Модуляторы ферментов

Благодаря новейшим данным о стереохимических изменениях, происходящих при ферментативном катализе и регуляции активности ферментов, мы можем ответить на эти вопросы с достаточной определенностью. В том, что структура белков существенно зависит от слабых связей, действительно есть больщой смысл . Взаимодействие ферментов с субстратами и с модуляторами ферментов в большинстве случаев, если не всегда,, сопровождается изменениями в третичной и четвертичной структуре фермента. С точки зрения стереохимии эти изменения могут быть большими или незначительными для биологической, функции они абсолютно необходимы. Скорость, с которой фермент катализирует определенную химическую реакцию, вероятно, зависит от того, насколько быстро его конформация может подвергнуться обратимому изменению в результате фер-мент-субстратных взаимодействий. Надлежащая реакция фермента на присоединение регулирующего метаболита тоже зависит от способности фермента изменять свою структуру высшего порядка. В одних случаях эти изменения затрагивают третичную конформацию фермента, в других (например, в случае гликогенфосфорилазы) регуляторный эффект связан с изменением четвертичной структуры. [c.215]

Фермент-зависимые метки (ФЗМ)—это вещества, которые можно количественно определять с помощью ферментативных реакций. К ФЗМ относятся субстраты, кофакторы, простетические группы, модуляторы ферментов (т. е. ингибиторы или активаторы), фрагменты ферментов, апоферменты и ферменты. [c.11]

ИФА без разделения компонентов с использованием в качестве метки модуляторов ферментов [c.14]

Иммуноанализ с помощью модуляторов ферментов (ИМФ) основан на способности модулятора, связанного с лигандом (М—Л), изменять активность индикаторного фермента (Ф). Конъюгат М—Л конкурирует с определяемым веществом — свободным лигандом (Л)—за добавленные в недостатке антитела (Ат) к лиганду. Находясь в комплексе с антителами, М—Л лишен возможности модулировать активность индикатор ного фермента. При отсутствии лиганда (Л) реакция I не идет [c.14]

Принцип иммуноанализа с помощью модуляторов ферментов [c.58]

Иммуноанализ с помощью модуляторов ферментов 59 [c.59]

Показано, что модуляторы ферментов могут служить универсальными метками для иммуноферментного анализа без разделения компонентов (т. е. для гомогенного анализа). Предъявляемым требованиям лучше всего удовлетворяют модуляторы, легко образующие прочные конъюгаты с лигандами и обладающие высоким связывающим сродством к индикаторному ферменту. Для повышения чувствительности ИФА нужно использовать конъюгаты [модулятор — лиганд], проявляющие к индикаторному ферменту максимальное сродство. [c.66]

При разработке методов иммуноферментного анализа можно использовать несколько классов модуляторов ферментов. Например [c.66]

Модуляторы ферментов делятся на два класса. Положительные модул.чторы, как это следует из их названия, повышают активность ферментов, тогда как отрицательные модуляторы оказывают противоположное действие. Ферменты, рег Л 1руемые модуляторами, называются регуляторными. Не все ферменты являются в этом смысле регуляторными, н мы увидим, что положение регуляторных ферментов в метаболических последовательностях играет ключевую роль в механизмах, регулирующих обмен веществ. [c.18]

Для того чтобы понять, каким образом модуляторы ферментов выполняют свои интегративные функции, мы должны сначала проанализировать весьма обобщенную схему ферментативной реакции, чтобы установить, какие этапы могли бы быть особенно удобны для целей регулпровапия. [c.18]

На основе принципа ИМФ был разработан удобный метод определения тироксина в сыворотке человека. В качестве индикаторного фермента использовали ацетилхолинэстеразу, а в качестве модулятора фермента — связанный с тироксином ингибитор холинэстеразы (Finley et al., 1980). За 1 ч были исследованы 75 образцов. Результаты оказались четкими, точными и воспроизводимыми. Описана также методика определения тео-филлина, построенная по тому же принципу (Ble ka et al., 1983). [c.15]

Нго и Ленхофф (Ngo, Lenhoff, 1980) описали иммуноанализ с применением модуляторов ферментов, основанный на изменении активности индикаторного фермента под действием конъюгата [определяемое вещество — модулятор]. Ферментативная активность зависит от распределения антител против определяемого лиганда между свободным лигандом и конъюгатом. Принцип метода был продемонстрирован на примере определения [c.54]

Иммуноанализ с помощью модуляторов ферментов (ИФАМ) представляет собой метод без разделения компонентов, связанный с ферментативным усилением сигналов. В этом методе в качестве метки для определяемого лиганда (Л) используют модулятор фермента (М). Прочный ковалентный конъюгат [модулятор—лиганд (М—Л)] способен изменять активность индикаторного фермента, т. е. действовать как мощный ингибитор или активатор. [c.57]

Рис. 4-1. Принцип иммуноанализа с помощью модуляторов ферментов (ИФАМ). Представлены схемы всех реакций, протекающих при выполнений анализа.

В модельной системе ИФАМ, предложенной для измерения. ДНФ-лизина, в качестве модулятора фермента используют антитела против пероксидазы, а в качестве индикаторного фер- [c.62]

Подавляющее большинство процессов в клетке - ферментативные. Жизнь протекает при "низких" температурах, и без участия катализаторов химические превращения просто не могут происходить со скоростями, необходимыми Для осуществления сложных реакций, с разрывом прочных ковалентных связей. Регуляция мощного каталитического потенциала клетки достигается двумя принципиально разными путями изменением количества ферментов и активности последних. На активность фермента влияет количество доступного субстрата, 1 13ико-химические параметры среды и взаимодействие с особыми метаболитами, называемыми модуляторами. Ферменты, активность которых зависит от модуляторов, называют регуляторными. Они имеют для связывания субстрата центр, где протекает акт катализа, и еще один участок, называемый аллостерическим, для присоединения регулятора. Аллостерический путь регулирования обеспечивает "тонкую" настройку метаболизма в соответствии с изменяющимися условиями среды, и она осуществляется почти "мгновенно". [c.14]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология