Пролиферация фибробластов в культуре

У млекопитающих и птиц большинство нормальных клеток проявляет поразительную несклонность делиться неопределенно долго. Это отличает их от стабильных культивируемых клеточных линий, таких как ЗТЗ, в которых, видимо, произошли какие-то генетические изменения, делающие их бессмертными . Например, фибробласты, взятые от человеческого плода, при выращивании в стандартной среде осуществляют только около 50 удвоений популяции к концу этого периода пролиферация замедляется и затем останавливается, и все клетки, пробыв некоторое время в состоянии покоя, погибают. Такие же клетки, взятые от 40-летнего человека, перестают делиться примерно после 40 удвоений, а от 80-летнего - примерно после 30 удвоений. Фибробласты от животных с более короткой продолжительностью жизни прекращают деление в культуре после меньшего числа циклов. По аналогии со старением организма в целом это было названо клеточным старением. Клеточное старение представляет собой загадочный феномен. Короткие запрограммированные серии клеточных делений, которые заканчиваются дифференцировкой, -характерная особенность эмбрионального развития разд. 16.3.4), однако трудно представить себе, как клетки могли бы в течение долгого времени отсчитывать свои митотические циклы и останавливаться, пройдя, скажем, 50 делений. Согласно одной из теорий, клеточное старение - это результат катастрофического накопления самовоспроизводящихся ошибок биосинтетических механизмов клетки эти ошибки несущественны в природных условиях, где большинство животных гибнет от других причин задолго до того, как у них подвергнется старению значительное число клеток. С этой точки зрения клеточное старение просто отражает черты несовершенства в физиологии клетки, которые вполне естественны при очень слабом давлении отбора, направленного на их элиминацию. Однако в этом случае необходимо было бы объяснить, каким же образом клетки зародышевого пути, бессмертные клетки культивируемых линий и даже обычные соматические клетки при некоторых специальных условиях (описанных ниже) способны к бесконечной пролиферации. Другая гипотеза состоит в том, что клеточное старение-это результат механизма, который выработался для защиты от рака путем ограничения роста опухолей. Однако подобная защита представлялась бы неэффективной, так как пятидесяти циклов деления вполне достаточно [c.423]

Метод выращивания клеток в монослое наиболее часто используется при анализе цитотоксичности в клеточных линиях, но иногда он используется при анализе чувствительности биопсий целого ряда опухолей разных типов. Главная проблема, возникающая при работе с биопсийным материалом, заключается Б том, что не всегда удается достигнуть адгезии и пролиферации опухолевых клеток, а кроме того, слишком часто наблюдается зарастание опухолевых культур клетками стромы (фибробласты и мезотелий). Важность этих проблем различна для разных типов опухолей (высока для карцином молочной железы, умеренна для опухолей яичников и малосущественна для глиом). [c.261]

Подсчет колоний проводится после окраски с использованием бинокулярной лупы и обычно не вызывает затруднений. Исключение могут представлять культуры костного мозга мышей, в которых может наблюдаться пролиферация макрофагов и миелоидных клеток, контаминирующих колонии фибробластов. Трудности возникают из-за сходства, которое макрофаги и фибробласты приобретают в фиксированных культурах. Для точной их идентификации следует использовать гистохимическую реакцию на неспецифическую эсте-разу, ингибируемую фторидом натрия (положительная у макрофагов и отрицательная у фибробластов) или определение внутриклеточного коллагена I и П1 типов с помощью соответствующих антисывороток (I и Н1 типы коллагена синтезируют фибробласты), а также выявление Рс- и С-рецепторов (имеются на поверхности макрофагов) с помощью реакции розеткообразования с эритроцитами, тонированными иммуноглобулином [3, 4]. [c.262]

Миобласты, размножавшиеся в культуре целых два года, все еще сохраняют способность к дифференцировке, и при надлежащем изменении культуральных условий они будут сливаться, образуя мышечные клетки. По-видимому, ключевым компонентом среды, поддерживающим пролиферацию и препятствующим дифференцировке, служит фактор роста фибробластов (ФРФ) если его удалить, клетки быстро [c.190]

E. R. Unanue (1975) выделили из культуры перитонеальных макрофагов два противоположных по действию фактора ингибитор синтеза ДНК различных клеток, в том числе макрофагов, и диализуемый стимулятор синтеза ДНК. Учитывая эти данные, можно думать, что макрофаги в разных условиях вырабатывают как растворимые, так и нерастворимые факторы различной природы, одни из которых действуют на пролиферацию фибробластов, а другие на синтез в них коллагена. [c.275]

Пролиферация клеток. Инсулин стимулирует пролиферацию и число клеток в культуре и может участвовать в пролиферации клеток in vivo. Гормон потенцирует действие ряда ростовых факторов фактор роста фибробластов, фактор роста тромбоцитов, фактор рос- [c.391]

С помощью таких факторов роста, как PD F, клетки одного типа могут контролировать пролиферацию клеток другого типа. Но важно и то, что клетки одного и того же типа в ткани взаимодействуют друг с другом и согласовывают скорость деления, чтобы поддерживать надлежащую плотность популяции. Социальный контроль такого рода четко проявляется при реакциях на повреждение. Например, когда поврежден эпителий, клетки по краям раны стимулируются к делению (см. рис. 13-23) и наползанию на обнаженную поверхность до тех пор, пока она вновь не будет закрыта в этот момент быстрая пролиферация и движение клеток прекращаются. Сходное явление можно наблюдать на диссоциированных клетках в культуре. Эпителиальные клетки или фибробласты, помещенные в чашку, в присутствии сыворотки будут приклеиваться к поверхности, распластываться и делиться до тех пор. пока не образуется сплошной монослой в котором соседние клетки соприкасаются. Носле этого нормальные клетки перестают делиться-явление, известное как торможение пролиферации, зависимое от плотности. Если такой монослой поранить иглой таким образом, чтобы на [c.419]

Ж. Влияние на размножение клеток. Инсулин стимулирует пролиферацию ряда клеток в культуре. Возможно, он участвует и в регуляции роста in vivo. При изучении регуляции роста чаще всего используются культуры фибробластов. В таких клетках инсулин усиливает способность фактора роста фибробластов (ФРФ), тромбоцитарного фактора роста (ТФР), фактора роста эпидермиса (ФРЭ), стимули- [c.257]

Трансформированные клетки отличаются от нормальных и своим поведением в культуре они слабо прикрепляются к субстрату, не распластываются, у них не образуется упорядоченных пучков внутриклеточных актиновых филаментов (разд. 10.5.4), и они растут до значительно больших плотностей, чем нормальные клетки (разд. 11.1.8). Если к культуре трансформированных клеток, синтезируюших сравнительно мало фибронектина, добавить большое количество этого белка, клетки быстро прилипают к субстрату, распластываются и образуют упорядоченные пучки актиновых филаментов (рис. 12-65). Эти клетки выглядят как нормальные фибробласты, но по-прежнему размножаются до аномально высокой плотности. Видимо, фибронектин способствует клеточной адгезии, но непосредственно не контролирует пролиферацию клеток. Сейчас показано, что очишенный фибронектин помогает связыванию клеток различного типа с другими клетками, а также с коллагеном и иными субстратами. Так как высокие концентрации фибронектина были найдены в области миграции эмбриональных клеток, полагают, что этот гликопротеин влияет на передвижение клеток in vivo, изменяя их адгезивность. [c.237]

Трансформированные фибробласты, когда находятся в смешанной с нормальными клетками культуре, могут быть определены или отделены от находящихся рядом нетрансформированных фибробластов с помощью таких критериев, как размер или форма, окрашива-емость, утрата зависимого от плотности клеток торможения клеточного деления и перекрестного перемещения при образовании многослойных фокусов, пролиферация при низкой концентрации сыворотки, приобретение способности роста в полужидком агаре или метилцеллюлозе (Tooze, 1973). В противоположность этому поиск маркеров, с помощью которых можно идентифицировать или отобрать предопухолевые клетки в отдельности или вместе с опухолевыми эпителиальными клетками молочной железы из их нормальных двойни-ков, оказался длительным, затрудняющим выполнение основной задачи. Как суммировано в табл. 6, не обнаружены различия, ко- [c.292]

Клетки-предшественники для колоний фибробластов, возникающих в культурах, находятся в исходном костном мозге вне пролиферативного пула. Они постепенно входят в S-период спустя 28 часов после эксплантации. Действительно, при введении в культуры костного мозга Н -тимиди-на на первые 4—72 часа с дальнейшим культивированием на среде с холодным тимидином оказалось, что индекс метки фибробластов, появляющихся в 3—5-дневных культурах, зависит от продолжительности того первоначального периода, в течение которого культуры велись на среде с Н -тими-дином (И. В. Кейлис-Борок и др., 1971). Если Н -тимидин присутствовал в среде не дольше первых 28 часов, фибробласты оставались немечеными, хотя значительная часть гистиоцитов в таких культурах содержала метку. Если Н -тимидин находился в среде в течение первых 31 часов и дольше, то индекс метки фибробластов был 30% и выше. При этом повышение индекса метки соответствовало удлинению срока контакта культур с Н -тимидином. Максимум метки (98%) достигается при культивировании в присутствии Н -тимидина в течение 60 часов. Эти данные показывают, что включение метки в клетки-предшественники для фибробластов не происходит в первые 28 часов культивирования и что клетки-предшественники вступают в пролиферативный пул постепенно после 28 часов. Важным условием для вступления клеток-предшественников в состояние пролиферации оказалось их прикрепление к поверхности субстрата. При инкубации взвешенных в среде клеток костного мозга в присутствии Н -тимидина в течение даже 2 суток фибробласты метку практически не содержали (И. В. Кейлис-Борок и др., I97I). Отмеченное свойство существенно отличает клетки-предшественники для фибробластов от клеток-предшественников для гистиоцитов. Их пролиферация начинается с момента эксплантации, а максимум пролиферативной активности в эксплантатах костного мозга приходится на первые сутки культивирования. [c.29]

Предполагается, что предшественники кишечных ТКСО образуются в регионарных лимфоузлах и попадают в кишечник через грудной проток. Пролиферация ТКСО при паразитарной инвазии явно зависит от Т-клеточных цитокинов, в том числе ИЛ-3 и ИЛ-4. Клоны же СТТК образуются в культуре из фибробластов независимо от Т-клеток или Т-клеточных факторов. [c.425]

При этом Т. Зиуата и др. (1966) получили эффект даже от продуктов распада хондроитинсульфатов с относительной молекулярной массой 4000 дальтон. В наших исследованиях комплекс коллагена с хондроитинсульфатами оказывал более сильное стимулирующее действие, чем каждый из компонентов. В последнее время показано, что структурные гликопротеины также усиливают синтез коллагена в культуре фибробластов [Кап(1оих А. е1 а1., 1978]. Нельзя,исключить, что при заживлении ран эндогенные углеводные продукты разрушения соединительной ткани оказывают определенное стимулирующее действие. Наконец, продукты распада клеток, как мы уже отмечали (см. раздел 3.1.2), в виде нуклеопротеидных, липидных и поли-пептидных комплексов также могут способствовать пролиферации клеток. Таким образом, имеется целый комплекс обратных связей, регулирующих рост соединительной ткани. Выделенные из этого комплекса механизмы регуляции коллагенового метаболизма представляются практически важным потому, что позволяют дать теоретические объяснения коллагенотерапии. [c.276]

Смотреть страницы где упоминается термин Пролиферация фибробластов в культуре: [c.554] [c.106] [c.273] [c.274] [c.275] [c.215] [c.7] [c.135] [c.143] [c.378] [c.11] [c.49] [c.135] [c.258] [c.281] [c.295] [c.49] [c.265] [c.94] [c.423]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология