Сорбция на мембранных фильтрах

Следует отметить важное для счета радиоактивности различие по характеру расположения препаратов между мембранными и бумажными или стекловолокнистыми фильтрами. Сорбированный на мембранном фильтре материал распределен в виде мономолекулярного слоя по поверхности фильтра и поэтому полностью контактирует со сцинтиллятором. В случае использования любого из так называемых глубинных фильтров часть материала проникает в глубь фильтра, что может затруднять его контакт со сцинтиллятором. Последнее явление не следует путать с самопоглощением -радиоактивности в крупных агрегатах белкового или нуклеинового осадка. Кстати, для задержания осадков можно использовать и мембранные фильтры, хотя это дорого и не сулит преимуществ, поскольку механизм молекулярной сорбции здесь уже роли не играет. [c.213]

Сорбция на мембранных фильтрах [c.115]

Фильтрование является обязательной операцией при анализе природных вод и служит для разделения растворенных и взвешенных форм элементов. Водная взвесь имеет, как правило, сложный состав и состоит из неорганических, органических и биологических (бактерии, планктон, продукты их деградации, фекальные остатки водных организмов) взвешенных частиц природного и антропогенного происхождения. В соответствии с международным соглашением, для разделения растворенных и взвешенных форм элементов используют мембранные фильтры с размером пор 0.45 мкм [590]. При этом на фильтре вместе с взвесью отделяются весь фитопланктон, большая часть бактерий, а также крупные неорганические и органические коллоидные частицы [148, 395, 514]. Это приводит к значительному снижению в фильтрованных водах вероятности перераспределения сосуществующих форм элементов за счет снижения бактериальной активности фильтратов и, в меньшей степени, вследствие устранения процессов сорбции-десорбции микроэлементов на взвешенных частицах [148, 339, 395]. Исследования, проведенные на арктических озерах с низким содержанием растворенных органических веществ, показали, что в фильтрованных пробах летучих форм ртути образуется на 26 % меньше, чем в нефильтрованных [238]. По мнению [c.47]

Бумажные, мембранные и стеклянные фильтры могут являться как источником загрязнений пробы, так и потерь микроэлементов вследствие сорбции [19]. [c.27]

Не существует единого мнения и относительно фильтров. В связи с установленными потерями микропримесей на фильтровальной бумаге в результате сорбции при фильтровании разбавленных растворов [33, 43—45] большинство исследователей рекомендуют использовать мембранные фильтры с диаметром пор 0,45 мкм. В работе [И] рекомендуется отбрасывать первые 0,5 л отфильтрованной воды в связи с возможными потерями некоторых микроэлементов на фильтре или, напротив, с их привнесением в начальный период фильтрования. [c.29]

О механизме сорбции одноцепочечных ДНК на мембранных фильтрах известно пока еще очень мало. Из неопубликованных данных [17] следует, что способность данной ДНК сорбироваться на фильтрах возрастает с уве- личением длины нолипуклеотидиой цени (вплоть до 100 или несколько более нуклеотидов) и ионной силы раствора и понижается при повышении температуры. Пока еще не удалось необратимо сорбировать на фильтрах РНК. РНК количественно, но обратимо сорбируется прп низких pH н низкой концентрации солей [18], хотя не исключено, что нри этом она просто выпадает в осадок. Если в буфере присутствуют ионы Mg +, то сорбция обратима не нолностью (5—10% ). Вся РНК смывается с фильтров буфером 2XSS . [c.151]

Фильтры, на которых сорбирована суммарная ДНК и неочищенные гибриды, помещают прямо в флаконы для сцинтилляционного счетчика, содержащие 5 мл раствора предварительно прогретой РНК-азы в буфере 2XSS (4 мкг мл). Флаконы встряхивают 60 мин при комнатной температуре. Отметим, что обработку РНК-азой проводят уже после того, как гибриды были сорбированы на мембранных фильтрах, т. е. после того, как большая часть РНК была удалена [8]. Это существенно, потому что РНК-аза — основной белок, который связывается как с мембранными фильтрами, так и с устойчивой к ее действию частью ( ore), обнаруженной у большинства видов РНК. Радиоактивность, обнаруживаемая на фильтре в результате сорбции на нем РНК-азы, зачастую не позволяет точно определить радиоактивность РНК в гибриде. [c.156]

Следует отметить, что необходимым условием осуществления мультиплексного секвенирования ДНК является перенос фрагментов ДНК из полиакриламидного секвенирующего геля на мембранный фильтр, поскольку проведение всех этих последовательных процедур гибридизации, окрашивания, отмывки возможно только с мембранным фильтром. Второе условие заключается в прочной сорбции фрагментов ДНК на данном фильтре, выдерживающей многократные инкубации в различных растворах. В противном случае мультиплексное секвенирование будет просто невозможно. Немаловажное значение имеет тип используемой метки. Так, при использовании радиоактивной метки процесс выявления последовательностей всех матриц ДНК довольно продолжителен ввиду требующейся длительной экспозиции фильтра на рентгеновскую пленку, занимающей иногда несколько суток. Гораздо быстрее результаты могут быть получены с помощью хемилюминесценции такого субстрата, как 1,2-диоксетан. Считается, что каждый цикл мультиплексного секвенирования с его использованием требует 1 ч на гибридизацию с меченой пробой и 1,5 ч на все процедуры по выявлению гибридизационных сигналов [ reasey et al., 1991]. [c.299]

Отобранная проба природной воды представляет собой двухфазную систему, состоящую из раствора и взвешенного вещества. Анализ каждой из фаз рекомендуют проводить раздельно, поэтому пробу фильтруют через мембранный фильтр 0,45 мкм на приборе Куприна сразу же после отбора, чтобы предотвратить нерераснределение элементов между двумя фазами и снизить бактериальную активность образца в процессе его хранения [16]. Чтобы избежать потерь микроэлементов за счет биохимических процессов и сорбции на стенках сосуда пробу после фильтрования консервируют, в отдельных случаях даже нефильтрованные образцы, если это согласуется с задачей исследования. [c.9]

По достижении равновесия в системе (8.1) из нее быстро удаляют лиганд (быстрее, чем протекает процесс диссоциации). Для этих целей обычно применяют следующие методы а) добавляют 8 систему ферменты, разлагающие лиганд в свободном состоянии, но не действующие на комплекс лиганд—центр комплексообразования (например, Berson and Yalow, 1959) б) вносят в систему адсорбенты, быстро и полностью связывающие лиганд (Rodbard, 1973). При применении обоих методов удаления лиганда из системы необходимо, чтобы добавляемые к ней компоненты (фермент или адсорбент) вносились в достаточно высоких концентрациях, при которых скорость разложения лиганда ферментом или его сорбции адсорбентом намного превышала бы скорость появления лиганда в системе в результате процесса диссоциации. Если процесс диссоциации изучается в системе мембранных центров связывания, то для удаления лиганда можно использовать метод быстрой перфузии мембран буфером на фильтре. Следует заметить, что и в этом случае необходимо, чтобы скорость перфузии была достаточно высока, что позволяло бы проводить полное удаление лиганда из системы. [c.197]

Избыточная концентрация железа в трехвалентной форме устраняется фильтрованием через механический, мембранный или сорбционный фильтр. Двухвалентное железо — методами сорбции ионного обмена или путем окисления его в трехвалентное железо и последующего фильтрования через механический фильтр. [c.58]

Вер Бини с сотр. 818] применяли миллипоровые фильтры с разным диаметром пор для определения размеров вирусных частиц, а также для их очистки. Авторы показали, что при фильтрации вирусов полиомиелита, краснухи, герпеса ш вакцины, суспендированных в трисбуфере, через фильтры с диаметром пор 50, 100, 300 и 650 ммк соответственно происходит сорбция этих вирусов на фильтре. Предварительная обработка фильтра белковыми растворами (телячья сыворотка или бычий альбумин) изменяет способность вирусов адсорбироваться на фильтре. Для вируса каждого типа существует своя специфичность. Например, полиовирус совсем не адсорбируется на фильтре после обработки его любым из вышеуказанных растворов. Обработка фильтра альбумином не влияет на адсорбцию вируса краснухи. Чтобы определить размеры вирусных частиц, рекомендуется обрабатывать мембранные ультрафильтры белковьгми растворами, которые исключают во - [c.84]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология