Иодирование белков

Спиртовый раствор иода применяется также для иодирования белков 2 . [c.425]

Замещение в ароматическом кольце тирозина может быть легко достигнуто при реакции белков с галогенами, азотной кислотой или диазосоединениями. Иодированные белки получаются при прибавлении к растворам белков раствора иода в иодистом калии при слабо щелочной реакции [49]. Иод замещает водород в положениях 3 и 5 фенольного кольца тирозина [50]. Продолжительное воздействие иода на белки ведет [c.128]

Тиреоглобулин содержит 0,6% иода [10]. Молекулярный вес тиреоглобулина 700 000 [И]. Каждая молекула тиреоглобулина содержит, следовательно, 32 атома иода, входящие в состав 2—3 группировок тироксина и 8—12 групп дииодтирозина [11]. Тиреоглобулин устойчив только при определенных значениях pH, и вне этой зоны молекулы тиреоглобулина расщепляются на более мелкие субъединицы [12]. Тиреоглобулин не реагирует с антителами, образующимися при введении в организм иодированных белков [13]. Это указывает на то, что остатки тироксина находятся внутри большой молекулы тиреоглобулина, а не на ее поверхности и потому недоступны для специфических антиподных групп молекулы антитела. [c.314]

Иммунологическая специфичность белков является весьма характерным их свойством, которое в нормальных условиях сохраняется без изменения. Однако присоединяя к белкам чужеродные соединения или создавая комплексы из двух и более белков, можно изменить их антигенные свойства. Так, например, если сывороточный глобулин осторожно нагревать в присутствии сывороточного альбумина, то образуется комплекс, обладающий новыми серологическими свойствами [23]. Подобным же образом при иодировании белков происходит изменение их серологической специфичности [24, 25]. Специфичность иодированных [c.333]

В основе всех иммунологических реакций лежит один и тот же первичный процесс соединения антигена с антителом. Преципитация, агглютинация, цитолиз и другие более сложные реакции являются вторичным выражением этого процесса. Самой простой из всех реакций антигена с антителом является реакция преципитации растворенного антигена соответствующим антителом. Используя антигены, содержащие окрашенные группы, изотопы или какие-нибудь легко определимые химическим путем элементы, можно провести количественный анализ преципитата и установить его состав при различных условиях. Подобные исследования были проведены многими авторами, использовавшими такие меченые антигены, как гемоглобин, иодированные белкИ, фосфопротеиды, азобелки и гемоцианин. [c.342]

Ли [130] исследовал кинетику иодирования белков и показал, что не все остатки тирозина реагируют с одинаковой скоростью. В растворе, содержащем мочевину, фенольные группы реагируют с иодом легче, чем в отсутствие этого денатурирующего агента, что позволяет сделать предположение о большей доступности указанных групп после денатурирования белка. [c.317]

Иодирование белков производили для разных целей для придания им тиреоидной активности для определения активных центров гормонов и ферментов для изменения антигенной активности для модифицирования белка путем введения в него тяжелых атомов в известные положения и дальнейшего проведения рентгеноструктурных исследований для установления взаимодействия боковых цепей, а также для проведения аминокислотного анализа и определения концевых групп. [c.351]

Щитовидная железа является необычным органом в том отношении, что она состоит из множества мешочков, или фолликул, внутренняя поверхность которых образована апикальными отделами соединенных между собой секреторных клеток, образующих один слой. Представляет интерес одна из особенностей строения щитовидной железы, обусловленная эволюционным развитием железы из пищеварительного тракта [76], а именно то, что бесчисленные микроворсинки, расположенные на мембране клетки, обращенной внутрь фолликула, выступают в виде пальцев в коллоид, заполняющий просвет фолликула. Основные функции фолликулов щитовидной железы заключаются в синтезе иодированного белка, сохранении его, а затем переваривании запасной формы гормона и превращении его в активную форму, что позволяет быстро регулировать уровень гормона щитовидной железы в крови в соответствии с потребностями организма. У большинства видов животных запасной формы гормона щитовидной железы достаточно на много дней и недель, и на основании этого можно предположить, что скорость биосинтеза тиреоглобулина и секреция активной формы гормона значительно ниже, чем скорость синтеза и секреции, например, гормона коры надпочечников, который содержится в этой железе в значительно меньшем количестве. [c.227]

А. Иодирование белков клеточной поверхности с помощью [c.182]

Б. Непрямое иодирование белков, нуклеиновых кислот и других [c.417]

Все работы по иодированию белка следует вести под тягой из-за выделения в воздух паров радиоактивного иода. [c.237]

Очистку иодированного белка от ионного иода проводили на анионообменной смоле дауэкс 1X16. Выход по иоду-131 составлял 60—70%, по белку — 70—80% [c.515]

Применение смолы с высоким процентом дивинилбензола — дауэкс 1X16 (16%), обладающей меньшей сорбционной способностью по отношению к белкам, особенно к низкомолекулярным, и большей специфической сорбцией иодид-нона, дало возможность уменьшить потери иодированного белка и увеличить чистоту меченого препарата. [c.515]

Нерастворимая в кислотах фракция гидролизата иодированного белка о-Метиловый эфир тироксина 3,5-дииодтиронин 1 тироксин. Идентификация 1) Бумажная 3) Бумага-1-2 и. раствор аммиака 4) Бутил, спирт амил, спирт 1 1 202 [c.273]

Прилипание иодированного белка к рибосомам весьма специфично н целиком определяется присутствием в нем гаптенноп дпнитрофенильной группы. Прилипший радиоактивный белок не отмывается ни буфером, ни солевым раствором, по е-динитро-фениллизипом [c.506]

Иодирование представляет собой единственный случай, когда химическое изменение инертного белка сопровождается появлением у него физиологической активности. Исследование иодированных белков, начатое более пятидесяти лет тому назад, было тщательно подытожено с биохимической точки зрения Рочем и Мичелом [125]. Эти авторы уделили особое внимание природным иодсодержащим белкам — тироглобулинам и иодированным скле-ропротеинам беспозвоночных — и рассмотрели процессы образования и активность белков, подвергнутых искусственному [c.315]

Во всех проверенных реакциях иодирования белков участвуют тирозин или его производные. При низких концентрациях иодида и в. нейтральных или щелочных растворах иод преимущественно вступает в реакцию замещения с фенольными группами и почти не окисляет белок. Из природных и синтетических иод-содержащих белков были выделены три иодированные аминокислоты 2-иодтирозин, 3,5-дииодтирозин и тироксин. Выделение тироксина из иодированного казеина [127] в настоящее время принимается установленным, однако механизм его образования остается неясным. Херриотт [129а] выделил моноиодтирозин из пепсина, обрабатывавшегося разбавленным раствором иода таким образом, что в молекулу были введены только два атома иода эта работа вызвала полемику [128]. Однако обычно иод [c.316]

По методу Фолина (в модификации Херриотта) дииодтирозин дает при рН 8 в два раза менее интенсивную окраску, чем тирозин, так что этот способ оказывается непригодным для решения поставленной проблемы. Однако с реактивом Миллона дииодтирозин дает отрицательную реакцию, и основанные на этой пробе методы могут быть применены для определения в иодированных белках количества тирозильных остатков с незамещенными 3,5-положениями. Если протекает только реакция замещения, то должна связываться половина потребляемого количества иода. Таким образом, долю реакций окисления и замещения можно определить, сравнивая количество израсходованного иода с тем его количеством, которое органически связывается белком. Для определения скорости расходования иода пользуются иодометри- [c.317]

Зобом называют любое увеличение щитовидной железы. Простой зоб является результатом попытки организма компенсировать сниженное образование тиреоидных гормонов, поэтому все случаи простого зоба сопровождаются повышением уровня тиреотропина. Причинами таких нарушений могут быть недостаток иодида, избыток иодида при недостаточности ауторегуляторного механизма и различные редкие дефекты метаболизма, иллюстрирующие важность отдельных стадий биосинтеза тиреоидных гормонов. К подобным дефектам относятся 1) нарушение транспорта 2) нарушение иодирования 3) нарушение реакции конденсации 4) недостаточность деиодиназы и 5) образование аномальных иодированных белков. Частичная недостаточность перечисленных функций может вызвать простой зоб у взрослых людей. Любая из этих причин возникновения простого зоба, если она резко выражена, приводит к гипотиреозу. Простой зоб лечат экзогенными тиреоидными гормонами. При специфических формах зоба рекомендуют увеличение или ограничение потребления иода. [c.192]

Тироксин и 3,5-дииодтирозин восстанавливаются на ртутном капельном электроде. Г. Симпсон с сотрудниками использовали в качестве фона смесь 0,5 н. раствора карбоната натрия с тетраметиламмонийиодидом и определили в смеси тиооксин и дииодтирозин. Разработали метод анализа тироксина в иодированных белках в присутствии излишка динодтирозина. [c.183]

Последовательность операций при иодировании белка такова в полистироловую пробирку размером 70Х 12 мм вносят по ilO мкл раствора Na I и Na-фосфатного буфера, а затем быстро, с непрерывным перемешиванием (с помощью микромагнитика) добавляют по 10 мкл растворов белка и Хлорамина Т. [c.237]

Иодирование белков после их фракционирования электрофорезом можно производить прямо в геле путем вымачивания era в соответствующих растворах N a I, Хлорамина Т и тиосульфата натрия и последующих отмывок невключившихся предшественников. Это позволяет детектировать методом непрямой авторадиографии не обнаруживаемые иными способами белковые полосы [ hristopher et al., 1978]. Разумеется, расход изотопа и Хлорамина Т при этом очень велик. [c.238]

После этого определяют исходную у-радиоактивность (все последующие просчеты радиоактивности ведут в том же объеме и в таких же пробирках). Очистку иодированного белка от невклю-ченной радиоактивности проводят путем гель-фильтрации, как было описано для иодирования с Хлорамином Т. Подсчет радиоактивности, включенной в белок, проводят так же по разности исходной суммарной и низкомолекулярной (после сефадекса) радиоактивностей. [c.240]

Планируя реакцию иодирования белка с помощью реактива Болтона — Хантера, надо иметь в виду, что в воде он легко разлагается, отщепляя N-оксисукцинимид. Время полураспада при pH 8,5 составляет всего 9 мин. В мягких условиях реактив присоединяет метку пептидной связью в основном по концевым аминогруппам белка. До сих пор для иодирования белка успешно используют первоначальную методику [Bolton, Hunter, 1973]. [c.243]

Важное, а иногда и решающее значение при выборе метода иодирования белка имеет вопрос о сохранении его биологической активности. Болтон и Хантер в упомянутой работе 1973 г. продемонстрировали сохранение иммунореактивности многих белков после обработки предложенным ими реактивом. Недавно было тщательно обследовано влияние метода иодирования на биологические свойства кальмодулина. Оказалось, что иодирование с Хлорамином Т приводит к его полной инактивации, лактопероксидазный метод угнетает активность белка весьма существенно, а иодирование с помощью реактива Болтона— Хантера полностью сохраняет его биологическую активность [ haiouleas et al., 1979]. [c.244]

Конечный результат этой реакции тот же — иодирование белка по остаткам тирозина. Радиоактивный иод также вводится в виде Na I (илиНа Ч), но вместо принудительного окисления аниона иода до катиона последний вводят в инкубационную смесь одновременно с Na Ч в виде нерадиоактивного хлористого иода (I I). Радиоактивный и нерадиоактивный иод равноправны в этих двух соединениях, поэтому между ними мгновенно происходит обмен, в результате чего в растворе в равновесной концентрации появляется 1С1, т. е. необходимый для иодирования тирозина катион радиоактивного иода ( 1+). [c.244]

Na и I I добавляют к раствору белка эквимолярно, в. четырехкратном молярном избытке по отношению к белку. Белок растворяют в 0,2 М боратном буфере (pH 8), Na I вносят в том же буфере, а затем при быстром перемешивании до-бавляют раствор I I в ОД М НС1 с 0,15 М Na l в объеме, равном примерно 0,1 объема смеси. Иодирование белка заканчивается за 1 мин. Затем для восстановления свободного Na I добавляют избыток тиосульфата натрия. Очевидно, что в этом случае нельзя избежать включения в белок 50% холодных атомов иода, однако с учетом высокой УА исходных препаратов Na I такое разбавление радиоактивности приемлемо и даже окупается простотой метода. Очистку белка от предшественников можно вести обычным способом. [c.245]

Получение иодированных антигенов не всегда простая задача, особенно из-за необходимости проводить его таким образом, чтобы вещество не подвергалось риску потерять хотя бы часть своих антигенных свойств. Иодирование белков, аминогрупп или гаптенов, содержащих аминогруппу, можно проводить с применением 1-3-(4-оксифенил)пропионовой кислоты в виде ее Ы-оксисукци-нимидного эфира. Для белков, содержащих остатки тирозина, или для гаптенов с фенольными группами подходят различные методы иодирования ароматического кольца. Нуклеиновые кислоты можно иодировать по цитозиновым остаткам. [c.261]

Химические реакции полимеров том 2 (1967) -- [ c.351 , c.352 ]

Новые методы анализа аминокислот, пептидов и белков (1974) -- [ c.348 , c.350 , c.353 , c.357 , c.371 , c.374 ]

Химия и биология белков (1953) -- [ c.41 , c.128 , c.149 , c.292 , c.314 , c.329 , c.332 , c.333 , c.338 , c.341 ]

Белки Том 1 (1956) -- [ c.9 , c.15 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология