Диазобумага

Для приготовления иммуносорбента необходимо иметь очищенный антиген. Если речь идет о препаративном получении специфических антител, то без этого, очевидно, не обойтись. Однако при очистке относительно небольшого количества антител можно ограничиться разделением исходного клеточного экстракта, например методом электрофореза, и отделять специфические антитела из антисыворотки по их связыванию с зоной (полосой или пятном) антигена в геле. Удобнее для этой цели использовать не сам гель, а его реплику на диазобумаге [Остерман, 1981], где антигены фиксируются ковалентно. [c.112]

Необходимо также учесть, что одновременно с диазотипными материалами на бумажной основе выпускается большое количество аналогичных материалов на пленках из синтетических полимеров, гидрофобизированной прозрачной и полупрозрачной бумаге, специальных видах лакированной ткани и т.-п. Эти материалы позволяют производить размножение чертежей или другой документации, выполненных карандашом на специальной полупрозрачной (так называемой чертежно-прозрачной) бумаге. Получающееся изображение обладает высокой оптической плотностью в ультрафиолетовой области спектра и при дальнейшем копировании на диазобумагу позволяет получать контрастные вторичные копии. Применение этих материалов позволило в последнее время почти полностью отказаться от изготовления тушевых копий на кальке. Для получения промежуточных копий с непрозрачных оригиналов широко применяются рефлексные методы. [c.6]

Флороглюцин (дигидрат, т. пл. 117°) применяют как азосоставляющую в производстве диазобумаг. При его получении исходят [c.139]

Неиспользованные после посадки F(a )j диазогруппы бумаги блокировали обработкой глицином и бычьим сывороточным альбумином. Когда после электрофореза белки из геля описанным выше приемом блоттинга переносили на диазобумагу, они уже не встречали свободных диазогрупп. Большинство из них, не задержавшись на бумаге, следовало дальше в лежащие сверху фильтры. Только антигены для закрепленных на диазобумаге [c.132]

Существенный недостаток нитроцеллюлозных фильтров при получении иммунных реплик — избирательный характер сорбции белков на этих фильтрах. Основные белки, как правило, сорбируются ими хорошо, а кислые иногда практически не сорбируются. Ввиду этого важного обстоятельства предпочтение следует отдать использованию диазобумаги. Кстати, отмеченная в последней работе возможность снятия нескольких реплик с одного геля, по-видимому, сохраняется и для этого варианта. [c.133]

В связи с острой нехваткой серебра ведутся усиленные поиски новых светочувствительных материалов. Для регистрации и размножения технической информации уже широко применяются диазобумаги , диазокальки и диазопленкн . Их применение основано на разложении диазосоединений под действием ультрафиолетового света и образовании ими при проявлении соответствующими реактивами азокрасителей. Сохранившееся на неосвещенных местах азосоединение при проявлении окрашивает материал, позволяя получать отчетливые изображения от желтого до черного цвета. [c.137]

Л к и ее соли широко используют в пищ пром-сти как вкусовые в-ва, в качестве компонентов буферных р ров, для предохранения жиров от порчи, в фармацевтич пром-сти как компоненты мн лек ср-в (лимоннокислый Na-антикоагулянт), Л к используется для снятия ржавчины и окалины с металлич пов-стей, при электротравлении меди, в таннирующих р-рах в ситцепечатании, при произ-ве диазобумаг Триэтиловый и трибутиловый эфиры ацетиллимонной к-ты - пластификаторы, триаллиловый эфир-мономер Мировое произ во Л к 250000 т (1974), 65% используется в пищевой и 15%-в фармацевтич пром-сти [c.594]

Гидрокси-2-нафталинкарбоновую к-ту примешпот в произ-ве цветных фотоматериалов, ингибиторов коррозии. З-Гидрокси-2-нафталинкарбоновая к-та - промежут. продукт в синтезе азотолов, моноазопигментов, протравшлх азокрасителей азосоставляющая для диазобумаг, краскообразующая компонента цветных лаков комплексонометрич. индикатор для определения А1 при pH 3 (изменение флуоресценции от синей к зеленой), реагент для люминесцентного определения А1, Ве, 8с, 2г. [c.357]

Диазотипные материалы (диазобумаги и диазопленки) применяются прежде всего для получения копий с диапозитивов. Нанесенный на бумагу или пластмассовую пленку слой содержит диазосоединение, обычно соль какого-нибудь 4-диалкиламинодиазо-бензола, азосоставляющую (резорцин, пирогаллол, нафтолы) и кислоты, препятствующие преждевременной реакции азосочетания. После экспозиции светочувствительный слой обрабатывают парами аммиака, что делает возможным азосочетание (проявление). Коэффициент контрастности таких материалов очень велик, поэтому они особенно пригодны для копирования штриховых изображений. Однако уже разработаны и такие материалы, которые способны передавать полутона и уже применяются при копировании кинофильмов. [c.367]

Страна производство диазобумаги, т (1962) Страна Производство ди азобумаги, т (1962) [c.7]

Простейший представитель этого ряда — п-диазодифенил-амин — употребляется для приготовления диазотипных материалов с момента возникновения их промышленного производства и, по-видимому, сохранил свое значение до настоящего времени для получения диазобумаг, дающих изображения сине-черного и [c.66]

Калле и Ко., филиал IG, впервые разрабатывавшая этот процесс, явилась поставщиком диазобумаги и пленок ( озалид продуктов). Дальнейшие сведения по производству этих материалов химиками фирмы Калле можно найти в сообщениях BIOS или получить у посетивших завод этой фирмы в Бибрих-Висбадене. [c.278]

После окончания электрофореза для освобождения от ДДС-Na пластину ПААГ вымачивают при комнатной температуре в течение часа в 0,15 М Na-фосфатном буфере, содержащем 0,15 М Na I к 0,5% Тритона Х-100. Затем гель кладут на стопку фильтров, смоченных тем же буфером, но без Тритона Х-100, с верхней поверхности геля фильтровальной бумагой удаляют избыток влаги, кладут на него диазобумагу, затем несколько слоев сухой фильтровальной бумаги Whatman ЗММ , все это накрывают стеклом и прижимают грузом. За 1—2 ч при комнатной температуре, благодаря диффузии и вымыванию из геля поднимающимся вверх током жидкости ( блоттинг ) часть белков из геля переходит на ДБМ-бумагу и связывается с ней в тех местах, которые лежат непосредственно над белковыми полосами в геле. Эта техника подробнее была описана при рассмотрении методов электрофореза [Остерман, 1981]. [c.130]

Собственно иммунотестирование начинается тогда, когда полученную таким образом реплику белков геля на диазобумаге помещают в раствор специфической антисыворотки (например, в раствор с pH 7,4, содержащий 0,2 мг/мл IgG, 0,05 М Трис-НС1, 0,15 М Na l, 5 мМ ЭДТА, 0,25% желатины и 0,05% NP-40) и осторожно покачивают в течение 12 ч при 37°. За это время завершается реакция связывания антител с фиксированными на бумаге антигенами (очевидно, что по крайней мере часть молекул антигенов не утратила своей иммунореактивности в результате фиксации на диазобумаге). Несвязавшийся IgG отмывают еще 12 ч при 37° тем же буфером. Здесь нет необходимости в эквивалентном соотношении концентраций, так как белки уже фиксированы на бумаге, так что антитела могут находиться в избытке. [c.130]

Еще более высокой избирательностью отличается постановка эксперимента в работе Эрлиха и соавторов. Они ввели еще одну ступень отбора антигенов. На ДБМ-бумагу из геля переводили не все белки, а преимущественно специфические антигены. С этой целью к диазобумаге предварительно присоединяли антитела к этим антигенам, точнее их фрагменты, содержащие оба центра связывания антигенов, но лишенные неизменной части F - В гл. 1 такие фрагменты были обозначены Р(авог Для их получения частично очищенную антисыворотку диализом переводили в 0,1 М Hj OONa (pH 4,3) и в этом растворе обрабатывали пепсином (0,4 мг/мл) в течение 8 ч при 37°. Ог-резанные таким образом фрагменты F задерживали на им- [c.131]

Рис. 31. Четырехслойная сийтема обнаружения полос антигена с помощью реплики на диазобумаге

Для облегчения перехода белков из геля на диазобумагу Ренарт и соавторы проводили электрофорез в растворимом ПААГ, сшитом диаллилтартардиамидом или этилендиакрила-том, полнмеризуя его совместно с 1%-ной агарозой. Перед наложением диазобумаги ПААГ растворяли обработкой йодной кислотой или щелочью [Остерман, 1981]. Благодаря агарозе [c.132]

Перенос белков и нуклеиновых кислот из геля на нитроцеллю-лозный фильтр или диазобумагу путем вымывания, диффузии или электрофореза был рассмотрен в части П данной книги и подробнее — при описании электрофореза. Перенесенную на такой фильтр радиоактивность можно тестировать авторадиографически и просчитать, как описано выше. Иногда перенос носит почти количественный характер. Однако, как правило, приемы такого переноса используют не для определения радиоактивности, а для выделения определенных фракций препарата в целях дальнейшей обработки их на фильтре (иммунотестирования, гибридизации и др.). [c.223]

При флюорографии белков и нуклеиновых кислот, сорбированных на нитроцеллюлозных фильтрах или диазобумаге, можно поступать еще проще — окунуть фильтр в 7%-ный раствор ППО в эфире, а затем высушить [Bur khardt, Birnstiel, 1978]. Результат получается несколько лучше, если концентрацию ППО в эфире увеличить до 10%. [c.228]

Похожий прием был описан примерно в то же время Эрлихом и соавторами. Эта работа уже цитировалась подробно по другому поводу. Вместо пластиковой пленки авторы использовали диазобумагу (см. часть П) В роли радиоактивного маркера выступал иодированный белок А. Его сажали на индикаторные антитела, которые в этом случае были немеченными. Подобно предыдущему, авторадиографией диазобумаги можно было установить положение искомых колоний — продуцентов нужного бел- [c.292]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология