Гликопротеины, структурный анализ

Рис 8-51 Трехмерная структура мембранного гликопротеина-гемагглютинина вируса гриппа, показывающая расположение в нем ковалентно присоединенных олигосахаридов (вьщеленные темным атомы) Гликопротеины либо встраиваются в клеточные мембраны, либо выводятся из клеток при секреции, они могут содержать от 1 до 85% углеводов по весу Некоторые богатые углеводами гликопротеины содержат десятки или даже сотни присоединенных олигосахаридных цепей на молекулу Пронизывающие мембрану участки этого белка вирусной оболочки, состоящие из трех идентичных полипептидных цепей, могут служить основанием представленной здесь структуры Они не изображены на рисунке, т к этот участок белка отрезается при приготовлении образца для рентген о-структурного анализа (Фотографию любезно предоставил Ri hard J [c.52]

Методы хроматографического разделения гликопротеинов фактически не отличаются от методов, используемых в химии белков и пептидов. Также имеется ряд белков, которые в обычном смысле не считаются гликопротеинами, хотя они содержат один или несколько гликозидных остатков. Конечно, существует множество методов, с помощью которых могут разделяться различные гликопротеины. С точки зрения хроматографиста, здесь не следует детально их описывать. С другой стороны есть хроматографический метод, специфичный для структурных анализов гликопротеинов и гликопептидов. Специфичность основана на вы-боре подходящей системы детектирования, а не собственно метода разделения. Здесь будет кратко рассмотрен метод, описанный в работе [221- [c.145]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ, ОЧИСТКА И СТРУКТУРНЫЙ АНАЛИЗ ГЛИКОПРОТЕИНОВ [c.300]

В книге собран и обобщен обширный новейший экспериментальный материал по химии и биохимии гликопротеинов — представителей одной из важнейших групп углеводсодержащих биополимеров, широко распространенных в организме человека и животных и выполняющих наравне с белками и нуклеиновыми кислотами ответственные и разнообразные функции (например, они участвуют в явлениях иммунитета, в системе свертывания крови, входят в состав межклеточных и суставных жидкостей, соединительных тканей). В книге представлены все методы анализа гликопротеинов, химические и физико-химические методы их исследования и результаты структурных исследований отдельных гликопротеинов. [c.4]

При анализе структуры углеводных цепей гликопротеинов важным этапом является определение моносахаридного состава. Здесь используются обычные методы структурного анализа углеводов, а именно кислотный гидролиз или метанолиз с последующим хроматографическим разделением продуктов. По моносахаридному составу, как правило, можно судить и о типе углевод-белковых связей, в частности наличие N-aцeтилгaлaктoзaм>lнa говорит о присутствии О-гликозидных цепей. [c.475]

Трудности структурного анализа гетеросахаридов гликопротеинов объясняются прежде всего сложностью их состава, так как большинство из них содержит от четырех до шести различных типов углеводных остатков. Вторым фактором является полное отсутствие повторяющихся участков в гетеросахаридах и то, что они имеют разветвленное строение. Эти особенности делают очень трудным анализ экспериментальных данных, полученных с помощью современных методов. Имеется еще одна трудность, состоящая в том, что ряд гликопротеинов содержит несколько гетеросахаридных цепей сходного, но не идентичного состава и, вероятно, с различной последовательностью углеводов. В этом случае трудно отделить такие цепи друг от друга, и интерпретация полученных данных при оценке их строения представляет особую проблему (см. том 1, гл. 9). [c.294]

Ахрем А.А.,Аввакумов Г.В.,Свиридов О.В.,Стрельченок О.А.-Изв.АН БССР.Сер. хим.н.,1978,N0,98-105. Применение газо-жидкостной хроиатографии в структурных исследованиях углеводных компонентов гликопротеинов. I. Установление моносахаридного состава. Кислотный гидролиз и анализ сахаров в виде ацетатов полиолов. (Изучены различные способы кислотного гидролиза. НФ 0V-225 на газ-хроме Q. Нагрев программированный от 170 до 250°. Детектор пламенно-ионизационный.) [c.342]

Использование масс-спектрометрии в сочетании с ГЖХ играет важнейшую роль при решении многих задач в химии углеводов, особенно при анализе сложных смесей, образующихся в ходе структурного изучения полисахаридов и гликопротеинов. Подавляющее большинство производных углеводов, используемых для анализа методом ГЖХ. изучено с помощью масс-спектрометрии. Результаты изучения характера фрагментации этих производных детально изложены в прекрасных обзорах Кочеткова и Чижова [367, 368], Ханессиана [369], а также Лённ-грена и Свепссона [370]. Ценная информация, касающаяся хроматомасс-спектрометрии сахаров, содержится также во всестороннем обзоре Даттона, посвященном ГЖХ углеводов [226, 227]. [c.59]

Успешное применение любой из описанных многочисленных модификаций (см. стр. 136) метода анализа смесей аминокислот ионообменной хроматографией зависит главным образом от тщательного выполпепия экспериментальной процедуры. Подробности эксперимента описаны в оригинальных работах, и целесообразно посвятить определенное время отработке выбранного метода, прежде чем переходить к модификациям. Описание деталей выполнения анализа выходит за рамки этой главы, целью которой является обсуждение специальных проблем, возникающих ири аминокислотном анализе гликонротеинов, и связанных с ним структурных соображений. Многие из этих трудностей возникают не нри самом анализе, а в процессе первоначальной обработки гликопротеина, особенно при гидролизе. При расщеплении иолипептидпых цепей белка на аминокислоты появляется возможность для многих побочных реакций, включающих разложение аминокислот. [c.121]

ТОК метода состоит в том, что иптепсивпость окрашивания различна для разных белков, причем эти различия могут достигать трехкратной величины. Для точных анализов необходимо поэтому строить калибровочный график по тому белку, который требуется определять, и нельзя пользоваться, как это часто делают, удобным, но произвольным стандартом типа сывороточного альбумина быка. Готтшалк [70] считает, что калибровка с помощью белкового компонента гликопротеинов неосуществима и это делает невозможным применение обсуждаемого метода для точных определений. Структурные особенности белка, определяющие интенсивность окраски, сложны и включают не только содержание тирозина и триптофана, но и последовательность некоторых аминокислот с функциональными группами в боковой цепи, особенно гистидина, аргинина и глутаминовой кислоты 1123]. Можно ожидать, что различие в содержании тирозина во фракциях гликопротеинов само по себе может давать ошибочные результаты [121]. [c.151]

Некоторые из этих положений подтверждаются при ультра-структурном и гистохимическом анализе развивающейся соединительной ткани. Как показывают наши исследования, в процессе фибриллогенеза в межклеточном веществе наблюдаются следующие основные компоненты 1) аморфный хлопьевидный материал, 2) микрофибриллы диаметром 4—12 нм без периодичности, но с четкообразной структурой, 3) тонкие коллагеновые фибриллы диаметром 14—30 нм с нечеткой периодичностью 64—67 нм и 4) зрелые коллагеновые фибриллы диаметром 40—150 нм (чаще 50—90 нм) с четким периодом, в котором видны дополнительные полосы (рис. 30). Первые два компонента ярко окрашиваются рутениевым красным, что свидетельствует о том, что в их составе преобладают протеогликаны и гликопротеины незрелые и зрелые КФ имеют узкий рутениево-положитёльный чехол , особенно четко выявляющийся на поперечных срезах. [c.106]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология