комплекс АВК), а также сыворотка крупного рогатого скота, содержащая группу неидентифицированных веществ. [c.245]

Исследование ростовых свойств 50 образцов АВК и 50 различных образцов сыворотки крупного рогатого скота — компонентов среды ПС — показало широкое варьирование этих основных показателей. На рис. 3.10 представлены графики распределения удельных ростовых свойств этих компонентов. Так, с достоверностью 95% величина удельных ростовых свойств АВК лежит в пределах (89 50)-10 кл/л-% (5 Равк = 25Х Х10 кл/л-%), а величина удельных ростовых свойств сыворотки — (270+182) -10 кл/л-% (5 Равк =91-106 кл/л-%). [c.246]

Для заражения вирусом Коксаки А-13 брали первичную культуру тканей эмбриона человека (ФЭЧ). Кожно-мышечные кусочки человеческого зародыша трипсинизировали на магнитной мешалке 2—3 раза по 7—10 мин в 0,25%-ном растворе трипсина. Полученную взвесь клеток центрифугировали при 1500 об/мин, добавляли питательную среду 199 с 10% сыворотки крупного рогатого скота (из расчета 300 ООО клеток на 1 мл среды) и разливали по 5 мл [c.35]

Для культивирования вируса классической чумы птиц FPV использовали клетки фибробластов эмбриона кур 8—11-дневного возраста. Яйца мыли в проточной воде с мылом, затем скорлупу несколько раз обрабатывали спиртом, обжигали тупой конец яйца и обеззараживали йодом. Скорлупу над воздушным пространством срезали ножницами. Извлекали зародыш, удаляли глаза, клюв, лапки и крылья, а тело промывали раствором Хенкса. Суспеи 1гю клеток готовили путем механического измельчения зародыша с последующей трипсинизацией ткани. Готовили взвесь клеток фибробластов из расчета 300 ООО клеток на 1 мл среды и заливали по 5 мл в камеры. В качестве питательной среды использовали среду 199 с добавлением 10% сыворотки крупного рогатого скота. [c.39]

Культуру ткани МК снимали раствором версена со стекла матрасов, на которых ее культивировали детрифугировали, а осадок разводили питательной средой 199 плюс 10% сыворотки крупного рогатого скота (из расчета 100—120 тыс. клеток на 1 мл среды) и разливали в камеры по 5 мл в каждую. В камеру с выросшей культурой ткапи вносили по 0,5 мл взвеси аденовируса [c.43]

Сыворотка крупного рогатого скота может быть заражена различными вирусами (например, вирусом герпеса крупного рогатого скота, вирусом парагриппа 3), в связи с чем в настоящее время сыворотки постоянно тестируются производящими их фирмами на вирусное загрязнение. Эффективность такого скрининга в настоящее время подвергается сомнению (Kniazeff, [c.121]

Будучи выделенными, недифференцированные клетки остаются гомогенными до тех пор, пока они субкультивируются в модифицированной Дюльбекко среде Игла с 5—20% сыворотки крупного рогатого скота, и снимаются с субстрата 0,25%-ным трипсином и 0,05 мМ ЭДТА в ФСБ (гл. 5) до достижения клетками полного монослоя. [c.218]

II. Часто недооценивается возможность цитотоксичности сыворотки. Помимо селективных ингибиторов, бактериальных токсинов и липидов сыворотка может содержать полиами-ноксидазу. Фермент действует на полиамины (спермин, спермидин), являющиеся продуктами секреции быстро пролиферирующих клеток, в результате чего образуются цитотоксические полиаминоальдегиды [12]. Эмбриональная сыворотка крупного рогатого скота и сыворотка беременных женщин в отличие от лошадиной сыворотки содержат относительно много этого фермента. Этим можно объяснить результаты исследований, в которых было показано супрессивное действие эмбриональной сыворотки и сыворотки беременных женщин. [c.41]

Полужидкий 0,1% мясо-пептонный агар или 0,1% агар на переваре Хоттингера (pH 7,6) разливают в пробирки по 5 мл. Среду стерилизуют в автоклаве 30 мин при 20 °С. Перед использованием в каждую пробирку с питательной средой, соблюдая правила асептики, прибавляют 0,5 мл нормальной лошадиной сыворотки или сыворотки крупного рогатого скота, инактивированной при 56°С, 1 каплю (0,5 мл) 2% раствора теллурита калия. [c.373]

Для приготовления свернутой сы воротки используют нормальную лошадиную сыворотку или сыворотку крупного рогатого скота. Для свертывания сыворотку стерильно разливают в стерильные пробирки по 3 мл. Пробирки укладывают в ряд (скос должен начинаться от дна пробирки) в аппарате для свертывания, подогретом до 50 °С. Температуру доводят постепенно до 80 °С и держат в нем пробирки 1 ч. Затем пробирки со свернутой сывороткой вынимают (так как дальнейшее нахождение их в свертывателе ведет к высыханию сыворотки) и охлаждают при комнатной температуре. Свернутая сыворотка должна обязательно содержать конденсационную воду. Приготовленные среды контролируют выборочно на стерильность в термостате. Если при контрольном прогревании они прорастают кокковой микрофлорой, их повторно прогревают при 80°С в течение 2 ч. [c.373]

Риновирусы лучше всего размножаются при 33°С, хотя вполне удовлетворительный выход достигается и при 35°С [13] все полученные Сэбином вакцинные штаммы полиовируса термолабильны, температурный оптимум их размножения — 33— 35 °С. Сыворотки крупного рогатого скота и лошадей часто содержат ингибиторы репликации полиовируса, и культуры клеток для его выращивания следует вести на фетальной сыворотке крупного рогатого скота или выдерживать в бессыво-роточной среде в течение суток перед заражением. [c.48]

Белки. В качестве радиоактивной метки для белков чаще всего используют [ S]-метионин, поскольку он обладает высокой удельной радиоактивностью и относительно недорого стоит. Чтобы пометить белки тогавирусов, метионин используют в концентрации 5—50 мкКи/мл. Для мечения белков, не содержащих метионина, используют [ S]-цистеин, удельная активность которого такая же, как [ S]-метионина. Можно также использовать смесь [Ш]-аминокислот. Обычно меченые аминокислоты используют в сочетании со средой, не содержащей данных аминокислот такие среды имеются в продаже. Более удобный альтернативный подход состоит в том, что кратковременное (несколько часов или менее) мечение проводят в буферном растворе, например в растворе Хэнкса, содержащем 20 мМ HEPES в качестве буфера, 2% диализованной сыворотки крупного рогатого скота или 0,1% БСА. [c.97]

Селекция клеток Ьдгэ на устойчивость к 8-азагуанину (культура клеток не должна быть заражена микоплазмой) 1) определить эффективность клонирования исходной популяции (см. рисунок) по 300 клеток посеять в 50 мм чашки Петри (среда Игла-ЬЮ %-ная сыворотка крупного рогатого скота), чашки поместить в СОг-инкубатор 2) посеять по 3 10 клеток во флаконы Карреля (5—7 флаконов) или по 10 клеток в 100 мм чашки Петри — 3 чашки (3—4 флакона или 2 чашки — контроль) 3) через 36—40 ч клетки промыть раствором Хэнкса, добавить свежей среды без сыворотки, во флаконы Карреля по 4 мл и в чашки Петри до 8 мл во флаконы добавить до 10 мкл МННГ (1 мг МННГ растворить в 1 мл ДМСО) [c.158]

Культуры кардиомиоцитов поддерживают в обычных для культивирования клеток средах Игла, часто в модификации Дульбекко (DMEM) или Игла (ЕМЕМ), а также в более богатых средах F-10 и F-12 с добавлением 10 % эмбриональной сыворотки коров. Вместо эмбриональной можно использовать отдельные партии сыворотки крови лошади [5] и, по нашим наблюдениям, предварительно отсе-лектированные серии сыворотки крупного рогатого скота. Выживание клеток и эффективность посева значительно увеличиваются в минимальной среде Игла, кондиционированной клетками роговицы кролика и содержащей наряду с сывороткой дополнительные аминокислоты, витамины и следовые количества неорганических микроэлементов [14]. Показана возможность культивирования клеток миокарда в бессывороточных средах фиксированного химического состава [40, 41]. Прикрепление миоцитов к стеклу ускоряется на поверхностях, покрытых коллагеном, причем наиболее предпочтителен коллаген типа IV, а также другие белки, улучшающие распластывание,— ламинин и в меньшей степени фибронектин [14, 15]. [c.296]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология